專利名稱：醚異腈及其放射性標(biāo)記配合物的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新穎的醚取代異腈及其放射性標(biāo)記配合物在心肌攝象中的應(yīng)用。
Jones等人于1984年6月5日出版的美國第4，452，77號專利中，敘述了各種不同的放射性異腈配合物及其作為攝象劑的應(yīng)用。Jones等人所敘述的配合物的通式是
式中A是選自放射性同位素Tc、Ru、Co、Pt、Fe、Os、Ir、W、Re、Cr、Mo、Mn、Ni、Rh、Pd、Nb和Ta的放射性核，例如，99Tc、99Tc、99Ru、51Cr、59Co、188Re和191Os;
(CN)xR是通過CN基的碳原子與放射性核鍵合的異腈一合配位體或異腈多合配位體;R是有機(jī)基;B和B′是從其他各自選自對于本技術(shù)領(lǐng)域?qū)I(yè)人員是眾所周知的可生成異腈配合物的配位體，其中包括水、氯和溴基、以及包括一個或多個能與上述放射性核形成鍵的供電子原子;X和Y各自為由1至8的整數(shù);Z和Z′各自為0或由1至7的整數(shù);但是(XY)+Z+Z′必須小于或等于8;而n表示配合物的價數(shù)，此價數(shù)可等于0(電中性)、或正、負(fù)整數(shù)，而配合物的具體價數(shù)則取決于A的價態(tài)和R、B和B′的電荷數(shù)。如果此配合物準(zhǔn)備用于體內(nèi)藥物時，則任何所需要的相反離子的存在可由配合物上的電荷的需要來確定，但是，這些相反離子必須是藥物可接領(lǐng)的離子。
在上述通式中，R可以是脂肪族或芳香族的有機(jī)基，而且可取代上各種各樣的帶電荷的或不帶電荷的基。當(dāng)上述有機(jī)基R上有帶電荷的取代基時，則所形成的配合物上的電荷數(shù)是配位體(R、B、和B′)的電荷數(shù)和放射性核的電荷數(shù)的總和?？纱嬖诘姆枷慊鵕是苯基、甲苯基、二甲苯基、萘基、二苯基以及帶有取代基的芳香基，該取代芳香基上的取代基可包括象鹵基、例如，氯基、溴基、碘基或氟基;羥基、硝基、烷基、烷氧基等;可存在的脂肪基R是烷基、最好是含有1至20個碳原子的烷基，例如，甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、正己基、2-乙基己基、十二烷基、十八烷基等。脂肪基上的取代基可包括與上述取代芳香基上相同的取代基。
Johes等人認(rèn)為他們所敘述的配合物可用于觀測心血管、檢查血液灌注短缺的肺及其有關(guān)聯(lián)部位的血栓、研究肺功能、研究腎排泄和拍攝骨髓和肝膽管系統(tǒng)。
實(shí)際上，Jones等人推薦的簡單烴類異腈的锝配合物，例如，叔丁基異腈，已證明在人的肝和肺中的濃度稍高〔Holman等人，J.Nucl，Med.，25，1380(1984)〕。肺中放射性核過早的高濃度要求推遲心臟的拍攝，以便在拍取有用的心肌像之前使肺機(jī)能恢復(fù)正常。此外，肝內(nèi)放射性核的濃度高，使檢查心肌尖部位的灌注短缺更加困難。顯然，需要有一種選擇性更高的心肌攝象的制劑。
本發(fā)明的目的是提供新穎的醚取代異腈及其診斷制劑(diagnostic kits)、這些異腈的放射性標(biāo)記配合物(最好是Tc99m)、和應(yīng)用放射性配合物的診斷方法。雖然Jones等人在美國第4，452，774號專利公開的通式包括了本發(fā)明的放射性標(biāo)記的、醚取代的異腈配合物，但是并未具體公開象本發(fā)明這樣的配合物，同時Jones等人也未設(shè)想過這些醚取代異腈所具有的令人注目的優(yōu)越攝象特性。
