專利名稱：中草藥提取物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及源于傳統(tǒng)中草藥的物質和含有該物質的藥物組合物，該藥物組合物可用于反應特異性疾病尤其是反應特異性濕疹的治療和其他皮膚病如非反應特異性濕疹和牛皮癬的治療。
我們應當把術語中草藥理解為傳統(tǒng)醫(yī)師常用但不限定為中國人所使用的任何一種草。
傳統(tǒng)中醫(yī)的醫(yī)師是采用完全不同于西醫(yī)的解剖和診斷體系治療疾病的。處方藥物一般是多種中草藥，采用煎劑的傳統(tǒng)方法即用水煎煮這些草藥把它們進行制備用于給藥。去掉這些草藥并把保留的水溶液給適當?shù)幕颊哌M行口服、腸胃外或局部給藥。
用于這類治療的處方需要把十味或更多味草藥組合使用并且傳統(tǒng)中醫(yī)教導所有這些草藥都是為達到平衡的處方所必需的。一個被視為平衡的完整處方包括了在治療疾病的不同表現(xiàn)和癥狀中起不同功效的草藥體系。
對人類的任何特殊疾病具有可接受的臨床活性同時毒性較低的草藥的鑒別早已在許多年里通過觀察和試驗所完成并糾正。在一些時候，傳統(tǒng)中草藥的處方能夠有效治療采用西醫(yī)單一療法所不能治愈的疾病。
對使用多種中草藥似乎有反應的疾病是那些起因模糊并復雜的疾病。一個特殊的例子是反應特異性濕疹，它是由僅有一些是已知的許多不同的傳遞質所引起并維持的皮膚慢性炎癥。一些涉及到抗原抗體反應。人們還懷疑但沒有確定許多其他因素。能夠與特異性炎癥傳遞質反應的單一治療劑象非甾類抗炎藥物只對幾種反應特異性濕疹有效。另一方面，皮質甾類具有多種藥效作用并對濕疹有效。所以好象是幾種反應特異性濕疹的治療需要連續(xù)攻擊細胞和體液中的許多可能與免疫過程有關的病理損傷。盡管皮質甾類和一些免疫抑制劑具有這類進攻所需的廣譜活性，但是由于它們的毒性，使其使用受到限制。已知治療濕疹的傳統(tǒng)中草藥藥物似乎具有皮質甾類和免疫抑制劑的必需活性但沒有它們的副作用。
含有選自于下列用它們的藥材名所命名的各種草藥及其拼音等同物中的一種的中草藥處方已經(jīng)用于有效治療反應特異性濕疹和牛皮癬防風、蒺藜、委陵菜、川木通、地黃、甘草、赤芍、白鮮皮、淡竹葉和荊芥穗。Sheehan等在British Journal of Dermatology(1992)126第179-184頁中描述了這類處方對患有反應特異性濕疹的兒童的臨床效果，Sheehan等在The Lancet(1992)7月第4期第13-17頁還描述了這類處方對患有反應特異性濕疹的成人的臨床效果。在GB-A-2254783中描述了用于治療反應特異性濕疹和其他皮膚炎癥疾病相同10味草藥的提取物的特殊制備方法。
盡管已知上述10味草藥煎劑是有效的，由于使用含有多種草藥的復雜處方是昂貴的，所以理想的是簡化處方又不妨礙該處方的活性和/或安全性。也優(yōu)選的是把任何處方限定在可能在英國或歐洲生長的而不是從中國進口的草藥。所以已作過許多嘗試來鑒別活性組分或傳統(tǒng)中藥處方中的組分。盡管如此，因為至今為止沒有用于確認從原草藥中制得的餾分或純物質對該疾病的臨床活性的有效動物或體外模型，所以對濕疹來說證實這一點很困難的。
