專利名稱：測定幼稚細(xì)胞用試劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明是關(guān)于對含在血液等液體試樣中的幼稚細(xì)胞進(jìn)行分類和計數(shù)時所用試劑的發(fā)明。
在健康人的末稍血液中含有各種血球(紅血球、白血球、血小板)。最初，血細(xì)胞是在骨髓中生成的，從未成熟的細(xì)胞分化，在成熟的過程中移送到血流中。
例如，粒細(xì)胞(中性白細(xì)胞、嗜酸性白細(xì)胞、嗜堿細(xì)胞)分別要經(jīng)過(成髓細(xì)胞→前骨髓細(xì)胞→骨髓細(xì)胞→后骨髓細(xì)胞)→(桿狀核細(xì)胞→分葉核細(xì)胞)的過程，從幼稚的血球向成熟的血球分化。對于健康人，后骨髓細(xì)胞以前的幼稚白血球不會出現(xiàn)在末稍血液中，桿狀核細(xì)胞也少?？墒窃谔厥馇闆r下，例如，得了白血病等血液病、骨髓癌轉(zhuǎn)移、重癥感染時，往往就出現(xiàn)幼稚白血球。因此，測定幼稚白血球?qū)τ谠\斷疾病是極其重要而且有意義的。
作為血球的自動分類和計數(shù)的技術(shù)，現(xiàn)有通過對血球攝像，再將其圖像進(jìn)行處理的方法和使血球在液體中流動，而后把從每個血球得到的信號進(jìn)行信號處理的方法?，F(xiàn)階段，從精密度、成本等諸方面考慮，使用流動系統(tǒng)的測定方法較好。
在流動系統(tǒng)中，可檢測血球在液體中流動時每個血球的信號(例如由于光學(xué)特性的差異而得到的信號和由于電學(xué)特性的差異而產(chǎn)生的信號)。該方法可以分別舉出檢測散射光和熒光的流動系統(tǒng)信號檢測計和在微孔中流過電流、檢測血球通過該微孔時產(chǎn)生的電信號的血球計數(shù)裝置的例子。后者又可進(jìn)一步分為供給直流電流然后檢測由于血球的電阻的不同而產(chǎn)生的信號的DC法和供給數(shù)MHz的高頻電流、檢測出由于血球的介電常數(shù)的不同而產(chǎn)生的信號的RF法。在DC法中可檢測出與粒子的體積成比例大小的信號，RF法可檢測出反映粒子的內(nèi)部結(jié)構(gòu)(核的大小)、構(gòu)成物質(zhì)情況的信號。
例如在①WO88/09504號公報、②特開平3-252556號公報中記載了聯(lián)合使用DC法和RF法對白血球的5個類群及異常細(xì)胞進(jìn)行分類和計數(shù)的方法。
在①中記載了使用聚氧乙烯型非離子表面活性劑或聚氧乙烯型陰離子表面活性劑對正常(成熟的)白血球的5個類群(淋巴細(xì)胞、單細(xì)胞、中性白細(xì)胞、嗜酸性白細(xì)胞、嗜堿細(xì)胞)及異常細(xì)胞進(jìn)行分類、計數(shù)(例如在

圖18中示出了淋巴母細(xì)胞n、成髓細(xì)胞l、其他未成熟粒細(xì)胞k、左方移動(leftshift)j的分布)。再者，所謂左方移動是指核的分葉少的中性白細(xì)胞(桿狀核中性白細(xì)胞)的增加，但是在此是指桿狀核中性白細(xì)胞而言。
在②中記載了在低滲透壓、酸性的條件下使用聚氧乙烯型非離子表面活性劑對白血球的5個類群及其他異常細(xì)胞(圖5示出了白血球病細(xì)胞等異常細(xì)胞e的分布)進(jìn)行分類、計數(shù)。
另一方面，血球的稀釋液和保存液也是公知的。例如已經(jīng)知道的含有氨基酸的液體?？墒沁@些液體是為了使氨基酸吸附在細(xì)胞膜外壁上以保持細(xì)胞的形態(tài)(保護(hù)細(xì)胞)而使用的。
上述①、②的技術(shù)雖可進(jìn)行幼稚血球的分類和計數(shù)，但是以把成熟白血球分成5個類群作為第一目的。由于是附帶地進(jìn)行幼稚細(xì)胞的分類和計數(shù)，所以存在著具有不能分類的幼稚細(xì)胞以及其分類精密度不夠等問題。