更具體地來說，本發(fā)明的一個內(nèi)容是提供一種通式Ⅰ的新穎醚取代異腈(及其制劑)
CN-A-O-RⅠ式中A是直鏈或支鏈烷基和R是直鏈或支鏈烷基，條件是A加R的碳原子總數(shù)等于4至6，另一個條件是當(dāng)A加R的碳原子總數(shù)等于6時，與異腈基連接的第一個碳原子是季碳原子，再一個條件是A不是(CH2)3。
本發(fā)明的另一個內(nèi)容是涉及這些通式為〔M(CN-A-O-R)6〕的醚異腈的新穎放射性標(biāo)記配合物，式中M是放射性核，最好是Tc 99m。本發(fā)明的另一個內(nèi)容是涉及這些放射性標(biāo)記異腈配合物作為心肌攝象劑的應(yīng)用。
將通式Ⅱ的一種烷氧基胺甲?；上鄳?yīng)的甲酰胺Ⅲ，然后將其脫水為異腈Ⅰ，即可容易地制備本發(fā)明的異腈。
文獻(xiàn)中有各種各樣的甲?；兔撍磻?yīng)的方法，這些方法對于有機(jī)合成的專業(yè)人員都是十分熟悉的。
胺Ⅱ可用本專業(yè)人員熟知的各種方法來制備。尤其是可在有酸性催化劑存在的情況下，用一種醇將氮丙啶Ⅳ開環(huán)，生成可用蒸餾方法分離的胺Ⅴ和胺Ⅳ二種胺的混合物。
另一方面，胺可用烷氧基酯Ⅶ來制備，其中A′是2或3個碳原子的烴。將烷氧基酯Ⅶ與氨或氫氧化銨起反應(yīng)生成酰胺Ⅷ，然后用氫化鋰鋁或另一種熟知的還原劑來還原酰胺即可制得胺Ⅸ。
胺Ⅱ亦可用烷氧基酯Ⅹ來制備?？砂瓷鲜霾襟E進(jìn)行生成酰胺Ⅺ。將Ⅺ進(jìn)行霍夫曼重排即可產(chǎn)生胺Ⅱ。
另一方面，可將氨基醇Ⅻ首先與一甲?；瘎?，例如甲酸乙酯或甲酸乙酸酐起反應(yīng)，形成甲酰胺-甲酸酯ⅩⅢ來制備醚異腈?？砂瓷鲜鰧⑵渌柞０忿D(zhuǎn)化為異腈的方法，將甲酰胺-甲酸酯轉(zhuǎn)化為異腈-甲酸酯ⅩⅣ。適度水解可產(chǎn)生異腈-醇ⅩⅤ，然后在象應(yīng)用氫化鈉和鹵代甲烷，例如碘代甲烷，的標(biāo)準(zhǔn)烷基化條件下將此異腈-醇ⅩⅤ烷基化。
在本發(fā)明的實(shí)踐中，有用的醚取代異腈包括
現(xiàn)將制備這些醚取代異腈的具體實(shí)例詳述如下。
制備1合成1-甲氧基-2-甲基丙基-2-胺和2-甲氧基-2-甲基丙基-1-胺A.合成2，2-二甲基氮丙啶將2-氨基-2-甲基-1-丙醇(100克，1.12摩爾)溶于水(200毫升)中，并置于1000毫升的圓底燒瓶中。將濃硫酸(100克，1.12摩爾)溶于水(200毫升)并加入胺溶液中。將所得的溫?zé)崛芤涸诔合抡麴s。當(dāng)溫度升至120℃時，將壓力減至吸氣器壓力(約20毫米汞柱)，繼續(xù)蒸餾至餾出液的溫度達(dá)到150℃。將所得的棕色膠置于真空下(約1毫米汞柱)并在170°～200℃下加熱1.5小時。有一些碳化，得到一種固體。將燒瓶包在保護(hù)墊中，然后再將燒瓶打破，拋棄碎玻璃。用槌子將固體打碎，然后用研杵研磨至大部分成為細(xì)粉末，其中碎粒的直徑不大于1/4″。將固體加入含有氫氧化鈉(100克，2.5摩爾)的水(150毫升)溶液中。用鹽水浴將懸浮液加熱至110℃，固體即緩緩溶解形成一種黑色溶液。在70～88℃下，將產(chǎn)物從此溶液中蒸餾到氫氧化鈉顆粒(25克，0.63摩爾)上。到蒸餾結(jié)束時，在容器中形成了一種白色的沉淀。用玻璃毛過濾后，除去水層并將產(chǎn)物用氫氧化鈉干燥，過濾，再用金屬鈉干燥。在70～73℃下將產(chǎn)物從金屬鈉中蒸餾出來，制得46.2克的透明無色產(chǎn)物(產(chǎn)率58%)。