盡管如此，現(xiàn)在已經(jīng)開發(fā)了一種體外試驗法，該試驗法似乎可以預測反應特異性濕疹和其他反應特異性疾病的臨床效果并使本發(fā)明人測定出了上述所列的10味草藥的冷凍干燥煎劑(本文以后稱作PSE222)中的活性成分。
盡管傳統(tǒng)中醫(yī)要求多種草藥是必需的，但是使用這種體外方法并用體內臨床試驗確認已經(jīng)表明用這10味草藥的子集和它們之中的單一組分能夠再現(xiàn)理想的臨床效果。而且，該方法也已經(jīng)用于PSE222中成分的證實，即其中有的PSE222成分可以引發(fā)反應特異條件的惡化因而希望從任何藥用提取物中除去這樣的成份。
藥效的體外試驗主要是觀察在反應特異性疾病并且尤其是反應特異性濕疹中人外周血液中的皮膚細胞和單核細胞表達細胞表面標記抗原CD23和一旦成功治療濕疹抑制或減少CD23的表達。(參見Takigawa等，Clin.Exp.Immunol.(1991)84第275-282頁)。通過把人單核細胞暴露給細胞因子白介素-4(IL4)也能誘發(fā)體內人單核細胞中的CD23的表達并用治療反應特異性疾病的已知化合物抑制Takigawa上述介紹所述的體內狀態(tài)作平行對照。所以這些觀察提供了簡單體內試驗法的基礎，在該試驗中把人外周血液中制得的單核細胞與IL4和被試驗的活性劑連續(xù)接觸。使用標記的CD23單克隆抗體測量CD23的表達量并且把用CD23表達的抑制百分比表達的任何作用與對照組進行比較，其中對照組中鹽水或草藥的安慰劑替代了試驗物質。已經(jīng)在臨床上成功用于反應特異性濕疹的由上述所列的10味草藥制得的提取物PSE222在試驗中對CD23的表達具有50-60％的抑制的事實證實了體內試驗中CD23表達的顯著性抑制是可預測的臨床效果。
使用上述試驗方法，本發(fā)明人已經(jīng)鑒別出PSE222中適合于在反應特異性疾病一般臨床使用和也適合于治療特殊皮膚病如非反應特異性濕疹和牛皮癬的成分。
所以本發(fā)明的一方面是提供一種適合于治療反應特異性疾病、非反應特異性濕疹或牛皮癬的物質，它能夠從含有下列中草藥的混合物的冷凍干燥煎劑中提取出來防 風蒺 藜委陵菜川木通地 黃甘 草赤 芍白鮮皮淡竹葉荊芥穗該物質含有存在于該冷凍干燥煎劑中的一種或多種成分，如果用水溶液稀釋該冷凍干燥的煎劑并將其在Whatman 2cms×55cms×3mm的纖維素試紙上使用比例為4∶1∶1的丁醇、乙醇和水的混合溶劑進行色譜層析10小時，這些成分會具有0.00到0.100、0.167到0.300、0.400到0.533、0.700到0.833或0.900到0.967范圍內的Rf值。
該物質最好是含有存在于該冷凍干燥煎劑中的Rf值在0.00到0.100范圍內的一種或多種成分。
當溶劑前沿已跑到30cm處后，把該纖維素試紙經(jīng)過水提取，用水提取出的那些Rf值幾乎都在上述給定的范圍內的成分能夠與IL4一起引起體內治療的人單核細胞中的CD23抗原的顯著性降低。如果接著用甲醇提取該纖維素試紙，甲醇提取物中Rf值幾乎都在0.700到0.833或0.900到0.967范圍內的那些成分也能夠引起體內CD23表達的顯著性下降.
