專(zhuān)利名稱(chēng)：檢測(cè)治療性化合物的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及確定治療再發(fā)性皰疹病毒感染的化合物的功效的方法。
背景技術(shù)：
皰疹病毒，如單純皰疹病毒(HSV)，最初是通過(guò)原發(fā)感染而感染個(gè)體的。這種感染不同于由一些地方潛伏的HSV再活化所引起的隨后再發(fā)性感染。
原發(fā)性HSV感染侵襲這樣的個(gè)體，其免疫應(yīng)答以前沒(méi)對(duì)抗過(guò)該病毒。因此，在這種原發(fā)性感染的情況下，免疫系統(tǒng)需要一些時(shí)間來(lái)識(shí)別入侵者，并建立免疫應(yīng)答以產(chǎn)生足夠強(qiáng)度的炎癥以清除在機(jī)體內(nèi)復(fù)制的病毒。與再發(fā)性HSV感染相比，原發(fā)HSV感染的特征在于更持久的病毒排出(viral shedding)和由免疫反應(yīng)性引起的低過(guò)度性炎癥。
隨著單純皰疹病毒或水痘-帶狀皰疹病毒的原發(fā)性感染，這些病毒潛伏于神經(jīng)細(xì)胞，在病人的余生中病毒可反復(fù)再活化。病毒在神經(jīng)細(xì)胞中再活化之后轉(zhuǎn)移到皮膚，隨后產(chǎn)生損傷。
當(dāng)再活化皰疹病毒感染發(fā)生的時(shí)候，會(huì)影響以前已多次接觸過(guò)該病毒并且已有效清除了復(fù)制病毒的個(gè)體。因此，與原發(fā)性HSV感染相比，再活化HSV感染的特征在于短時(shí)的病毒排出和引起炎癥的快速而顯著的免疫應(yīng)答，這一點(diǎn)并不令人奇怪。炎癥是引起癥狀和體征的主要原因，所述癥狀和體征使病人經(jīng)受諸如疼痛、癢、腫脹、充血和損傷等。這些癥狀可在病毒排出期結(jié)束之后持續(xù)一周或更長(zhǎng)時(shí)間。
當(dāng)單純皰疹病毒首次感染唇的時(shí)候，病毒排出持續(xù)7到10天，當(dāng)同一病毒首次感染生殖器的時(shí)候，病毒排出持續(xù)3周左右。(Whitley，R.J.和Gnann，J.W.，人類(lèi)皰疹病毒(B.Roizman，R.J.Whitley和C.Lopez編)Raven出版社，紐約，1993)。病毒排出結(jié)束之后，損傷將在幾天內(nèi)愈合。另一方面，當(dāng)唇和生殖器都發(fā)生再發(fā)性HSV感染的時(shí)候，病毒排出平均僅發(fā)生3到4天(Spruance，S.L.(1992)皮膚學(xué)研討會(huì)11，200-206；Vanderhooft，S和Kirby，P.(1992)皮膚學(xué)研討會(huì)11，190-199)。如上所述，由于明顯的炎癥存在，損傷在病毒排出結(jié)束之后不會(huì)很快愈合，由再發(fā)性HSV感染所引起的典型的唇和生殖器損傷將在10天左右愈合。
原發(fā)性感染中由于建立有效的免疫反應(yīng)需要一定時(shí)間，導(dǎo)致病毒排出期較長(zhǎng)，因此抗病毒化合物的臨床研究顯示，與再發(fā)性感染相比，其對(duì)原發(fā)性感染有較大影響。臨床試驗(yàn)顯示，在再發(fā)性HSV感染的時(shí)候，即使全身施用抗病毒藥物，對(duì)治愈時(shí)間和病毒排出期最多只能提前1天左右。(Spruance，S.L.(1992)皮膚學(xué)研討會(huì)11，200-206；Whitley，R.J.和Gnann.J.W.(1992)新英格蘭醫(yī)學(xué)雜志327，782-789)。