例如，單用聚氧乙烯型非離子表面活性劑，就存在著成熟白血球和幼稚血球的辨別不充分(成熟白血球的收縮小)及紅血球的溶血不充分(血影細(xì)胞(ghost)大)等問題。
本發(fā)明著眼于幼稚細(xì)胞的分類和計數(shù)，其目的在于提供可提高其分類、計數(shù)的精密度的試劑。
本發(fā)明的目的在于提供含有下述(1)至(4)的物質(zhì)的測定幼稚細(xì)胞用試劑，通過該試劑與含有幼稚白血球的被測試樣混合，可使得幼稚白血球的各類群與其他細(xì)胞群產(chǎn)生能分辨程度的差異。
(1)用于固定血球的細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞膜的用下式表示的聚氧乙烯型非離子表面活性劑R1-R2-(CH2CH2O)n-H[式中，R1表示碳原子數(shù)為10～25的烷基、鏈烯基或炔基;
R2表示O、
或COO;
n表示10～40的整數(shù)];
(2)用于損傷并縮小血球的細(xì)胞膜的增溶劑，選自以下2組中至少1種的增溶劑a)第1組增溶劑·N-月桂酰肌氨酸鈉
·月桂酰甲基β-丙氨酸鈉·月桂酰肌氨酸b)第2組增溶劑·正辛基葡糖苷·CHAPS(3-[(3-氯酰氨基丙基)二甲基銨]-1-丙磺酸鹽)·CHAPSO(3-[(3-氯酰氨基丙基)二甲基銨]-2-羥基-1-丙磺酸鹽)·MEGA8(辛?；?N-甲基葡糖酰胺)·MEGA9(壬?；?N-甲基葡糖酰胺)·MEGA10(癸酰基-N-甲基葡糖酰胺)·蔗糖單癸酸鹽·N-甲?；谆涟滨；彼?3)用于固定血球的細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞膜的氨基酸;
(4)液體的pH值為5.0～9.0、滲透壓為150～600mOsm/kg(毫滲透壓摩爾/千克)、電導(dǎo)率為6.0～9.0mS/cm(毫西門子/厘米)的緩沖液。
本發(fā)明中所使用的聚氧乙烯型非離子表面活性劑雖然可以使用上述各式所表示的物質(zhì)，但合適的是加成摩爾數(shù)n為10～30 R1是碳原子數(shù)為10～20的烷基、鏈烯基或炔基 R2是O(氧原子)的物質(zhì)。這些表面活性劑均衡地具有對紅血球的溶血作用和對白血球的固定化作用這兩種特性。特別合適的是C18H34O(CH2CH2O)15H、C18H34O(CH2CH2O)15H。
最合適的增溶劑是N-月桂酰肌氨酸鈉，除此之外也可使用上述的其他增溶劑。對于使用濃度雖沒有逐一說明，但只要調(diào)整到使紅血球血影細(xì)胞及祼核的成熟白血球可以有效地收縮的濃度就可以了。
對于氨基酸，構(gòu)成蛋白質(zhì)的任何氨基酸均可使用。構(gòu)成蛋白質(zhì)的氨基酸如表1所示，大致可分為中性氨基酸、酸性氨基酸、堿性氨基酸。若使用作為酸性氨基酸的谷氨酸時，其濃度為1～50g/l(優(yōu)選8～12g/l，例如10.0g/l)。若使用作為中性氨基酸的脂肪族氨基酸-纈氨酸時，使用的濃度為1～50g/l(優(yōu)選8～12g/l，例如10.0g/l)。
從幼稚細(xì)胞的固定、幼稚白血球的分類這方面考慮，特別合適的是含硫的氨基酸，最合適的是蛋氨酸(如表1所示細(xì)分類成氨基酸＞中性氨基酸＞脂肪族氨基酸＞含硫氨基酸＞蛋氨酸)。
另外，對于用于本發(fā)明的緩沖液，可以使用HEPES、磷酸緩沖液等各種緩沖液，并且最好向其中加入作為pH調(diào)節(jié)劑的氫氧化鈉、作為滲透壓調(diào)節(jié)劑的食鹽等，把緩沖液的pH值調(diào)到5.0～9.0、滲透壓調(diào)到150～600mOsm/kg、電導(dǎo)率調(diào)到6.0～9.0mS/cm。