NMR(CHCl3)δ0.1(s，1H，NH)、1.25(s，6H，CH3)、1.55(s，2H，CH2)B.合成1-甲氧基-2-甲基丙基-2-胺和2-甲氧基-2-甲基丙基-1-胺將2，2-二甲基氮丙啶(27.68克，0.39摩爾)溶于新蒸餾的甲醇(50克)中。將此溶液在冰/丙酮浴中冷卻至-10℃。將三氟化硼雙甲醇配合物(58.32克，0.44摩爾)溶于新蒸餾的甲醇(50克)中并在冰/丙酮浴中冷卻至-10℃。將冷卻后的三氟化硼溶液在20分鐘內(nèi)緩緩加入冷卻后的氮丙啶溶液中。令所得到的溶液慢慢地升至室溫。在室溫下將溶液攪拌7天，并在產(chǎn)物生成過程中用核磁共振進(jìn)行檢測。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)方法(25毫米汞柱、40℃)將溶液體積減至約原體積的一半。加入甲醇鈉在甲醇(95.04克的25%(w/w)溶液，0.594摩爾)中的溶液并得白色沉淀。加入二乙醚并過濾沉淀。將仍然混濁的溶液進(jìn)行蒸餾，并當(dāng)溫度達(dá)到60℃時，將其再進(jìn)行過濾。繼續(xù)蒸餾并獲得二種胺的混合物(14.24克，35%)。小心地進(jìn)行分餾，將二種胺分離，即可制得純2-甲氧基-2-甲基丙基-2-胺(沸點(diǎn)123～124℃)，NMR(CDCl3)δ1.2(s，8H，NH2CH3)、2.7(s，2H，CH2)、3.3(s，3H，CH3O)和1-甲氧基-2-甲基丙基-2-胺(沸點(diǎn)103～104℃)，NMR(CDCl3)δ1.1(s，6H，CH3)、1.6(bs，2H，NH2)、3.1(s，2H，CH2)、3.4(s，3H，CH3O)。
制備2合成2-甲氧基-2-甲基丙基-1-胺A.合成2-甲氧基-2-甲基丙酸甲酯將二甲基甲酰胺(100毫升)和四氫呋喃(300毫升)置于1000毫升裝有溫度計(jì)、機(jī)械攪拌器和滴液漏斗的三口圓底燒瓶中。加入氫化鈉在油中的80%的分散體(19.80克，0.66摩爾)，形成一種灰色懸浮液。將懸浮液在冰水浴中冷卻。將羥基異丁酸甲酯(70.8克，0.60摩爾)溶于四氫呋喃(50毫升)并將其緩緩加入溫度保持低于15℃的冷卻氫化鈉懸浮液中。將所得到的懸浮液攪拌一小時。將四氫呋喃(25毫升)中含有甲基碘(新蒸餾的、108.75克，0.75摩爾)的溶液緩緩加入冷的懸浮液中。用1.5小時來進(jìn)行滴加，在滴加過程中溫度保持低于15℃。攪拌懸浮液并令其升至室溫和保持15小時。將懸浮液傾入乙酸乙酯(300毫升)和水(300毫升)中。分離清晰層并用乙酸乙酯(300毫升)提取水相。將合并的有機(jī)層用含有亞硫酸氫鈉(10克)的水(200毫升)脫色。分離有機(jī)相并用硫酸鎂進(jìn)行干燥。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(25毫米汞柱、30℃)除去大部分的溶劑。在常壓下將所得到的溶液進(jìn)行蒸餾并在137～146℃下收集產(chǎn)物。產(chǎn)物中含有二甲基甲酰胺(DMF)，但是通過核磁共振鑒定，產(chǎn)物的產(chǎn)量為48.8克(61%)。
NMR(CHCl3)δ1.4(s，6H，CH3)、3.3(s，3H，CH3O醚)、3.8(s，3H，CH3O酯)。
B.合成2-甲氧基-2-甲基丙酰胺將2-甲氧基-2-甲基丙酸甲酯(42.24克，0.32摩爾，并帶有10.6克DMF)加入氫氧化銨(200毫升)。將得到的兩相系統(tǒng)在25～30℃下攪拌17小時。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(25毫米汞柱，50℃)將得到的透明均相溶液濃縮至產(chǎn)生白色沉淀。將濕固體溶于二氯甲烷(200ml)。分離水層并將二氯甲烷層通過二氧化硅塞。用二氯甲烷(100毫升)洗水層并將此二氯甲烷層亦通過二氧化硅塞。最后，將二氯甲烷(100毫升)通過二氧化硅塞并用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(25毫米汞柱，35℃)蒸發(fā)合并的二氯甲烷餾分，即可得到白色的結(jié)晶。將此白色結(jié)晶在真空中干燥，可得到29.5克(79%)的2-甲氧基-2-甲基丙酰胺。