而且驚奇地發(fā)現(xiàn)，在水提取和甲醇提取纖維素試紙之后，甲醇提取物中的具有Rf值0.067到0.333和0.533到0.700范圍內的那些成分在CD23試驗法試驗時比對照組促進或增加了CD23抗原的表達。在治療反應特異性或非反應特異性濕疹或其他反應特異性疾病的任何制劑中存在“促進劑”的活性都是明顯不理想的，預計一旦將其除去就會改善臨床活性.用一種非極性溶劑如己烷提取PSE222或上述所列10味草藥的其他制劑可以除去顯著量的“促進劑”活性。
所以本發(fā)明的第二方面提供了一種治療反應特異性疾病、非反應特異性濕疹或牛皮癬的物質，它含有上述所列的10味草藥混合物的煎劑或提取物，其中除去了可被己烷或其他非極性溶劑提取出來的那些成分。這樣處理的煎劑或其他非極性溶劑在可暗示潛在臨床效果的上述體外試驗法中證實顯著性地抑制了人單核細胞的CD23的表達。
現(xiàn)已證實上述所列的10味單一草藥的煎劑具有體外抑制CD23表達的能力并且這樣就能夠鑒別預測具有好臨床效果的草藥子集。
本發(fā)明的第三方面提供了一種治療反應特異性疾病、非反應特異性濕疹或牛皮癬的物質，它含有一種或多種下列中草藥組的煎劑或提取物(a) 赤 芍甘 草地 黃(b) 白鮮皮赤 芍甘 草地 黃防 風蒺 藜或(c)赤 芍甘 草荊芥穗其中幾乎不存在其他任何中草藥。優(yōu)選這樣處理這類煎劑或提取物從而除去己烷或其他非極性溶劑可提取的那些成分。在上述(a)和(c)的特定草藥組有這樣的優(yōu)點即所用的全部草藥都能在歐洲生長。
本發(fā)明的第三方面提供了一種治療反應特異性疾病、非反應特異性濕疹或牛皮癬的物質，它含有一種或多種中草藥白鮮皮、赤芍、地黃、甘草或荊芥穗而幾乎不含其他中草藥的煎劑或提取物。這類提取物或煎劑最好用一種非極性溶劑如己烷提取處理的。
把一種冷凍干燥的煎劑與商業(yè)上可得到的適當級別的纖維性纖維素接觸，接著與一種適當溶劑如上述的丁醇/乙醇/水的混合物或比例為4∶1∶1的丁醇/IMS/水的混合物混合來除去大量的非活性物質就可以實現(xiàn)PSE222活性成分的商業(yè)規(guī)?；a(chǎn)。然后把該混合物離心分離得到一種沉淀物，在干燥之前用上述溶劑混合物再提取幾次并與水混合提取作為藥物制劑配方的活性成分。
無論是還是不是用上述商業(yè)方法生產(chǎn)的本發(fā)明第一方面、第二方面、第三方面和第四方面的物質都優(yōu)選與任何本領域所熟知的許多適當?shù)乃幬镙d體或稀釋劑混合制成藥物組合物。適合于治療常規(guī)反應特異性疾病尤其是反應特異性濕疹或適合于治療非反應特異性濕疹或牛皮癬的組合物可以配制成口服、局部或胃腸外給藥的制劑。口服劑型可以制備成單位劑型如片劑、粉劑和顆粒劑或者也可以是一種飲用的液體制劑。
應當理解到上述體外試驗法可用作任何不考慮地區(qū)或植物來源可能具有抗反應特異性濕疹和皮炎臨床活性的化合物或制劑的鑒定方法。
所以，本發(fā)明的第五方面是提供一種指示化合物或制劑的抗反應特異性濕疹和皮炎臨床活性的方法，它包括的步驟有(a)把白介素4(IL4)和試驗活性的化合物或制劑同時或隨后體外溫育外周血的單核細胞，(b)測定該單核細胞上的細胞表面標記CD23的表達，和(c)通過比較該化合物或制劑存在或不存在時單核細胞Il4誘發(fā)的CD23表達的含量使用步驟(b)中獲得的測定作為該化合物或制劑抗反應特異性濕疹和皮炎的潛在臨床活性的指示。
抑制CD23表達大于25％是統(tǒng)計學上的顯著性并表明是可以臨床使用的化合物或制劑。
現(xiàn)在本發(fā)明對下列實施例和附圖的注釋進行描述，其中