通過將這樣調(diào)制出的本發(fā)明的試劑與含有幼稚白血球的被測試樣(具體指血液)混合，可以產(chǎn)生能把幼稚白血球的各類群與其他細(xì)胞群分辨出來這樣程度的差異來。
本發(fā)明的試劑的重要作用如下(1)使用本發(fā)明的聚氧乙烯型非離子表面活性劑時，幼稚白血球的細(xì)胞膜較成熟白血球的細(xì)胞膜難以受到損傷。
(2)氨基酸及聚氧乙烯型非離子表面活性劑可從細(xì)胞膜的損傷處進(jìn)入到幼稚白血球的細(xì)胞內(nèi)，固定細(xì)胞內(nèi)成分及細(xì)胞膜。
一般認(rèn)為，聚氧乙烯型非離子表面活性劑的加成摩爾數(shù)n越小，其溶血作用越強，n越大，溶血作用越弱。按照本發(fā)明發(fā)現(xiàn)，n為10以上時，具有使細(xì)胞穩(wěn)定的作用。
一般來說，細(xì)胞膜的強度(抵抗力)的順序細(xì)分為成熟白血球＞幼稚白血球＞紅血球?？墒鞘褂帽景l(fā)明的試劑時，意外地成為幼稚白血球＞成熟白血球＞紅血球的順序。即幼稚白血球較成熟白血球的損傷程度小。
本發(fā)明的試劑與血液混合時，可產(chǎn)生以下的作用。
在pH5.0～8.0的條件下，使用本發(fā)明的聚氧乙烯型非離子表面活性劑時，各細(xì)胞均受到損傷，但其損傷的程度有差別。即紅血球的細(xì)胞膜受到損傷，紅血球立即溶血。成熟白血球的細(xì)胞膜受到損傷，細(xì)胞內(nèi)成分全部溶出，成為裸核化狀態(tài)。幼稚白血球的細(xì)胞膜也受到損傷，但是在細(xì)胞內(nèi)成分溶出之前，聚氧乙烯型非離子表面活性劑及氨基酸從細(xì)胞膜的損傷處侵入到細(xì)胞內(nèi)，使細(xì)胞膜及細(xì)胞內(nèi)成分固定。因此，可在保持細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)的狀態(tài)下，使幼稚白血球得到固定。
對細(xì)胞進(jìn)行分類時，要在細(xì)胞間產(chǎn)生能夠分辨的差異，并且需要使這種狀態(tài)維持一定的時間。為此，以前的方法是在使用表面活性劑后，添加固定化劑，固定細(xì)胞。例如在特開昭54-22891號(USPNo.4099917)中記載了使用甲醛作為固定化劑，在特開昭61-502277號(USPNo.4751179)中記載了使用戊二醛作為固化劑?？墒潜旧暾堉械墓潭ɑ椒ㄅc以前的方法不同。以前的固定方法是從外部作用在細(xì)胞膜上進(jìn)行的，而本申請的固定是在細(xì)胞內(nèi)部進(jìn)行的。
然而，在上述的狀態(tài)下，幼稚白血球和成熟白血球、紅血球血影細(xì)胞的區(qū)別還是不充分的。當(dāng)通過增溶劑使得紅血球血影細(xì)胞和裸核化的成熟白血球收縮，便有可能把各幼稚白血球與成熟白血球、紅血球血影細(xì)胞區(qū)分開來。
通過計測在形態(tài)上產(chǎn)生差異的每個血球，可以對幼稚白血球進(jìn)行穩(wěn)定的、精度良好的分類和計數(shù)。圖1表示使用DC法及RF法得到的二維散布圖的模式圖。a、b、c、d分別是原始細(xì)胞(包含粒細(xì)胞系的原始細(xì)胞a1及淋巴細(xì)胞系的原始細(xì)胞a2)、骨髓細(xì)胞和后骨髓細(xì)胞、前骨髓細(xì)胞、桿狀核中性白細(xì)胞。e是紅血球血影細(xì)胞及成熟白血球?？梢钥吹郊t血球和成熟白血球已經(jīng)收縮到可以完全與各類幼稚白血球區(qū)分的程度。