在抗病毒化合物研究中，可靠的動(dòng)物模型是必需的。已公開(kāi)了一些原發(fā)性感染的模型。由上述原發(fā)性和再發(fā)性皰疹病毒感染的發(fā)病機(jī)理差異可知，由原發(fā)性感染模型所獲得的結(jié)果并不能輕易地作為一種指標(biāo)來(lái)預(yù)測(cè)再發(fā)性皰疹病毒感染的臨床效果。
在豚鼠中已建立了評(píng)估抗病毒化合物的再發(fā)性HSV模型(StanberryL.R.(1989)醫(yī)學(xué)病毒學(xué)雜志28125-128)。在Stanberry及其合作者的模型中，HSV-2被接種到豚鼠的陰道內(nèi)。100天后，對(duì)動(dòng)物進(jìn)行紫外線(xiàn)照射，以誘導(dǎo)潛伏病毒的再活化。70％左右的動(dòng)物出現(xiàn)1-2天中等持續(xù)性的損傷。這一模型耗時(shí)且昂貴但與臨床相關(guān)的主要關(guān)系是損傷的持續(xù)時(shí)間短。相比之下，人類(lèi)的再發(fā)性HSV損傷持續(xù)7-12天。因此，Stanberry模型只能用于評(píng)價(jià)預(yù)防性治療。由于損傷持續(xù)時(shí)間短，所以本模型不能用于評(píng)價(jià)癥狀發(fā)生后開(kāi)始的治療。
由Blyth等首創(chuàng)的另一途徑(J.gen.Virol(1984)，65，14771486)是基于皰疹病毒的帶狀皰疹樣傳播。皰疹病毒原發(fā)性感染皮膚后(隨后在原發(fā)性感染的部位形成損傷)，進(jìn)入外周神經(jīng)并沿著外周神經(jīng)轉(zhuǎn)移。通過(guò)病毒在神經(jīng)中的這種轉(zhuǎn)移，在起始的感染原發(fā)部位遠(yuǎn)端的繼發(fā)感染部位可發(fā)生繼發(fā)性損傷。病毒感染的這種傳播方式被稱(chēng)作帶狀皰疹樣傳播。已建立了2個(gè)這樣的模型(i)脅腹模型，其中病毒接種到脅部，四到五天后沿著感染的脅腹部皮區(qū)可發(fā)現(xiàn)帶狀皰疹樣傳播。(ii)頸-耳模型，其中病毒接種到頸部(原發(fā)部位)，四到五天后病毒傳播到相應(yīng)的耳部(第2個(gè)遠(yuǎn)端部位)。
盡管在這些模型中，損傷持續(xù)時(shí)間與臨床情況一致，但由于動(dòng)物以前沒(méi)有接觸該病毒，所以這種感染仍然是原發(fā)性感染。眾所周知，如果動(dòng)物以前接種過(guò)病毒，當(dāng)?shù)?次感染的時(shí)候，在感染的部位或通過(guò)帶狀皰疹樣傳播均不會(huì)形成損傷。因此，這些模型可看作是原發(fā)性感染模型。
人類(lèi)再發(fā)性HSV感染的模式與鼠的帶狀皰疹樣HSV感染相似，即病毒通過(guò)感覺(jué)神經(jīng)而進(jìn)入皮膚，但是對(duì)于人類(lèi)，再發(fā)性皰疹疾病出現(xiàn)于免疫個(gè)體，而在帶狀皰疹樣感染模型中，免疫力在感染的時(shí)候不存在，但可在感染的過(guò)程中形成。
因此，在再發(fā)性皰疹病毒感染的免疫個(gè)體中應(yīng)用藥物的臨床前評(píng)價(jià)就出現(xiàn)了問(wèn)題。
人們需要一種動(dòng)物模型來(lái)模擬免疫個(gè)體中的炎癥反應(yīng)和清除再發(fā)性皰疹病毒感染，由此提供一種預(yù)測(cè)不僅用于原發(fā)性而且可用于再發(fā)性皰疹病毒感染的化學(xué)化合物臨床功效的方法。而且在這種模型中，不僅可預(yù)防性施用而且可以在癥狀開(kāi)始之后施用受試化合物。