NMR(CDCl3)δ1.4(s，6H，CH3)、3.3(9，3H，CH3O)、6.4(極寬b，2H，NH2)。
C.合成2-甲氧基-2-甲基丙基-1-胺將氫化鋰鋁(3.04克，0.08摩爾)加入250毫升的干雙口圓底燒瓶中。在任何時候燒瓶均須保持在干燥氮?dú)庵?。加入無水四氫呋喃(THF)(25ml)并攪拌懸浮液。將2-甲氧基-2-甲基丙基酰胺(81.9克、0.07摩爾)加入80毫升的無水四氫呋喃中并將此溶液緩緩加入氫化鋰鋁懸浮液?？刂频渭铀俣仁蛊渥阋员３诌M(jìn)行平緩的回流。用半小時來進(jìn)行滴加，將所得到的懸浮液再回流一小時。令懸浮液冷卻，在攪拌下逐滴加入3毫升水，隨后再加入3毫升15%氫氧化鈉。最后，加入9毫升水并使溫?zé)岬膽腋∫簲嚢?5分鐘。用中孔熔結(jié)玻璃漏斗過濾白色沉淀并反復(fù)用THF清洗沉淀。在常壓下蒸餾所合并的THF。在低于70℃下除去THF。將產(chǎn)物在約124℃蒸餾。
產(chǎn)量4.19克(58%)NMR(CDCl3)δ1.15(s，8H，CH3，NH2)、2.6(s，2H，CH2)、3.2(s，3H，CH3O)。
制備3合成N-(2-甲氧基-2-甲基丙基)甲酰胺將甲酸(19.2克，0.40摩爾)與乙酸酐(40.8克，0.40摩爾)混合，并在45～50℃下加熱一小時，然后在冰/丙酮浴中冷卻至約為0℃。將予先在冰/丙酮浴中冷卻至約0℃的2-甲氧基-2-，甲基丙基-1-胺緩緩加入并同時保持混合物的溫度低于12℃。在滴加結(jié)束后，令混合物緩緩升至室溫并在室溫下攪拌過夜。將溶液蒸發(fā)和將剩余物在97～107℃/1-2毫米汞柱壓力下蒸餾，即可得到43.2克(94%)的產(chǎn)物。
NMR(CDCl3)δ1.2(s，6H，CH3)、3.3(m，5H，CH3O和CH2)、6.6(b，1H，NH)、8.2(bs，1H，HCO)。
制備4N-〔2-(1-甲氧基丙基)〕甲酰胺將甲酸(16.80克，0.35摩爾)與乙酸酐(37.50克，0.35摩爾)混合并在45～50℃下加熱一小時，然后在冰/丙酮浴中冷卻至約0℃。將2-氨基-1-甲氧基丙烷(26.7克，0.30摩爾)在冰/丙酮浴中冷卻至低于0℃。將甲酸(25毫升)緩緩加入冷卻的胺中。將所得到的溶液進(jìn)一步冷卻至低于0℃。將胺溶液加入冷卻的甲酸-乙酸酐溶液，攪拌所得到的溶液并令其緩緩升至室溫過夜。在低壓(約1毫米汞柱)下蒸餾溶液，而甲酸、乙酸和甲酸-乙酸酐則全在低溫下蒸餾。在79～85℃下蒸餾產(chǎn)物，得到透明無色油狀產(chǎn)物。產(chǎn)量為33.13克(94%)。
NMR(CDCl3)δ1.05(d，3H，CH3-C)、3.4(M，5H，CH3O和CH2O)、4.2(M，1H，CH)、6.8(b，1H，N-H)、8.0(b，1H，HC-O)。
異腈的合成下列制備2-甲氧基-2-甲基丙基-1-異腈、1-甲氧丙基-2-異腈和3-異腈-3-甲基-1-甲氧基丁烷的合成路線也適用于制備上面詳述的醚化合物的其他相應(yīng)的異腈化合物。