圖1a是使用反應特異性濕疹患者的單核細胞在PSE222(*)和安慰草藥混合物(o)的試驗中所用試驗物質的濃度對CD14+23+單核細胞的百分比的曲線圖。
圖1b是表示圖1a所示的相同數(shù)據(jù)的直方圖，y軸上是抑制CD23表達的百分比。畫有斜線陰影的柱表示PSE222數(shù)據(jù)，空柱表示安慰劑對照組。
圖1c是如圖1a一樣顯示PSE222對正常個體的單核細胞的CD23表達的作用的曲線圖。
圖1d是如圖1b一樣以直方圖形式顯示圖1c的相同數(shù)據(jù)。
圖2顯示了用水從纖維素色譜層析試紙中提取的30個餾分分別對體外人單核細胞中CD23表達抑制的百分比。
圖3顯示了用甲醇從纖維素色譜層析試紙中提取的30個餾分分別對體外人單核細胞中CD23表達抑制的百分比，和圖4顯示了PSE222的己烷提取物對體外CD23表達的作用。
實施例1把總重量為38.8g的下列草藥在300ml的水中慢慢煎煮一個半小時防 風蒺 藜委陵菜川木通地 黃甘 草赤 芍白鮮皮淡竹葉荊芥穗去掉草藥，用煎煮法把煎劑濃縮到最終體積為50ml然后冷凍干燥。在冷凍干燥的提取物PSE222中，1克干燥的提取物包括可從大約5克草藥中提取的水。
用上述相同方法制備不具有抗反應特異性濕疹的已知功效的“安慰”草藥的煎劑。
在如下文所述進行CD23抑制試驗法中檢測PSE222和安慰煎劑的活性。
從自愿者收集血液放入肝素并在聚蔗糖梯度培養(yǎng)基上分散來分離外周血的單核細胞。然后在RPMI中把單核細胞與IL4和有或沒有PSE222或安慰制劑培養(yǎng)一夜。之后，洗滌單核細胞并用熒光標記的抗單核細胞抗原CD14和CD23的單克隆抗體雙重染色。CD14是一個有用的標識物，當它存在時證實了單核細胞的存在。用FACScan分析儀測定熒光的含量，該含量提供了單核細胞表達的CD23含量的指示。
在圖1a到d顯示了結果。正如圖1a和1c所顯示的，PSE222抑制來自反應特異性濕疹(1a)和正常個體(1c)的兩種單核細胞中IL4誘發(fā)的CD23的表達。而且，該作用依賴于劑量并在PSE222和安慰劑治療之間具有統(tǒng)計學意義的顯著性差異(P＜0.001)。圖1b和1d證實了在PSE222濃度低到0.125mg/ml時出現(xiàn)了對反應特異性濕疹患者的單核細胞的具有統(tǒng)計學意義的顯著性抑制CD23大約25到30％。在來自正常患者的單核細胞情況下直到PSE222濃度大約0.25mg/ml也不出現(xiàn)具有統(tǒng)計學意義的顯著性抑制。
在上述結果的基礎上，把25和30％之間抑制CD23表達的百分比用作評價和預測其他試驗制劑臨床活性的標準。在幾個反應特異性濕疹患者中進行的臨床研究里，已表明PSE222制劑而不是安慰制劑在2/3到3/4的患者中濕疹的程度降低了60-80％。這結果具有統(tǒng)計學的顯著性(p＝0.01)。實施例2采用實施例1中所述的方法制備下文表1所列的單個草藥煎劑并從各個草藥中制備干燥的提取物。也如實施例1所述，測試1mg量的各個提取物(相當于5mg的原草藥并稀釋到等同于PSE222制劑中的濃度)體外抑制CD23的表達。下列表1顯示了結果，所給出的各個值表示5次試驗的平均值。
表I濃度草藥/組分CD23/CD14的抑制率mg/ml ％IL4(對照組，基準) 01(a)IL4+PSE222 55.82(b)IL4+安慰草藥3.40.12 (c)白鮮皮 43.60.11 (d)赤芍48.00.05 (e)甘草47.00.30 (f)地黃20.50.07 (g)防風3.00.06 (h)蒺藜4.60.08 (i)委陵菜 6.60.03 (j)川木通 16.00.04 (k)荊芥穗 43.60.15 (l)淡竹葉 16.6測定上述表1中所列的草藥(c)到(l)的特定子集的臨床效果并在表2中顯示結果。
