本申請涉及藥物產(chǎn)品中鹽酸乙胺丁醇和(+)-2-氨基丁醇檢測，尤其涉及基于rp-hplc-nqad法同時測定（+）-2-氨基丁醇和鹽酸乙胺丁醇的方法。

背景技術(shù)：

1、鹽酸乙胺丁醇是乙胺丁醇的鹽酸鹽形式，乙胺丁醇是一種乙二胺衍生物，具有抗菌活性，對分枝桿菌有特殊療效。鹽酸乙胺丁醇可抑制霉菌酸與細菌細胞壁的結(jié)合，從而阻礙細菌細胞的生長。此外，它還能抑制其他細胞代謝過程，最終阻止細胞增殖并誘導(dǎo)細胞死亡。如今，世界衛(wèi)生組織推薦將鹽酸乙胺丁醇廣泛用于肺結(jié)核的治療。藥物的含量和雜質(zhì)是關(guān)鍵的質(zhì)量屬性，會影響藥品的質(zhì)量、安全性和有效性。對于鹽酸乙胺丁醇藥物中，鹽酸乙胺丁醇和(+)?2-?氨基丁醇是常見的檢測參數(shù)。而由于鹽酸乙胺丁醇和(+)?2-?氨基丁醇均是極性藥用化合物，缺乏紫外發(fā)色團，無疑增加分析的難度。

2、在各國藥典中，通常采用薄層色譜法或熒光光譜法測定?(+)?2-?氨基丁醇。鹽酸乙胺丁醇在特定的ph值條件下，能夠與cu2+發(fā)生配位形成絡(luò)合物，從而能夠用紫外檢測器測定該絡(luò)合物。如中國藥典采用rp-hplc法檢測鹽酸乙胺丁醇片的含量，以ph值為5.0的醋酸鹽緩沖溶液（含醋酸銨和醋酸銅）和甲醇為流動相，在270?nm?波長下測定乙胺丁醇。該方法存在的缺陷為：流動相中的銅離子會導(dǎo)致色譜峰拖尾象，并縮短色譜柱的使用壽命。

3、又如在文獻中報道，通過使用衍生化試劑(r)-(+)-α-甲基芐基異氰酸酯，進行柱前衍生，實現(xiàn)了rp-hplc與紫外檢測器聯(lián)用測定抗結(jié)核藥復(fù)方制劑中鹽酸乙胺丁醇的含量和溶出度。該方法存在的缺陷為：衍生化分析的前處理過程復(fù)雜，且衍生化試劑有很大毒性。

4、因此，如何實現(xiàn)同時適用于檢測鹽酸乙胺丁醇和(+)-2-氨基丁醇化合物，且實現(xiàn)檢測靈敏度高，兩種化合物互不干擾檢測結(jié)果的方法是亟待解決的技術(shù)問題。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明提供了基于rp-hplc-nqad法同時測定（+）-2-氨基丁醇和鹽酸乙胺丁醇的方法，該方法具有可同時檢測鹽酸乙胺丁醇和(+)-2-氨基丁醇化合物含量，且實現(xiàn)了上述兩種化合物檢測過程中互不干擾結(jié)果，無衍生化步驟，準確度高，靈敏度高，耐用性好的優(yōu)點。

2、本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)的：

3、基于rp-hplc-nqad法同時測定（+）-2-氨基丁醇和鹽酸乙胺丁醇的方法，該方法包括如下步驟：

4、?s01：制備鹽酸乙胺丁醇和（+）-2-氨基丁醇的標準曲線；

5、?s02：取鹽酸乙胺丁醇片劑，研磨成粉末狀，得到鹽酸乙胺丁醇片劑粉末；

6、?s03：在所述的鹽酸乙胺丁醇片劑粉末中加入純凈水，超聲溶解，分別用相水稀釋至2?mg/ml和0.25?mg/ml，并將上述得到的兩種鹽酸乙胺丁醇片劑溶液經(jīng)?0.22?μm?的水膜過濾，分別得到兩種上機分析液；

7、?其中，濃度為2?mg/ml的鹽酸乙胺丁醇片劑粉末溶液作為檢測（+）-2-氨基丁醇含量的上機分析液；濃度為0.25?mg/ml的鹽酸乙胺丁醇片劑粉末溶液作為檢測鹽酸乙胺丁醇含量的上機分析液；

8、?s04：上機分析液經(jīng)反相高效液相色譜串聯(lián)水凝粒子激光技術(shù)檢測器檢測后，計算得到鹽酸乙胺丁醇和（+）-2-氨基丁醇的含量。

9、作為優(yōu)選，步驟s01包括：準確稱取?20?毫克（+）-2-氨基丁醇和鹽酸乙胺丁醇對照品，分別溶于?20?毫升和?10?毫升水中，對應(yīng)制備得到（+）-2-氨基丁醇儲備液和鹽酸乙胺丁醇儲備液；用水稀釋（+）-2-氨基丁醇儲備液和鹽酸乙胺丁醇儲備液，制成一系列線性溶液，濃度范圍分別對應(yīng)為4μg/ml至60?μg/ml和5至500?μg?/ml。