如果首先將血液和含有氨基酸的液體混合，接著在其混合液中加入上述表面活性劑時，從最終的組成上來看與本發(fā)明中使用的試劑是相同的，但此時不會產(chǎn)生與本發(fā)明相同的作用和效果。這兩者之間，在作用和效果上有很大的差別?，F(xiàn)說明如下在前者的情況下，氨基酸作用在細(xì)胞膜外部，首先保持了細(xì)胞的形態(tài)。而后，即使向其中添加表面活性劑，但由于氨基酸對細(xì)胞的保護(hù)機能業(yè)已產(chǎn)生作用，所以表面活性劑就不能充分發(fā)揮作用，即不能對幼稚白血球進(jìn)行分類。為了使幼稚白血球產(chǎn)生充分的差別，有必要在氨基酸對細(xì)胞產(chǎn)生保護(hù)機能之前，使得細(xì)胞膜損傷，而且在損傷的同時，使氨基酸侵入到細(xì)胞內(nèi)部。另外，在損傷細(xì)胞膜后，即使添加氨基酸也不會產(chǎn)生與本發(fā)明相同的作用和效果。重要的是讓氨基酸不是在細(xì)胞外部而是在內(nèi)部產(chǎn)生作用。為此，需要將氨基酸和上述表面活性劑包含在同一液體中。
此外，使用本發(fā)明的試劑時，不僅使用電阻抗檢測方法(DC法、RF法)，也可以使用光學(xué)式流動信號檢測計。檢測出流動信號檢測計的前方散射光FSC和側(cè)方散射光SSC，可得到以前方散射光強度FSC和側(cè)方散射光強度SSC為軸的散布圖，該圖幾乎與圖1的散布圖相同。前方散射光反映了細(xì)胞的外部情況(大小)、側(cè)方散射反映了內(nèi)部情況(核的大小和復(fù)雜程度)。由此可以知道DC信號強度DC和前方散射光強度FSC、RF信號強度RF和側(cè)方散光強度SSC是分別相對應(yīng)的。
以下對本發(fā)明的試劑的合適實施例加以說明。
實施例1試劑組成①聚氧乙烯型非離子表面活性劑
C18H34-O-(CH2CH2O)16-H 24.0g②增溶劑(陰離子表面活性劑)-N-月桂酰肌氨酸鈉1.5g③氨基酸(含硫氨基酸)DL-蛋氨酸20.0g④緩沖液HEPES12.0gNaOH(1當(dāng)量)0.3g⑤滲透壓調(diào)節(jié)劑NaCl4.0g⑥水使整個體積成為1000ml的量用上述組成的試劑，將血液稀釋到256倍。在pH值為6.8、π(滲透壓)為350mOsm/kg·H2O、ρ(電導(dǎo)率)為7.4mS/cm、液體溫度為33℃的條件下，恒溫13秒后，在6秒內(nèi)用RF/DC法計測各個細(xì)胞。
圖2、3、4是以得到的RF信號強度和DC信號強度為軸的二維散布圖的例子。各圖是不同血液試樣的測定結(jié)果。圖2是從慢性骨髓性白血病患者、圖3是從出現(xiàn)淋巴系的幼稚細(xì)胞的患者、圖4是從健康人采取的末稍血液的測定結(jié)果。
圖2的試樣是含有很多原始細(xì)胞(成髓細(xì)胞)、骨髓細(xì)胞、后骨髓細(xì)胞、前骨髓細(xì)胞及桿狀核細(xì)胞的試樣，但它們是以原始細(xì)胞(成髓細(xì)胞)的集團(tuán)a1、骨髓細(xì)胞及后骨髓細(xì)胞的集團(tuán)b、前骨髓細(xì)胞的集團(tuán)c、桿狀核細(xì)胞的集團(tuán)d的狀態(tài)分布的。另外各集團(tuán)a1、b、c、d分別是成髓細(xì)胞、骨髓細(xì)胞及后骨髓細(xì)胞、前骨髓細(xì)胞、桿狀核細(xì)胞的集團(tuán)這一結(jié)果是通過測定從血液試樣中分離采集的各細(xì)胞試樣、并且通過視算法的相關(guān)試驗而確認(rèn)的。再者，e是紅血球血影細(xì)胞和成熟白血球集團(tuán)。可以看出它們都經(jīng)過了充分的收縮，不會妨礙對幼稚細(xì)胞的分類。
圖3的試樣中所含有的幼稚細(xì)胞是淋巴系的幼稚細(xì)胞(淋巴腫瘤細(xì)胞和異型淋巴細(xì)胞)，這些細(xì)胞分布成f。f是淋巴系的幼稚細(xì)胞這一結(jié)果是通過與上述相同的手段而確認(rèn)的。此外，e是紅血球血影細(xì)胞及成熟白血球的集團(tuán)。