發(fā)明目的令人意外的是，給動(dòng)物接種HSV后可提供過(guò)繼性免疫轉(zhuǎn)移(ATI)，而不破壞以后帶狀皰疹樣傳播的發(fā)生和繼發(fā)性損傷的出現(xiàn)。由此，依照本發(fā)明就解決了以前已知感染模型中存在的上面所提到問(wèn)題，因?yàn)楸景l(fā)明提供了一種檢測(cè)對(duì)抗再發(fā)性皰疹病毒感染進(jìn)展的化學(xué)化合物效力的方法，其特征在于通過(guò)評(píng)定非人類(lèi)哺乳動(dòng)物的感染進(jìn)程來(lái)檢測(cè)受試化合物的效果。為了模擬免疫宿主的免疫反應(yīng)性而對(duì)這種動(dòng)物進(jìn)行了過(guò)繼性免疫轉(zhuǎn)移(ATI)。
在本發(fā)明的動(dòng)物模型中，皰疹病毒首次接種之后4-5天出現(xiàn)帶狀皰疹樣繼發(fā)性損傷。病毒排出是短期的(約3-4天)，隨后引起臨床癥狀的炎癥持續(xù)較長(zhǎng)時(shí)間。腫脹是主要的炎癥特征之一，在本發(fā)明的頸-耳模型中，通過(guò)耳的厚度很容易測(cè)定。并且這種動(dòng)物模型在病毒到達(dá)繼發(fā)性感染部位(耳)的時(shí)候，能對(duì)病毒產(chǎn)生有效的免疫應(yīng)答。因此，模型模擬了臨床情況。
例如，在病毒到達(dá)試驗(yàn)動(dòng)物皮膚之前，當(dāng)紫外滅活的病毒被注射到經(jīng)ATI調(diào)整了免疫力的小鼠的時(shí)候，能加強(qiáng)免疫應(yīng)答。因此確信HSV在給予了ATI的動(dòng)物中的帶狀皰疹樣傳播準(zhǔn)確模擬了人類(lèi)再發(fā)性HSV感染的發(fā)病機(jī)理。
本發(fā)明中在頸部接種了HSV的動(dòng)物模型與人類(lèi)的再發(fā)性HSV感染具有下列可測(cè)定的相似性(i)相似的病毒排出時(shí)間(約3-4天)；(ii)最高的病毒滴度在病毒于耳部首次出現(xiàn)后24小時(shí)獲得；(iii)當(dāng)局部應(yīng)用膦甲酸(foscarnet)治療時(shí)，病毒排出時(shí)間的縮短是相似的(1天)；(iv)與臨床情況一樣，引起炎癥的免疫應(yīng)答是大多數(shù)癥狀的主要介體。如果依照本發(fā)明在頸部接種了HSV的+ATI動(dòng)物與同樣接種了HSV的-ATI動(dòng)物相比，盡管+ATI動(dòng)物的病毒清除快得多，但在病毒到達(dá)耳部時(shí)存在有免疫細(xì)胞的動(dòng)物，其炎癥更強(qiáng)烈(通過(guò)耳厚度測(cè)定)臨床圖象更差(通過(guò)帶狀皰疹分?jǐn)?shù)測(cè)定)(圖2)如上面所指出的，這也與人類(lèi)再發(fā)性皰疹病毒感染時(shí)的臨床圖象類(lèi)似。這明顯地表明本發(fā)明的模型中應(yīng)用的ATI方法對(duì)很好地預(yù)測(cè)治療這種感染的臨床效果是關(guān)鍵的。
附圖簡(jiǎn)述

圖1.
形成的免疫力和ATI的效果。在第10天，于動(dòng)物的背部接種病毒。于第2天給予ATI。通過(guò)第2天在耳廓注射經(jīng)紫外滅活的HSV-1來(lái)檢測(cè)對(duì)HSV產(chǎn)生的免疫應(yīng)答。以15只Balb/C小鼠左右耳廓間耳片厚度差的中間值作為結(jié)果。圖2.