10、作為優(yōu)選，在步驟s04中，色譜分離條件為：

11、?固定相為capcell?pak?c18?色譜柱4.6×250?mm,?5?μm，流動相為0.05-0.2%三氟乙酸溶液和甲醇的混合液，等度洗脫，流速為1.0?ml/min；

12、?柱溫保持在30℃，進樣量為?10?μl；

13、?nqad采用流量為4.7?l/min的氮氣作為霧化氣體，霧化溫度為15℃-30℃，氣化溫度為20?℃-90?℃，過濾時間為5秒。

14、作為優(yōu)選，三氟乙酸溶液和甲醇的體積比為94:6。

15、作為優(yōu)選，三氟乙酸溶液的體積百分含量為0.1%。

16、作為優(yōu)選，霧化溫度為30℃。

17、作為優(yōu)選，氣化溫度為70?℃。

18、作為優(yōu)選，在步驟s03中，超聲功率為360w，超聲時間為5min。

19、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本申請的技術(shù)方案所具備的優(yōu)點或有益效果包括：

20、?1、本方法適用于同時測定缺乏紫外發(fā)色團的（+）2-氨基丁醇和鹽酸乙胺丁醇，無需針對（+）2-氨基丁醇和鹽酸乙胺丁醇分別采用不同的實驗步驟進行檢測，極大提升了實驗效率。

21、2、在本方法檢測步驟中，樣本前處理時，無需進行衍生化操作，既簡化了檢測步驟，縮短了實驗時間，提高了分析效率，也避免了實驗人員接觸有毒的衍生化試劑。

22、3、采用本方法用于檢測（+）2-氨基丁醇和鹽酸乙胺丁醇過程中，（+）2-氨基丁醇和鹽酸乙胺丁醇不會互相干擾導(dǎo)致檢測結(jié)果受到影響。

23、4、本方法檢測結(jié)果準確度高、靈敏度高、耐用性好。

技術(shù)特征：

1.基于rp-hplc-nqad法同時測定（+）-2-氨基丁醇和鹽酸乙胺丁醇的方法，其特征在于，包括如下步驟：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于rp-hplc-nqad法同時測定（+）-2-氨基丁醇和鹽酸乙胺丁醇的方法，其特征在于，步驟s01包括：準確稱取?20?毫克（+）-2-氨基丁醇和鹽酸乙胺丁醇對照品，分別溶于?20?毫升和?10?毫升水中，對應(yīng)制備得到（+）-2-氨基丁醇儲備液和鹽酸乙胺丁醇儲備液；

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于rp-hplc-nqad法同時測定（+）-2-氨基丁醇和鹽酸乙胺丁醇的方法，其特征在于，在步驟s04中，色譜分離條件為：

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的基于rp-hplc-nqad法同時測定（+）-2-氨基丁醇和鹽酸乙胺丁醇的方法，其特征在于，三氟乙酸溶液和甲醇的體積比為94:6。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的基于rp-hplc-nqad法同時測定（+）-2-氨基丁醇和鹽酸乙胺丁醇的方法，其特征在于，三氟乙酸溶液的體積百分含量為0.1%。

6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的基于rp-hplc-nqad法同時測定（+）-2-氨基丁醇和鹽酸乙胺丁醇的方法，其特征在于，霧化溫度為30℃。

7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的基于rp-hplc-nqad法同時測定（+）-2-氨基丁醇和鹽酸乙胺丁醇的方法，其特征在于，氣化溫度為70?℃。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于rp-hplc-nqad法同時測定（+）-2-氨基丁醇和鹽酸乙胺丁醇的方法，其特征在于，在步驟s03中，超聲功率為360w，超聲時間為5min。

技術(shù)總結(jié)
本申請公開了基于RP?HPLC?NQAD法同時測定（+）?2?氨基丁醇和鹽酸乙胺丁醇的方法，具體涉及藥物檢測技術(shù)領(lǐng)域。該方法包括如下步驟：制備鹽酸乙胺丁醇和（+）?2?氨基丁醇的標準曲線；取鹽酸乙胺丁醇片劑，研磨成粉末，得到鹽酸乙胺丁醇片劑粉末；在所述的鹽酸乙胺丁醇片劑粉末中加入純凈水，超聲溶解，分別用水稀釋至2?mg/ml和0.25?mg/ml，分別得到兩種上機分析液；上機分析液經(jīng)反相高效液相色譜串聯(lián)水凝粒子激光技術(shù)檢測器檢測后，計算得到鹽酸乙胺丁醇和（+）?2?氨基丁醇的濃度。該方法具有可同時檢測鹽酸乙胺丁醇和（+）?2?氨基丁醇化合物含量，且實現(xiàn)了上述兩種化合物檢測過程中互不干擾結(jié)果，前處理無需衍生，準確度高，靈敏度高，耐用性好的優(yōu)點。

技術(shù)研發(fā)人員：羅英,劉超,阮昊,楊茜,洪利婭,石云峰,劉柱
受保護的技術(shù)使用者：浙江省食品藥品檢驗研究院
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/6