圖4的試樣是健康人的。其中只含有微量的桿狀核細(xì)胞(桿狀核中性白細(xì)胞)，不含有其他的幼稚細(xì)胞。桿狀核細(xì)胞分布成d，這與圖2分布的領(lǐng)域相同。
圖5、6分別是急性淋巴性白血病患者、急性骨髓性白血病患者的測定結(jié)果。a2表示淋巴性的原始細(xì)胞、a1表示骨髓性的原始細(xì)胞的集團(tuán)。使用細(xì)胞分類計確認(rèn)了各集團(tuán)是淋巴母細(xì)胞、成髓細(xì)胞。
這樣，就可以把幼稚白血球與成熟的白血球區(qū)分出來，幼稚白血球又可分類成原始細(xì)胞、骨髓細(xì)胞和后骨髓細(xì)胞、前骨髓細(xì)胞、桿狀核細(xì)胞，進(jìn)而也可分類成淋巴母細(xì)胞、成髓細(xì)胞。
上述實施例1中是在以下的范圍內(nèi)使用的。
①C18 34O(CH2CH2O)16H 5～50g(20～28g)②月桂酰肌氨酸鈉0.1～2.0g(1.2～2.0g)③DL-蛋氨酸1～50g(16～24g)
④pH5.0～10.0(6.0～8.0)⑤π150～500(250～380)⑥ρ3.0～12.0(6.0～9.0)⑦稀釋倍數(shù)100～500(200～300)⑧液溫25.0～40.0(30.0～34.0)＊()是優(yōu)選的范圍實施例Ⅱ使用酸性氨基酸谷氨酸代替實施例Ⅰ的氨基酸(含硫氨基酸)-蛋氨酸。使用量為10.0g(濃度為10.0g/l)。其他條件相同。此外，谷氨酸的可以使用范圍是1～50g，優(yōu)選8～12g。
實施例Ⅲ使用支鏈氨基酸纈氨酸代替實施例Ⅰ的氨基酸(含硫氨基酸)-蛋氨酸。使用量為10.0g(濃度為10.0g/l)。其他條件相同。此外，纈氨酸的可以使用范圍是1～50g，優(yōu)選8～12g。
實施例Ⅳ改變實施例Ⅰ的聚氧乙烯型非離子表面活性劑和增溶劑。分別使用C18H34-O-(CH2CH2O)15-H和CHAPS。C18H34-O-(CH2CH2O)15-H的使用量為5.0g(5.0g/l)、CHAPS的使用量為0.3g(0.3g/l)，其他條件相同?？梢允褂玫姆秶?，對于C18H34O(CH2CH2O)15-H是1～9g(優(yōu)選3～7g)、對于CHAPS是0.1～0.5g(優(yōu)選0.2～0.4g)。另外，使用的氨基酸是蛋氨酸。
實施例Ⅴ改變實施例Ⅰ的聚氧乙烯型非離子表面活性劑、增溶劑及氨基酸。分別使用C18H34-O-(CH2CH2O)15-H、MEGA8、纈氨酸。C18H34-O-(CH2CH2O)15-H的使用量為5.0g(5.0g/l)、MEGA8為5.0g(5.0g/l)、纈氨酸為20.0g(20.0g/l)。其他條件相同?？梢允褂玫姆秶?，對于C18H34O(CH2CH2O)15-H是1～9g(優(yōu)選3～7g)、MEGA8是1～8g(優(yōu)選4～6g)、纈氨酸是1～50g(優(yōu)選16～24g)。
比較這些Ⅰ～Ⅴ的實施例時，可看出各幼稚白血球集團(tuán)的出現(xiàn)區(qū)域相同。分類結(jié)果(計數(shù)值)的精密度以實施例Ⅰ為最佳，其后的順序為Ⅱ及Ⅲ、Ⅳ及Ⅴ。
實施例Ⅰ-Ⅴ的試劑組成歸納在以下表2中。
按照本發(fā)明可以進(jìn)行幼稚白血球的分類和計數(shù)。
進(jìn)而，還可把幼稚白血球再細(xì)分并進(jìn)行分類和計數(shù)。
另外，本發(fā)明的試劑由于是單一液體，所以適用于自動分析裝置。
還有，不僅可以在電阻抗性檢測裝置、也可在光學(xué)式的裝置中使用。
圖的簡單說明圖1表示使用本發(fā)明的試劑測定血液試樣時，以DC信號強度和RF信號強度為軸的二維散布圖的模式圖的例子。
圖2表示使用本發(fā)明的試劑測定從慢性骨髓性白血病患者采取的末稍血液時，以DC信號強度和RF信號強度為軸的二維散布圖。