1.制備2-甲氧基-2-甲基丙基-2-異腈將N-(2-甲氧基-2-甲基丙基)甲酰胺(1.97克，0.015摩爾)加入二氯乙烷(23毫升)中。加入三乙胺(4.04克，0.040摩爾)并將此透明溶液在冰/水浴中冷卻。將雙光氣(氯甲酸三氯甲酯，1.68克，0.0085摩爾)溶于二氯甲烷(10毫升)中并緩緩加入冷卻的甲酰胺溶液中(45分鐘)。攪拌2小時，令懸浮液升至室溫。然后將懸浮液傾入含有磷酸二氫鈉(6.90克，0.05摩爾)的水(25毫升)中。分離二氯甲烷層并用碳酸鈉干燥。然后在減壓(25毫米汞柱)下將溶液進(jìn)行蒸餾，在56～59℃下將產(chǎn)物進(jìn)行蒸餾，即可得到0.530克產(chǎn)物(產(chǎn)率31%)。
NMR(CDCl3)δ1.3(s，6H，CH3)、3.25(s，3H，CH3O)、3.4(m，2H，CH2)。
2.制備1-甲氧基丙基-2-異腈將N-〔2-(1-甲氧基丙基)〕甲酰胺(11.7克，0.10摩爾)溶于二氯甲烷(125毫升)中。加入三乙胺(30.30克、0.30摩爾)并將此透明溶液在冰/水浴中冷卻。將雙光氣(11.88克，0.06摩爾)溶于二氯甲烷(40毫升)中。將此雙光氣溶液緩緩加入冷卻的甲酰胺溶液中。攪拌所得到的懸浮液并令其緩緩升至室溫12小時。將懸浮液傾入含有碳酸鈉(42.4克，0.40摩爾)的水中。分離二氯甲烷層并用含磷酸二氫鈉(55.2克，0.40摩爾)的水洗滌。分離二氯甲烷層并用碳酸鈉(無水)干燥。
過濾溶液并在吸氣壓力(約25毫米汞柱)下蒸餾。在63～66℃下蒸餾產(chǎn)物。產(chǎn)品為5.83克(58.8%)。
NMR(CDCl3)δ1.05(6個相同的峰，3H，CH3C)、3.0(s，3H，CH3-O)、3.1(m，2H，CH2)、3.5(m，1H，CH)。
3.合成3-異腈-3-甲基-1-甲氧基丁烷A.合成3-甲酰胺-3-甲基-1-丁醇將3-氨基-3-甲基-1-丁醇(20.60克，0.20摩爾)加入甲酸乙酯(29.60克，0.40摩爾)，在氮?dú)夥障聦⑺玫那逦芤夯亓骷訜?小時，然后令其冷卻至室溫。用旋轉(zhuǎn)蒸餾法(35℃、25托)將甲酸乙酯和乙醇副產(chǎn)品除去。在減壓(25℃、0.1托)下將所得的油狀物干燥可得產(chǎn)物25.86克(99%)。
NMR(CDCl3)1.4(d，6H，CH3)、2.0(m，2H，C-CH2)、3.9(m，2H，O-CH2)、7.1(bs，1H，NH)、(m，1H，HCO)。
B.合成甲酸(3-甲酰胺-3-甲基-1-丁)酯將甲酸(6.90克，0.15摩爾)加入乙酸酐(15.30克，0.15摩爾)中并在水浴中溫?zé)嶂?5～50℃1小時。在冰/丙酮浴中將所得溶液冷卻至低于0℃。加入3-甲酰胺-3-甲基-1-丁醇(13.10克，0.10摩爾)并在不斷攪拌下(16小時)令溶液緩緩升至室溫。在減壓(1托、105～110℃)下將溶液蒸餾，即可獲得產(chǎn)物12.43克(78%)。
MNR(CDCl3)1.4(s，6H，CH3)、2.1(t，2H，C-CH2)、4.2(t，2H，O-CH2)、6.0(bs，1H，NH)、8.0(m，2H，HCOO)。
C.合成甲酸(3-異腈-3-甲基-1-丁)酯將甲酸(3-甲酰胺-3-甲基-1-丁)酯(11.13克，0.07摩爾)和三乙胺(21.21克，0.21摩爾)溶于二氯甲烷(350毫升)中。在氮?dú)夥障拢诒?水浴中將所得溶液冷卻。將氯甲酸三氯甲酯(雙光氣)(8.32克，0.042摩爾)溶于二氯甲烷(50毫升)并在30分鐘內(nèi)逐滴加入攪拌、冷卻的甲酰胺溶液中。攪拌所得懸浮液并令其在90分鐘內(nèi)升至室溫。將碳酸鈉(23克，0.22摩爾)水(250毫升)溶液加入此懸浮液中，并分離下面的有機(jī)層。用磷酸二氫鈉(30克，0.22摩爾)水(250毫升)溶液洗滌所分離的有機(jī)層。用碳酸鈉(無水，25克)干燥所得的有機(jī)層。將溶液過濾并在吸氣壓力(25托)下蒸餾。在低于室溫下蒸餾溶劑，并在96～102℃下蒸餾產(chǎn)物，即可獲得9.22克產(chǎn)品(93%)。