ATI和膦甲酸局部治療對(duì)頸部感染Balb/C小鼠耳廓HSV-1滴度的影響(n＝10)。于第2天給予ATI。圖3.
用膦甲酸局部治療對(duì)頸部感染的Balb/C小鼠耳部損傷發(fā)展的影響(n＝12)。頸部感染兩天后給予ATI。感染后第4天到第7天每8小時(shí)給予治療。圖4.
ATI對(duì)頸部感染的Balb/C小鼠耳部損傷發(fā)展的影響(n＝12)。感染后第4天到第8天每8小時(shí)給予安慰劑。左圖版，沒(méi)有給予ATI；右圖版，感染2天后給予ATI。圖5.
ATI對(duì)頸部感染的Balb/C小鼠耳部腫脹的影響(n＝12)。感染后第4天到第8天每8小時(shí)給予安慰劑。左圖版，沒(méi)有給予ATI；右圖版，于感染2天后給予ATI。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了一種測(cè)定用于治療再發(fā)性皰疹病毒感染的化合物的效力的方法，該方法包括(a)在非人類(lèi)哺乳動(dòng)物的原發(fā)皮膚部位接種皰疹病毒，使病毒通過(guò)神經(jīng)細(xì)胞產(chǎn)生帶狀皰疹樣擴(kuò)散，從而引起繼發(fā)性感染部位(遠(yuǎn)端)的損傷。
(b)在病毒引起的繼發(fā)性部位出現(xiàn)損傷之前，對(duì)非人類(lèi)哺乳動(dòng)物進(jìn)行過(guò)繼性免疫轉(zhuǎn)移(ATI)，以提供一種免疫力，該免疫力模擬在以前感染過(guò)的免疫宿主中發(fā)生再發(fā)性皰疹病毒感染時(shí)出現(xiàn)的免疫學(xué)反應(yīng)性；(c)給非人類(lèi)哺乳動(dòng)物施用受試的化合物；并(d)檢測(cè)所述化合物在感染的繼發(fā)性部位減少皰疹病毒引起的皮膚損傷的發(fā)生和/或嚴(yán)重程度的能力。
術(shù)語(yǔ)“皰疹病毒”應(yīng)被理解為這樣一些病毒，包括1型單純皰疹病毒(HSV-1)；2型單純皰疹病毒(HSV-2)；6型人類(lèi)皰疹病毒(HHV-6)；水痘-帶狀皰疹病毒(VZV)；巨細(xì)胞病毒(CMV)；Epstein-Barr病毒(EBV)。本發(fā)明方法中用于接種的皰疹病毒優(yōu)選α-類(lèi)(group)皰疹病毒，如1型或2型單純皰疹病毒或水痘-帶狀皰疹病毒。但是，應(yīng)理解，可能尚不為人所知的其他皰疹病毒也可以被應(yīng)用。
感染劑可通過(guò)接種于頸部腹側(cè)表面而施用給非人類(lèi)哺乳動(dòng)物。接著可通過(guò)觀察耳廓損傷的發(fā)生(頸-耳模型)來(lái)評(píng)定感染的進(jìn)展。另外，感染劑可通過(guò)脅背部接種而施用給非人類(lèi)哺乳動(dòng)物。在這種情況下，通過(guò)觀測(cè)皮膚損傷的嚴(yán)重程度來(lái)評(píng)定感染的進(jìn)展(脅腹模型)。
在本發(fā)明的方法中所應(yīng)用的非人類(lèi)哺乳動(dòng)物優(yōu)選地是實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物，如小鼠、大鼠、兔或豚鼠。