圖3表示使用本發(fā)明的試劑測定從出現(xiàn)淋巴系幼稚細(xì)胞的患者采取的末稍血液時，以DC信號強度和RF信號強度為軸的二維散布圖。
圖4表示使用本發(fā)明的試劑測定從健康人采集的末稍血液時，以DC信號強度和RF信號強度為軸的二維散布圖。
圖5表示使用本發(fā)明的試劑測定從急性淋巴性白血病患者采取末稍血液時，以DC信號強度和RF信號強度為軸的二維散布圖。
圖6表示使用本發(fā)明的試劑測定從急性骨髓性白血病患者采取的末稍血液時，以DC信號強度和RF信號強度為軸的二維散布圖。
權(quán)利要求
1.測定幼稚細(xì)胞用試劑，它含有下述(1)～(4)的物質(zhì)，通過該試劑與含有幼稚白血球的被測試樣混合，可以使得幼稚白血球的各類群與其他細(xì)胞群產(chǎn)生能分辨程度的差異。(1)用于固定血球的細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞膜的用下式表示的聚氧乙烯型非離子表面活性劑R1-R2-(CH2CH2O)n-H[式中，R1表示碳原子數(shù)為10～25的烷基、鏈烯基或炔基；R2表示O、
或COO；n表示10～40的整數(shù)]；(2)用于損傷并縮小血球的細(xì)胞膜的增溶劑，選自以下2組中至少1種的增溶劑a)第1組增溶劑·N-月桂酰肌氨酸鈉·月桂酰甲基β-丙氨酸鈉·月桂酰肌氨酸b)第2組增溶劑·正辛基葡糖苷·CHAPS(3-[(3-氯酰氨基丙基)二甲基銨]-1-丙磺酸鹽)·CHAPSO(3-[(3-氯酰氨基丙基)二甲基銨]-2-羥基-1-丙磺酸鹽)·MEGA8(辛?；?N-甲基葡糖酰胺)·MEGA9(壬?；?N-甲基葡糖酰胺)·MEGA10(癸?；?N-甲基葡糖酰胺)·蔗糖單癸酸鹽·N-甲?；谆涟滨；彼?3)用于固定血球的細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞膜的氨基酸；(4)液體的pH值為5.0～9.0、滲透壓為150～600m0sm/kg(毫滲透壓摩爾/千克)、電導(dǎo)率為6.0～9.0mS/cm(毫西門子/厘米)的緩沖液。
2.權(quán)利要求1所述的試劑，其中氨基酸是構(gòu)成蛋白質(zhì)的氨基酸。
3.權(quán)利要求2所述的試劑，其中氨基酸是含硫氨基酸。
4.權(quán)利要求3所述的試劑，其中含硫氨基酸是蛋氨酸。
5.權(quán)利要求2所述的試劑，其中氨基酸是谷氨酸。
6.權(quán)利要求2所述的試劑，其中氨基酸是纈氨酸。
全文摘要
本發(fā)明提供了可以對含在血液等液體試樣中的幼稚細(xì)胞進(jìn)行分類和計數(shù)的試劑。它是含有下述(1)～(4)的物質(zhì)的測定幼稚細(xì)胞用試劑，通過該試劑與含有幼稚白血球的被測試樣混合，可以使得幼稚白血球的各類群與其他細(xì)胞群產(chǎn)生能分辨程度的差異(1)用于固定血球的細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞膜的聚氧乙烯型非離子表面活性劑，(2)用于損傷并縮小血球的細(xì)胞膜的增溶劑，(3)用于固定血球的細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞膜的氨基酸，(4)液體的pH值為5.0～9.0、滲透壓為150～600mOsm/kg、電導(dǎo)率為6.0～9.0mS/cm的緩沖液。
文檔編號G01N33/48GK1095481SQ9410290
公開日1994年11月23日 申請日期1994年3月19日 優(yōu)先權(quán)日1993年3月19日
發(fā)明者辻野幸夫, 森川隆, 濱口幸雄 申請人:東亞醫(yī)用電子株式會社