NMR(CDCl3)1.5(m，6H，CH3)、2.0(m，2H，C-CH2)、4.4(t，2H，O-CH2)、8.0(s，1H，HCO)。
D.合成3-異腈-3-甲基-1-丁醇將碳酸氫鈉(8.40克，0.10摩爾)和碳酸鈉(10.60克，0.10摩爾)溶于水(200毫升)中。加入甲酸(3-異腈-3-甲基-1-丁)酯并劇烈攪拌。令此混濁溶液在室溫下放置5小時。加入氯化鈉(10克，0.17摩爾)并將懸浮液攪拌15分鐘。用乙酸乙酯(3×100毫升)提取懸浮液。合并三次提取的有機(jī)層。用碳酸鈉(25克)干燥、過濾并在吸氣壓力(25托)下蒸餾。將產(chǎn)物在120℃下蒸餾，即可獲得產(chǎn)品5.38克(74%)。
NMR(CDCl3)1.5(m，6H，CH3)、2.0(m，2H，C-CH2)、3.0(bs，1H，OH)、4.0(t，2H，O-CH2)。
E.合成3-異腈-3-甲基-1-甲氧基丁烷將3-異腈-3-甲基-1-甲氧基丁醇(1.13克，0.01摩爾)溶于四氫呋喃(20毫升)和二甲基亞砜(2毫升)中。加入碘代甲烷(1.42克，0.01摩爾)并將溶液在室溫下攪拌5分鐘。將氫化鈉(80%油分散體，0.30克，0.01摩爾)在15分鐘內(nèi)逐次分批加入。加入15毫升水并分離有機(jī)層。用乙酸乙酯(2×20毫升)提取有機(jī)層，將二次提取的有機(jī)層合并用碳酸鈉(2克)干燥、過濾并在吸氣壓力(25托)下蒸餾。將產(chǎn)物在80～90℃下蒸餾，即可獲得產(chǎn)品0.48克(38%)。
NMR(CDCl3)1.5(m，6H，CH3)、2.0(m，2H，C-CH2)、3.4(s，3H，CH3)、3.6(t，2H，O-CH2)。
在由室溫至回流溫度或更高的溫度下，將異腈與放射性金屬在合適的介質(zhì)中混合，可制備所需要的放射性標(biāo)記的醚取代異腈配合物。所需要的標(biāo)記異腈配合物是不溶解的并可獲得高產(chǎn)量。在有些情況中，異腈本身可作為一種還原劑，因此不需要再加還原劑。當(dāng)需要和希望加速反應(yīng)時，所應(yīng)該加入的附加還原劑，對于專業(yè)人員來說，是眾所周知的。此種眾所周知的還原劑包括亞錫鹽(通常以制劑(kits)方式應(yīng)用)、甲脒亞磺酸、連二亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、羥胺、抗環(huán)血酸等。反應(yīng)一般在1分鐘至2小時后結(jié)束，具體結(jié)束時間則取決于所用的特殊試劑和條件。
在用象锝一類的放射性核時，例如99TC或99mTC，最好是將適當(dāng)?shù)倪€原劑(能夠在含水介質(zhì)中還原锝)和適當(dāng)?shù)拿讶〈愲婊旌希缓笤偌尤敫唢剿猁}來制備異腈配合物。另一種方法是，將醚取代異腈與高锝酸鹽混合，然后再加入還原劑來制備異腈配合物。
與本發(fā)明一致的異腈锝配合物還可用具有氧化態(tài)锝，例Ⅲ價、Ⅳ價或Ⅴ價锝的預(yù)制锝配合物，通過將這些預(yù)制配合物在合適的條件下用過量的醚取代異腈處理來制備。
配合反應(yīng)中可應(yīng)用過量高達(dá)100倍或更高的過量醚取代異腈與過量的還原劑，以保證從锝放射性核獲得最高產(chǎn)量。反應(yīng)后，可將所希望的配合物從反應(yīng)混合物中分離出來，需要時，例如可通過結(jié)晶或沉淀或通過常規(guī)色譜或離子交換色譜來進(jìn)行分離;見上述美國第4，452，774號專利，文中公開的內(nèi)容列入本發(fā)明的參考文獻(xiàn)。