在本發(fā)明的方法中，給動(dòng)物模型進(jìn)行過(guò)繼性免疫轉(zhuǎn)移優(yōu)選地包括給所選擇的非人類(lèi)哺乳動(dòng)物注射用下列方法獲得的模型淋巴結(jié)細(xì)胞；(a)給動(dòng)物模型相同近交系的第2非人類(lèi)哺乳動(dòng)物施用皰疹病毒；并且(b)在第2非人類(lèi)哺乳動(dòng)物對(duì)病毒建立有效的免疫力后，從哺乳動(dòng)物中收集淋巴結(jié)細(xì)胞。技術(shù)人員應(yīng)能確定什么時(shí)候在第2非人類(lèi)哺乳動(dòng)物中建立有效的免疫力。在通常情況下，動(dòng)物產(chǎn)生有效免疫力的時(shí)間是1周到1個(gè)月。
提供ATI的淋巴結(jié)細(xì)胞的接種應(yīng)在HSV在神經(jīng)中建立感染之后，病毒到達(dá)繼發(fā)性感染部位之前進(jìn)行。優(yōu)選地，ATI在感染1到4天后進(jìn)行，更優(yōu)選地在約2天后進(jìn)行。
給被選作動(dòng)物模型的非人類(lèi)哺乳動(dòng)物所注射的淋巴結(jié)細(xì)胞的量可在較大范圍內(nèi)變化，只要其量足以在靶動(dòng)物中誘導(dǎo)產(chǎn)生免疫力即可。例如，細(xì)胞量可從106-109。
受試化合物可以以合適的途徑施用給非人類(lèi)哺乳動(dòng)物，如局部施用、口服或注射。
本發(fā)明還包括非人類(lèi)哺乳動(dòng)物，如小鼠、大鼠、兔或豚鼠，該動(dòng)物被故意地感染了皰疹病毒，并且為了模擬免疫宿主的免疫反應(yīng)性，給該動(dòng)物進(jìn)行了過(guò)繼性免疫細(xì)胞轉(zhuǎn)移(ATI)。所述皰疹病毒優(yōu)選1型或2型單純皰疹病毒，或水痘-帶狀皰疹病毒。
實(shí)施例1.材料和方法1.1小鼠的接種應(yīng)用2種帶狀皰疹樣傳播HSV-1感染的模型來(lái)研究各種治療效果。在頸-耳模型中，病毒被接種于頸部的腹側(cè)表面(原發(fā)部位)，這可引起HSV-1帶狀皰疹樣傳播至相應(yīng)的耳廓并引起耳部腫脹(繼發(fā)性部位)。在脅腹模型中，病毒被接種到脊柱旁邊的脅背部，在低脅部(繼發(fā)性部位)的感染皮區(qū)可引起帶狀皰疹樣皮疹。
按照Kristofferson等(1988)J.gen.Virol，69，1157-1166，所描述的，把人類(lèi)HSV-1(2×105p.r.u)，C42系)接種到每組10-15只的雌性Balb/C小鼠(16-18g)的頸部或背部。通過(guò)每天觀測(cè)耳廓損傷的發(fā)生來(lái)記錄帶狀皰疹樣播散感染的發(fā)展，或者通過(guò)下面的級(jí)別來(lái)給脅腹部感染時(shí)損傷的嚴(yán)重程度打分-4 無(wú)癥狀；-3 一處原發(fā)性水皰和腫脹；-2 一些原發(fā)性水皰；-1 局部糜爛；0 局部原發(fā)性損傷的潰瘍；1 原發(fā)性損傷加分離的帶狀皰疹樣繼發(fā)性損傷。
分值2-4描述了融合性帶狀皰疹樣損傷從輕微到嚴(yán)重的潰瘍(Nagafuchi等(1979)J.gen.Virol.44，715-723)。因此，分值1-4描述了帶狀皰疹樣損傷的發(fā)生(帶狀皰疹分值)。在頸部感染的小鼠中，按Kristofferson等(1988)J.gen.Virol.69，1157-1166所描述的記錄耳腫脹和病毒在耳部的感染滴度。
小鼠背部感染2天后，給右耳的耳廓背部中心皮內(nèi)注射10μl紫外滅活的HSV-1，相當(dāng)于105p.f.u.。1.2 HSV-免疫力的過(guò)繼性轉(zhuǎn)移1.2 HSV-免疫力的過(guò)繼性轉(zhuǎn)移(ATI)給麻醉了的雌性Balb/C小鼠(16-18g)兩耳的耳廓部注射HSV-1(105p.f.u.，C42系)。感染7天后，拉頸處死小鼠，切除引流的淋巴結(jié)，利用微孔篩在磷酸鹽緩沖液中制備懸浮的淋巴結(jié)細(xì)胞。