表II草藥子集臨床效果統(tǒng)計學的顯著性a (PSE222) ++++p＜0.01e ±d，e，f +++c，d，e，f，g，h++ p＜0.05d，e，k +++ p＜0.05注++++下降大于總濕疹范圍的70％+++下降總濕疹范圍的60-70％++下降小于總濕疹范圍的60％+沒有穩(wěn)定的改善。
對草藥(e)甘草來說，已知是局部使用時具有一些臨床活性的一種成分，但由于它大劑量口服時有類甾體副作用如電解質紊亂而不能單獨使用。
表I和表II所給出的結果證實對CD23的體外抑制大大預測了對反應特異性濕疹的臨床效果。實施例3把75mg的PSE222加入RPMI1640溫育培養(yǎng)基并使體積為10ml，在37℃不時攪拌下溫育并離心分離除去細粉和其他殘渣。把500ul所得到的溶液的1∶10的稀釋液裝到Whatman 3mm×2cm×55cm的纖維素試紙上。把試紙的裝載端放入比例為4∶1∶1的丁醇/乙醇/水的混合物中并使溶劑通過毛細作用移動10小時，這段時間之后溶劑前沿已經(jīng)移動到大約30cm處。使試紙干燥一夜，然后剪成2×1cm的碎片。把這些碎片分別用20ul/cm2的水洗脫并把洗脫液蒸干，再懸浮于500ul用于CD23試驗法試驗的RPMI1640溫育培養(yǎng)基中。制備全部29種餾分，圖2顯示了這些餾分的每種以及全部的PSE222和安慰草藥對CD23的抑制活性。把對應于溶劑前沿的試紙30用作CD23表達試驗法的內部對照。
正如從圖2中所看到的，特別在餾分A0(起點)，然后在餾分數(shù)對應于距起點的厘米數(shù)的餾分1，3，6，7，8，14，15，21，25和29發(fā)現(xiàn)抑制活性的峰。這些餾分分別對應的Rf值是0.00，0.033，0.100，0.200，0.233，0.267，0.467，0.500，0.900，0.833和0.967。
用水洗脫2×1cm的碎片并如上所述測定了洗脫液后，干燥該碎片，然后用20ul/cm2的甲醇洗脫。再把洗脫液蒸干并再懸浮于500ul用于CD23試驗法試驗的RPMI 1640溫育培養(yǎng)基中。圖3顯示了甲醇提取的各餾分對CD23的抑制活性的程度。在對應的Rf值是0.833，0.900和0.967的餾分25，27和29中發(fā)現(xiàn)抑制活性的顯著峰。
在圖2和3中所示的活性餾分的成分適合用于治療反應特異性濕疹和其他反應特異性疾病以及牛皮癬的藥物組合物。
令人感興趣的是，在CD23試驗法的測試中如上所述的Rf值的范圍分別對應于0.067到0.300和0.533到0.700的餾分2到9和16到21的先水后甲醇的提取物顯著性地促進而不是抑制CD23的表達。實施例4用己烷提取如實施例1中所制備的PSE222的溶液。把己烷餾分蒸干如上再懸浮并在CD23試驗法中測試。該己烷提取物比對照組顯著性地增加了CD23的表達。但是，隨后己烷提取過的PSE222的水提物顯示出所預料的對CD23表達的抑制。圖4顯示了該結果。
該實施例證實了用一種非極性溶劑提取任何PSE222的10位草藥來從任何潛在的藥物組合物中除去不需要的成分的用途。實施例5把1g如實施例1中所述的提取物的冷凍干燥細粉與10g纖維狀的纖維素完全混合。Sigma纖維素#6663是一種適當?shù)募墑e。向該纖維素的混合物中加入70ml比例為4∶1∶1的丁醇∶甲基化的工業(yè)酒精∶水(BIW)的混合物并攪拌10分鐘。把該混合物進行離心分離(在6,000rpm5分鐘)。把沉淀物用30ml的BIW再懸浮并再離心分離。重復這種操作并在60-70℃的真空烘箱中干燥沉淀物。
