本發(fā)明屬于藥物分析，具體涉及一種利用hplc測定lh-2103膠囊中雜質(zhì)含量的方法。

背景技術(shù)：

1、lh-2103膠囊用于治療良性前列腺增生癥，改善因良性前列腺增生的有關(guān)癥狀，是愛普列特和賽洛多辛的復(fù)方制劑（lh-2103膠囊為專利申請cn116726024a中實施例1制備的藥物）。愛普列特是非競爭性ii型5α還原酶抑制劑，可抑制體內(nèi)睪酮向雙氫睪酮（dht）的轉(zhuǎn)變，從而縮小前列腺體積、改善排尿困難；賽洛多辛為α受體阻滯劑，可松弛前列腺和膀胱頸部平滑肌，改善排尿障礙，降低良性前列腺增生癥癥狀。兩者相結(jié)合可針對良性前列腺增生癥引起的尿道腔狹窄和前列腺平滑肌肌張力增強，分別發(fā)揮縮小前列腺體積和松弛平滑肌的作用。

2、臨床試驗結(jié)果表明，lh-2103膠囊中的愛普列特和賽洛多辛均具有明確的有效性基礎(chǔ)，且兩藥的安全性均較好，安全性信息提示兩種藥物未有明顯需警示的毒性譜重疊，是一個具有潛力的治療良性前列腺增生癥的臨床候選藥物。

3、lh-2103膠囊在國內(nèi)外均未上市，該制劑的分析方法尚無文獻(xiàn)報道。為了保證lh-2103膠囊后續(xù)的研發(fā)和生產(chǎn)質(zhì)量，需要對其的質(zhì)量進(jìn)行控制。因此，研究建立一種快速、有效地檢測lh-2103膠囊有關(guān)物質(zhì)含量的方法，這對醫(yī)藥生產(chǎn)企業(yè)來說顯得尤為迫切。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明解決的技術(shù)問題：提供一種可行性高、操作過程簡單方便、適用性好，可以廣泛應(yīng)用于測定lh-2103膠囊有關(guān)物質(zhì)含量的高效液相色譜分析法，充分滿足產(chǎn)品中各雜質(zhì)的定性與定量分析，使產(chǎn)品質(zhì)量得到有效控制。

2、為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：

3、一種利用hplc測定lh-2103膠囊中雜質(zhì)含量的方法，包括以下步驟：

4、1）配制供試品溶液和對照溶液；

5、2）設(shè)置高效液相檢測條件：采用以c18為填充劑的反相色譜柱，流動相由a相和b相組成，其中a相為磷酸鹽緩沖液，b相為有機溶劑，進(jìn)行梯度洗脫；

6、梯度洗脫條件為：0~5min，流動相a的體積含量為70~80%、流動相b的體積含量為20~30%；5~12min，流動相a的體積含量由70~80%變?yōu)?0~70%、流動相b的體積含量由20~30%變?yōu)?0~40%；12~25min，流動相a的體積含量由60~70%變?yōu)?0~60%、流動相b的體積含量由30~40%變?yōu)?0~60%；25~35min，流動相a的體積含量由40~60%變?yōu)?0~40%、流動相b的體積含量由40~60%變?yōu)?0~70%；35~40min，流動相a的體積含量由30~40%變?yōu)?0~30%、流動相b的體積含量由60~70%變?yōu)?0~90%；40~65min，流動相a的體積含量為10~30%、流動相b的體積含量為70~90%；65~65.1min，流動相a的體積含量由10~30%變?yōu)?0~80%、流動相b的體積含量由70~90%變?yōu)?0~30%；65.1~75min，流動相a的體積含量為70~80%、流動相b的體積含量為20~30%；

7、3）分別精密量取供試品溶液和對照溶液，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，計算對照溶液濃度的值與相應(yīng)峰面積值的線性回歸方程。

8、作為優(yōu)選，所述步驟2）中，梯度洗脫條件為：0~5min，流動相a的體積含量為78%、流動相b的體積含量為22%；5~12min，流動相a的體積含量由78%變?yōu)?0%、流動相b的體積含量由22%變?yōu)?0%；12~25min，流動相a的體積含量由60%變?yōu)?5%、流動相b的體積含量由40%變?yōu)?5%；25~35min，流動相a的體積含量由55%變?yōu)?5%、流動相b的體積含量由45%變?yōu)?5%；35~40min，流動相a的體積含量由35%變?yōu)?5%、流動相b的體積含量由65%變?yōu)?5%；40~65min，流動相a的體積含量為25%、流動相b的體積含量為75%；65~65.1min，流動相a的體積含量由25%變?yōu)?8%、流動相b的體積含量由75%變?yōu)?2%；65.1~75min，流動相a的體積含量為78%、流動相b的體積含量為22%。