頸部或背部感染的小鼠感染2天后，在給予ATI時(shí)，向尾部靜脈內(nèi)注射2×107淋巴結(jié)細(xì)胞。1.3藥物治療按Alenius等(1982)傳染病雜志145，569-573所描述的方法制備膦甲酸乳膏(1.5％，Astra Arcus AB，Sdertlje，瑞典)。無(wú)藥的乳膏被用作對(duì)照。2.結(jié)果2.1過(guò)繼性免疫轉(zhuǎn)移(ATI)頸部腹側(cè)的皮膚接種HSV-13到4天后，檢測(cè)同側(cè)耳中的病毒。病毒滴度增加了1天，但從感染5-6天后，病毒被清除了。
但是，背部感染的小鼠在感染2天后在耳廓注射紫外滅活的HSV-1所產(chǎn)生的耳腫脹直到感染5天后才出現(xiàn)(即病毒進(jìn)入頸部感染的小鼠的耳廓1-2天后)(圖1)。在背部感染的小鼠感染2天后給予ATI，對(duì)感染2天后注入耳廓的紫外滅活HSV-1所形成的耳腫脹在24小時(shí)內(nèi)發(fā)生(圖1)。因此，在感染2天后給予ATI的頸部感染的小鼠中，病毒進(jìn)入動(dòng)物的耳廓可對(duì)HSV-1抗原形成免疫應(yīng)答。
ATI減少頸部感染動(dòng)物耳的病毒滴度(圖2)。但是耳腫脹沒(méi)有被阻止(圖5)。頸部感染動(dòng)物耳的帶狀皰疹分?jǐn)?shù)因ATI而增加(圖4)。給予ATI的頸部感染動(dòng)物與未給予ATI的動(dòng)物相比，其顯示出較強(qiáng)的，更快和更長(zhǎng)持續(xù)時(shí)間的耳腫脹(圖5)。人們認(rèn)為腫脹與炎癥相一致，而且很明顯盡管病毒清除得相當(dāng)快，但ATI使炎癥和帶狀皰疹分?jǐn)?shù)更差。2.2局部應(yīng)用膦甲酸感染4天后，用1.5％的膦甲酸或安慰劑治療未進(jìn)行ATI的頸部感染小鼠的耳部，連續(xù)3天。記錄耳部的病毒滴度和臨床指征。圖2顯示，膦甲酸對(duì)未進(jìn)行ATI動(dòng)物的治療，基本上降低了其病毒滴度尤其在感染7和8天后。膦甲酸對(duì)給予ATI動(dòng)物所進(jìn)行的治療僅顯示較小效果，病毒排出期僅減少了1天。這與膦甲酸治療感染再發(fā)性HSV的病人的臨床經(jīng)驗(yàn)一致。這一效果與用對(duì)照劑或膦甲酸治療后，對(duì)ATI處理動(dòng)物顯示的臨床損傷分?jǐn)?shù)(％)所進(jìn)行的評(píng)定相類(lèi)似。這些結(jié)果顯示用膦甲酸治療給予ATI的動(dòng)物可獲得一些效果。
權(quán)利要求
1.一種測(cè)定化合物效力的方法，該化合物用于治療再發(fā)性皰疹病毒感染，所述方法包括(a)在非人類(lèi)哺乳動(dòng)物的原發(fā)性皮膚部位接種皰疹病毒，使該病毒通過(guò)神經(jīng)細(xì)胞進(jìn)行帶狀皰疹樣擴(kuò)散，從而引起感染的繼發(fā)性部位(遠(yuǎn)端)的損傷；(b)在繼發(fā)性部位出現(xiàn)病毒引起的皮膚損傷之前，對(duì)非人類(lèi)哺乳動(dòng)物給予過(guò)繼性免疫轉(zhuǎn)移(ATI)，以提供一種免疫力，該免疫力模擬在以前感染過(guò)的免疫宿主中發(fā)生再發(fā)性皰疹病毒感染時(shí)出現(xiàn)的免疫反應(yīng)性；(c)給非人類(lèi)哺乳動(dòng)物施用受試化合物；并且(d)測(cè)定該化合物在感染的繼發(fā)性部位減少皰疹病毒引起的皮膚損傷的發(fā)生和/或嚴(yán)重程度的能力。