然后用蒸餾水再懸浮該干燥的纖維素混合物，攪拌10分鐘并離心分離。然后再用3倍量的水洗滌該沉淀物并離心分離，匯集上清液。把合在一起的上清液蒸干得到大約20mg的棕色固體。
當把該物質與賦型劑配制，填入膠囊，壓成片或溶于一種藥學可接受的載體中時，該物質可適用于治療患有一些反應特異性濕疹的病人。上述實施例提供了商業(yè)規(guī)?；a(chǎn)PSE222為活性成分的藥物制劑的方法。
權利要求
1.一種適合治療反應特異性疾病，非反應特異性的濕疹或牛皮癬的物質，該物質能夠從冷凍干燥的含有下列中草藥的混合物的煎劑中提取出來防風蒺藜委陵菜川木通地黃甘草赤芍白鮮皮淡竹葉荊芥穗該物質含有存在于該冷凍干燥的煎劑中的一種或多種成分，如果用水溶液稀釋該冷凍干燥的煎劑并將其在Whatman 2cms×55cms×3mm的纖維素試紙上使用比例為4∶1∶1的丁醇、乙醇和水的混合溶劑進行色譜層析10小時，這些成分會具有0.00到0.100、0.167到0.300、0.400到0.533、0.700到0.833或0.900到0.967范圍內的Rf值。
2.根據(jù)權利要求1的物質，它含有一種或多種存在于該冷凍干燥的煎劑中的Rf值在0.00到0.100范圍內的成分。
3.根據(jù)權利要求1的物質，它含有一種或多種Rf值在0.00到0.100、0.167到0.300、0.400到0.533、0.700到0.833或0.900到0.967范圍內的成分，這些成分能夠用水從該色譜層析試紙中提取出來。
4.根據(jù)權利要求1或權利要求3的物質，它含有一種或多種Rf值在0.700到0.833或0.900到0.967范圍內的成分，這些成分能夠用甲醇從該色譜層析試紙中提取出來。
5.根據(jù)上述任何一個權利要求中的物質，其中的冷凍干燥煎劑已除去了可用己烷或其他非極性溶劑提取的那些成分。
6.根據(jù)上述任何一個權利要求中的物質，其中在色譜層析試紙上的Rf值在0.00到0.100、0.167到0.300、0.400到0.533、0.700到0.833或0.900到0.967范圍內的成份能夠抑制用白介素4激發(fā)的人單核細胞上CD23抗原的體外表達。
7.根據(jù)上述任何一個權利要求中的物質，其中該物質適合治療反應特異性或非反應特異性的濕疹。
8.上述權利要求1到7中的任何一種物質在生產(chǎn)治療反應特異性疾病、非反應特異性的濕疹或牛皮癬的藥劑中的用途。
9.根據(jù)權利要求8的用途，其中的藥劑是用來治療反應特異性或非反應特異性的濕疹。
10.一種治療反應特異性疾病、非反應特異性的濕疹或牛皮癬的藥物組合物，它含有權利要求1到7中的任何一種物質和一種藥學可接收的載體或稀釋劑。
11.權利要求10的藥物組合物可配制成用于口服、胃腸外或局部給藥的制劑。
12.一種適合治療反應特異性疾病，非反應特異性的濕疹或牛皮癬的物質，它含有下列中草藥混合物的一種煎劑或提取物防風蒺藜委陵菜川木通地黃甘草赤芍白鮮皮淡竹葉荊芥穗并且該煎劑或提取物已除去了可用己烷或其他非極性溶劑提取的那些成分。
13.一種適合治療反應特異性疾病，非反應特異性的濕疹或牛皮癬的物質，它含有下列一種或多種中草藥而幾乎沒有其他中草藥的一種煎劑或提取物白鮮皮赤芍地黃荊芥穗甘草。
14.一種適合治療反應特異性疾病，非反應特異性的濕疹或牛皮癬的物質，它含有一種或多種下列中草藥組而幾乎不含其他中草藥的一種煎劑或提取物(a)赤 芍甘 草地 黃(b)白鮮皮赤 芍甘 草地 黃防 風蒺 藜或(c)赤 芍甘 草荊芥穗。
15.根據(jù)權利要求13或權利要求14的物質，它已除去了可用己烷或其他非極性溶劑提取的那些成分。