與本發(fā)明一致的制劑包含一種無菌的、不發(fā)熱的、醚取代異腈配位體，必要時，可包含一定數(shù)量的還原一種預(yù)選放射性核的還原劑。此種制劑最好是含有一種預(yù)先確定數(shù)量的無菌的、醚取代異腈配位體和一種預(yù)先確定數(shù)量的能夠還原預(yù)先確定數(shù)量的預(yù)選放射性核的無菌還原劑。在可能的時候，此種異腈配位體和還原劑最好還是冷凍干燥的，以促進(jìn)儲存穩(wěn)定性。如冷凍干燥不切實(shí)可行時，制劑可冷凍儲存或在室溫下以溶液形式儲存。醚取代異腈和還原劑最好是裝在密封的、不發(fā)熱的無菌容器內(nèi)。在此種制劑中的醚取代異腈可以是非放射性金屬加合物的形式，例如在與本發(fā)明同時待批和共同轉(zhuǎn)讓的美國專利申請762，392號中、和已發(fā)表的歐洲專利申請183，555號(于1986年6月24日出版)中所敘述的那些加合物，這二份文件中所公開的內(nèi)容均列入本發(fā)明的參考文獻(xiàn)。適用于制備這些金屬加合物的可置換金屬是選自Cu、Mo、Pd、Co、Ni、Cr、Ag、Rh(U.S.S.N.672，392)和Zn(歐洲專利183，555)的物質(zhì)，并能很容易地將可置換的金屬的配合物在一種合適的介質(zhì)中，和在由室溫至回流溫度或更高的溫度下，與醚取代異腈配位體混合來制備。反應(yīng)一般在1分鐘至2小時后完成，具體完成時間取決于所用的試劑和條件。放射性核的選擇將取決于用途。當(dāng)然，由于Tc 99m發(fā)生劑(generator)的有效性，所以尤其是最好使用此種放射性核。
下面舉例說明本發(fā)明的醚取代異腈比Jones等人(美國專利第4，452，774號)所推薦的簡單烴類異腈具有意想不到的優(yōu)越性。
實(shí)例制備下列TC 99m配合物配合物A
配合物B
配合物C
叔丁基異腈配合物(比較)
這些锝配合物應(yīng)用類似于Jones等人所報(bào)導(dǎo)的標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)記條件來制備。將異腈(3～5毫升)在一支10毫升的血清管形瓶中溶于乙醇(1毫升)并將管形瓶封好，然后加入用99Mo/99mTc放射性核發(fā)生劑洗脫后得到的100～150微居里的99mTeO-4。加入連二硫酸鈉(0.5毫升由20～25毫克和10毫升蒸餾水配成的水溶液)并將管形瓶置于100℃水浴中15分鐘。冷卻至室溫后，加入1毫升水和1毫升二氯甲烷，于是產(chǎn)物被提取入二氯甲烷中。將有機(jī)層蒸發(fā)并將產(chǎn)物溶于乙醇中。成品的純度可用薄層色譜whatman C-18反相板和應(yīng)用含22%0.5M醋酸銨水溶液、66%甲醇、9%乙腈和3%四氫呋喃的溶劑混合物來測定或用高壓液相色譜Brownlee C-8反相柱(5毫米)和一種含有0.05M硫酸銨水溶液和從注射時開始一分鐘后在20分鐘內(nèi)具有0～90%的線性梯度的乙醇的溶劑系統(tǒng)來測定。
通過測定天竺鼠的生物分配來評價配合物。在注射后5、30和120分鐘測定注射劑效能的器官分配情況。在上述三個測定時間點(diǎn)，用戊巴比妥鈉(35毫克/公斤，國際藥典)麻醉三只天竺鼠和通過頸靜脈注射0.1毫升試驗(yàn)劑。99mTc異腈的注射劑量是1～2.5毫居里。解剖時，取出體內(nèi)器官用Capintec劑量校準(zhǔn)器或γ或計(jì)數(shù)器測定放射性。稱量心、肺和肝的重量。用下表說明配合物在心、肺和肝中的放射性的分配。參看心/肝和心/肺比，可容易地看出本發(fā)明的锝-99m配合物，在顯示肺的低吸收量和肝的較低吸收量(和/或頗迅速地從肝中洗除)并同時保持高的心肌吸收量方面比簡單的烴異腈具有顯著的優(yōu)越性。