2.權(quán)利要求1的方法，其中用于接種的皰疹病毒是1型或2型單純皰疹病毒。
3.權(quán)利要求1的方法，其中用于接種的皰疹病毒是水痘-帶狀皰疹病毒。
4.權(quán)利要求1至3中任一權(quán)項(xiàng)的方法，其中皰疹病毒是通過(guò)在頸部腹側(cè)表面接種而被施用給非人類(lèi)哺乳動(dòng)物的，其中感染的進(jìn)展是通過(guò)檢查耳廓內(nèi)損傷的發(fā)生而被評(píng)價(jià)的。
5.權(quán)利要求1至3中任一權(quán)項(xiàng)的方法，其中皰疹病毒是通過(guò)在背部脅腹側(cè)接種而被施用給非人類(lèi)哺乳動(dòng)物的，其中感染的進(jìn)展是通過(guò)檢查皮膚損傷的嚴(yán)重程度而被評(píng)價(jià)的。
6.權(quán)利要求1至5中任一權(quán)項(xiàng)的方法，其中非人類(lèi)哺乳動(dòng)物是小鼠、大鼠、兔子或豚鼠。
7.權(quán)利要求1至6中任一權(quán)項(xiàng)的方法，其中過(guò)繼性免疫轉(zhuǎn)移在接種皰疹病毒1到4天后被提供給非人類(lèi)哺乳動(dòng)物。
8.權(quán)利要求7的方法，其中過(guò)繼性免疫轉(zhuǎn)移是在接種皰疹病毒大約2天后被提供給非人類(lèi)哺乳動(dòng)物的。
9.權(quán)利要求1至8中任一權(quán)項(xiàng)的方法，其中過(guò)繼性免疫轉(zhuǎn)移是通過(guò)注射從已對(duì)該皰疹病毒產(chǎn)生免疫力的第二哺乳動(dòng)物中收集的淋巴結(jié)細(xì)胞而被提供的，所說(shuō)的第二哺乳動(dòng)物與被給予過(guò)繼性免疫轉(zhuǎn)移的哺乳動(dòng)物是同一近交品系的。
10.權(quán)利要求9的方法，其中注射給非人類(lèi)哺乳動(dòng)物的淋巴結(jié)細(xì)胞的數(shù)目為106至109。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種測(cè)定用于治療再發(fā)性皰疹病毒感染的化合物效力的方法,該方法包括:(a)在非人類(lèi)哺乳動(dòng)物的原發(fā)皮膚部位接種皰疹病毒,使病毒通過(guò)神經(jīng)細(xì)胞產(chǎn)生帶狀皰疹樣播散,從而引起繼發(fā)性感染部位(遠(yuǎn)端)的損傷;(b)在病毒引起的繼發(fā)性部位出現(xiàn)皮膚損傷之前,對(duì)非人類(lèi)哺乳動(dòng)物進(jìn)行過(guò)繼性免疫轉(zhuǎn)移(ATI),以提供一種免疫力,該免疫力模擬在以前感染過(guò)的免疫宿主中發(fā)生再發(fā)性皰疹病毒感染時(shí)出現(xiàn)的免疫反應(yīng)性;(c)給非人類(lèi)哺乳動(dòng)物施用受試化合物:并且(d)測(cè)定該化合物在感染的繼發(fā)性部位減少皰疹病毒引起的皮膚損傷發(fā)生和/或嚴(yán)重程度的能力。
文檔編號(hào)G01N33/15GK1179796SQ9619289
公開(kāi)日1998年4月22日 申請(qǐng)日期1996年1月25日 優(yōu)先權(quán)日1996年1月25日
發(fā)明者A·克里斯托費(fèi)爾松 申請(qǐng)人:阿斯特拉公司