16.根據(jù)權利要求13到15的任何一種物質，它能夠抑制用白介素4激發(fā)的人單核細胞上CD23抗原的體外表達。
17.權利要求12到16中的任何一種物質在生產(chǎn)治療反應特異性疾病、非反應特異性的濕疹或牛皮癬的藥劑中的用途。
18.一種治療反應特異性疾病、非反應特異性的濕疹或牛皮癬的藥物組合物，它含有權利要求12到16中所要求的任何一種物質和一種藥學可接收的載體或稀釋劑。
19.權利要求18的藥物組合物可配制成用于口服、胃腸外或局部給藥的制劑。
20.一種指示化合物或制劑的抗反應特異性濕疹和皮炎臨床活性的方法，它包括的步驟有(a)把白介素4(IL4)和試驗活性的化合物或制劑同時或隨后體外溫育外周血的單核細胞，(b)測定該單核細胞上的細胞表面標記CD23的表達，和(c)通過比較該化合物或制備物存在或不存在時單核細胞Il4誘發(fā)的CD23表達的含量使用步驟(b)中獲得的測定作為該化合物或制劑抗反應特異性濕疹和皮炎的潛在臨床活性的指示。
21.根據(jù)權利要求20的方法，其中在該單核細胞上的CD23表達的量可用CD23的標記單克隆抗體測得。
22.根據(jù)權利要求20或21的方法，其中細胞表面標記物CD14的表達也可以在該單核細胞上用CD23的標記單克隆抗體測得。
23.根據(jù)權利要求20到22的任何一種方法，其中所述的外周血的單核細胞是人的。
24.根據(jù)權利要求20到23的任何一種方法，其中把抑制25％或更大的CD23的表達作為抗反應特異性濕疹和皮炎的化合物或制劑的臨床活性指標。
25.一種治療反應特異性的濕疹或皮炎的藥物組合物，它含有這樣一種化合物或制劑和一種藥學可接收的載體或稀釋劑，其中的化合物或制劑已經(jīng)按照權利要求20到24的任何一種方法測得具有臨床活性。
26.一種制備如權利要求1所述的適合治療反應特異性疾病，非反應特異性的濕疹或牛皮癬的物質的方法，它包括的步驟有(a)把冷凍干燥的煎劑與纖維狀的纖維素接觸并用一種含有無機溶劑和至少25％的水的溶劑混合物提取該混合物，可任選提取一次以上，(b)用水提取冷凍干燥的煎劑/纖維狀的纖維素和(c)把水提物蒸干用于配制成一種藥物組合物。
27.根據(jù)權利要求26的方法，其中在步驟(b)前冷凍干燥的煎劑/纖維狀的纖維素已被己烷提取過。
28.根據(jù)權利要求26或27的方法，其中的溶劑混合物包括以4∶1∶1比例的丁醇，IMS和水。
29.根據(jù)權利要求26到28的任何一種方法，其中在步驟(a)中加入提取溶劑后，離心分離該混合物并分離出沉淀物用于下一次提取。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種適合治療反應特異性疾病，非反應特異性濕疹或牛皮癬的物質，該物質能夠從冷凍干燥的含有下列中草藥混合物的煎劑中提取出來防風、蒺藜、委陵菜、川木通、地黃、甘草、赤芍、白鮮皮、淡竹葉和荊芥穗，該物質含有存在于該冷凍干燥的煎劑中的一種或多種成分，如果用水溶液稀釋該冷凍干燥的煎劑并將其在Whatman 2cms×55cms×3mm的纖維素試紙上使用比例為4∶1∶1的丁醇、乙醇和水的混合溶劑進行色譜層析10小時，這些成分會具有0.00到0.100、0.167到0.300、0.400到0.533、0.700到0.833或0.900到0.967范圍內的Rf值。
文檔編號G01N33/58GK1153478SQ9519427
公開日1997年7月2日 申請日期1995年6月23日 優(yōu)先權日1994年6月24日
發(fā)明者B·A·惠特爾, J·伯羅斯托夫, Y·拉切曼 申請人:植物技術有限公司