表器官比心中注射劑量％心／肺＊心／肝＊5分鐘 30分鐘 2小時 5分鐘 30分鐘 2小時 5分鐘 30分鐘 2小時a 1.7 1.20.8 1.5 2.9 4.81.61.62.7b 1.4 1.51.2 2.3 2.7 5.12.02.15.7c 1.3 1.40.5 3.0 3.8 2.82.55.03.1d 1.2 1.21.0 0.2 0.5 2.01.81.40.8注上述所有數(shù)值均為三只動物的平均試驗(yàn)值。
＊按每個器官的 (注射劑量%)/(組織克數(shù)) 的比值計(jì)算。
a＝[99mTc(C≡NC(CH3)2CH2OCH3)6]+b＝[99mTc(C≡NCH2C(CH3)2OCH3)6]+c＝[99mTc(C≡NCH(CH3)CH2OCH3)6]+d＝[99mTc(C≡NC(CH3)3)6]+
權(quán)利要求
1.將應(yīng)用下述方法制得的醚取代異腈或其金屬加合物與還原劑混合，以制備無菌的不發(fā)熱形式的制劑，該醚取代異腈的通式為CN-A-O-R(Ⅰ)，式中A是直鏈或支鏈烷基，R是直鏈或支鏈烷基，條件是A加R的碳原子總數(shù)等于4至6，另一個條件是A不是(CH)，而再一個條件是當(dāng)A加R的碳原子總數(shù)等于6時，與異腈連接的第一個碳原子是季碳原子，制備方法包括(a)下列通式的胺的甲酰化HN-A-OR(Ⅱ)式中A和R的定義如上所述，在從-5℃至回流溫度下，將此胺與甲酸乙酯或甲酸-乙酐接觸，制備下列通式的甲酰胺OHH-C-N-A-O-R(Ⅲ)(b)步驟(a)制備的甲酰胺的脫水，可在從-10℃至室溫的溫度下，將此甲酰胺在一種惰性溶劑中，在一種叔胺的存在下與雙光氣接觸或在一種胺堿的存在下與磷酰氯接觸，生成醚取代異腈，或(c)將通式(Ⅰ)的異腈產(chǎn)物與選自Cu、Mo、Pd、Co、Ni、Cr、Rh、和Zn的非放射性金屬配合物反應(yīng)，生成一種醚取代異腈金屬加合物。
2.將權(quán)利要求1的醚取代異腈或其金屬加合物制得的〔Tc99m(CN-A-O-R)6〕配合物(A和R的定義如權(quán)利要求1中所述)，應(yīng)用于射線攝象，其中包括(ⅰ)該配合物與適合的生理上可接受的載體的非腸道給藥;(ⅱ)使該配合物在心肌中局部停留足夠時間后進(jìn)行心肌攝象。
3.將權(quán)利要求1的醚取代異腈或其金屬加合物制得的〔Tc99m(CN-A-O-R)6〕配合物，其中A為CH2C(CH3)2、C(CH3)2CH2、CH(CH3)CH2、CH2CH(CH3)、CH(CH3)CH(CH3)、CH2CH(CH3)CH2、CH2CH2CH(CH3)、C(CH3)2、CH(CH2CH3)CH2、CH(CH3)CH2CH2、C(CH3)2CH2CH3、CH2CH(CH2CH3)，R為CH3;或A為(CH2)3、CH(CH3)CH2、CH2CH(CH3)、C(CH3)2、(CH2)，R為CH2CH3;或A為CH(CH3)2、CHCH3，R為CH(CH3)2，應(yīng)用于射線攝象，其中包括(ⅰ)該配合物與適合的生理上可接受的載體的非腸道給藥;(ⅱ)使該配合物在心肌中局部停留足夠時間后進(jìn)行心肌攝象。
全文摘要
醚取代異腈、醚取代異腈的Tc99m配合物和應(yīng)用Tc99m配合物的心肌組織攝象的方法。
文檔編號G01N33/534GK1057585SQ9110540
公開日1992年1月8日 申請日期1986年12月22日 優(yōu)先權(quán)日1985年12月23日
發(fā)明者保羅·路易斯·伯格斯坦, 維納亞卡姆·蘇布拉曼亞姆 申請人:納幕爾杜邦公司