9、作為優(yōu)選，所述步驟2）中，磷酸鹽緩沖液為磷酸二氫鉀溶液，磷酸二氫鉀溶液的ph為3.3~3.5，有機溶劑為乙腈溶液。更優(yōu)選，磷酸二氫鉀溶液的ph為3.4。

10、作為優(yōu)選，所述步驟2）中，流動相流速為0.95~1.05?ml/min，柱溫為38~42℃。更優(yōu)選，流動相流速為1?ml/min，柱溫為40℃。

11、作為優(yōu)選，所述步驟2）中，色譜柱為shim-pack?gist?c18，規(guī)格為4.6mm×250mm，填料粒徑為5μm。

12、作為優(yōu)選，所述步驟3）中，液相色譜儀的檢測波長為225nm和270nm。

13、作為優(yōu)選，進(jìn)樣量為20μl。

14、作為優(yōu)選，所述步驟1）中，供試品溶液的制備過程為：取lh-2103膠囊內(nèi)容物，加稀釋劑溶解并定量稀釋制成每1ml中含1mg愛普列特和0.8mg賽洛多辛的溶液，過濾，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

15、對照溶液的制備過程為：取1ml供試品溶液，置于100ml容量瓶中，加稀釋劑稀釋至刻度，再精密量取1ml，置10ml量瓶中，用稀釋劑稀釋到刻度，作為對照品溶液。

16、作為優(yōu)選，所述稀釋劑為甲醇-水，甲醇與水的體積比為7:3。

17、作為優(yōu)選，所述步驟3）中，根據(jù)色譜圖，以峰面積x為縱坐標(biāo)、濃度y為橫坐標(biāo)作線性回歸方程，檢測波長為225nm時，愛普列特的線性回歸方程為y=0.1319x+0.0001，愛普列特雜質(zhì)i的線性回歸方程為y=0.4559x-0.0103，賽洛多辛的線性回歸方程為y=0.8208x-0.0194，賽洛多辛雜質(zhì)a的線性回歸方程為y=1.1323x-0.0852，賽洛多辛雜質(zhì)b的線性回歸方程為y=1.1118x-0.0226，賽洛多辛雜質(zhì)c的線性回歸方程為y=1.2601x-0.0152，賽洛多辛雜質(zhì)d的線性回歸方程為y=1.0604x-0.014；檢測波長為270nm時，愛普列特的線性回歸方程為y=1.1954x-0.0230，愛普列特雜質(zhì)ii的線性回歸方程為y=1.1295x-0.0213。

18、有益效果：與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下優(yōu)點：

19、（1）本發(fā)明采用高效液相法測定lh-2103膠囊有關(guān)物質(zhì)的含量，可以同時分析愛普列特、賽洛多辛及其雜質(zhì)含量，解決未知雜質(zhì)對主成分及已知雜質(zhì)的干擾；

20、（2）本發(fā)明可以實現(xiàn)愛普列特、賽洛多辛和雜質(zhì)之間能很好分離；其他雜質(zhì)、輔料峰及溶劑峰不干擾檢測；在各破壞條件下輔料及供試品產(chǎn)生的降解產(chǎn)物不干擾各雜質(zhì)的測定，有關(guān)物質(zhì)檢測專屬性良好；同時色譜條件參數(shù)發(fā)生微小變化時，對主成分與雜質(zhì)的分離與檢查結(jié)果沒有影響，耐用性良好；

21、（3）本發(fā)明能夠快速、有效、準(zhǔn)確和可靠的分離檢測出lh-2103膠囊的雜質(zhì)情況，有利于提高lh-2103膠囊的產(chǎn)品質(zhì)量，提高患者用藥安全性；lh-2103膠囊為復(fù)方膠囊，且又作為2.3類新藥，為保證藥品質(zhì)量、保障患者的用藥安全，本發(fā)明為lh-2103膠囊有關(guān)物質(zhì)的分析提供了相應(yīng)的檢測方法，解決了lh-2103膠囊的質(zhì)量研究工作。