專(zhuān)利名稱(chēng)：變色劑組合物及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及含有兩種有機(jī)酸堿指示劑的變色劑組合物，特別是涉及可用來(lái)完成酶聯(lián)免疫診斷試劑盒樣品液加血清變色顯示的變色劑組合物。
已知一般單色酸堿指示劑的變色范圍在1-2個(gè)PH單位，在中和滴定中，選擇合適的酸堿指示劑能夠指示強(qiáng)酸滴定強(qiáng)堿，強(qiáng)堿滴定強(qiáng)酸，強(qiáng)酸滴定弱堿以強(qiáng)堿滴定弱酸，但對(duì)于弱堿滴定弱酸的反應(yīng)，由于敏銳指數(shù)要求較高，單一酸堿指示劑不能達(dá)到實(shí)際要求。比如在酶聯(lián)免疫診斷試劑盒的操作中，極弱堿性的臨床血清加入極弱酸性樣品稀釋液時(shí)，采用單一指示劑不能明顯指示顏色變化，因?yàn)樵摬僮髦袠悠芬涸诩尤肱R床血清前后，PH的變化在0.05-0.1個(gè)單位。
但在酶聯(lián)免疫試劑盒臨床實(shí)際操作時(shí)，由于微孔反應(yīng)板板孔多，每次血清加樣量小，只有5微升，加入血清與否肉眼無(wú)法直觀判斷，所以臨床操作中容易發(fā)生漏加血清或重復(fù)加血清的差錯(cuò)。如果能使微量血清加入樣品液后有直觀的顏色變化，臨床操作時(shí)就不容易再出差錯(cuò)。
本發(fā)明的目的就是提供一種靈敏變色的變色劑，用它加入試劑盒樣品液后，樣品液成為一種能長(zhǎng)期穩(wěn)定存放的可變色樣品液，試劑盒使用者在用這種樣品液操作時(shí)不會(huì)漏加血清樣品，也不會(huì)重復(fù)加入血清樣品。
現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，將兩種單色酸堿指示劑按一定比例混合就能形成一種靈敏指示微小酸度變化的變色劑。
根據(jù)本發(fā)明，上述變色劑組合物中包括有機(jī)指示劑(A)和有機(jī)指示劑(B)。組分(A)為(i)或(ii)。(i)的結(jié)構(gòu)式為
式中R1代表H，Na，K；R2代表溴基或H；(ii)結(jié)構(gòu)式如下
式中R3代表H，Na，K；組分(B)為另一種有機(jī)指示劑，其結(jié)構(gòu)式為
其中R4代表I或Cl；這兩種組分均為常用酸堿指示劑，一般均有市售。
組分(A)用無(wú)水乙醇或稀堿溶液配制，乙醇兌水濃度為40-60％，最好為60％，稀堿濃度為0.1M-1.0M，最好使用0.1M NaOH，(A)組分固體指示劑含量為0.1-2％，最佳含量為1.0％；組分(B)用無(wú)水醇或稀堿溶液配制，采用乙醇兌水濃度為40-60％，最好為60％，稀堿濃度為0.1M-1.0M，最好為0.1M NaOH，(B)組分固體指示劑含量為0.1-2％，最佳含量為0.1％。
本發(fā)明組合物由上述(A)的溶液與(B)的溶液按一定體積配制，VA/VB可以為5-20，最佳比例為VA/VB＝10。
本發(fā)明變色劑在酶聯(lián)免疫診斷試劑盒中使用時(shí)直接加入樣品稀釋液使用，配比濃度為2.0％-0.05％，最佳為1％，即每100毫升樣品液加1毫升變色劑。
本發(fā)明敘述了變色劑的組成，各組分結(jié)構(gòu)特征及在組合物所占比例，以及該變色劑的配制方法和在酶聯(lián)免疫診斷試劑盒的使用方法。
本發(fā)明提出的組合物可應(yīng)用于酸度變化為0.05-0.10個(gè)PH單位的變色指示，尤其適用于酶聯(lián)免疫診斷試劑盒中樣品液的加血清變色顯示中。采用本發(fā)明變色劑配制成的樣品稀釋液配色穩(wěn)定，臨床操作加入微量血清即有直觀顏色變化，防止漏加血清或重復(fù)加入血清的差錯(cuò)發(fā)生。
實(shí)施例
以下所述實(shí)施例說(shuō)明了本發(fā)明。但本發(fā)明不僅限于下述實(shí)施例。
準(zhǔn)確稱(chēng)取溴甲酚紫1.000克固體，用60毫升無(wú)水乙醇溶解，再加純水定溶至100毫升，即得本發(fā)明中(A)式的指示劑溶液，再準(zhǔn)確稱(chēng)取0.100克中性紅固體，用40毫升無(wú)水乙醇溶解，再加純水定容至100毫升，即得符合本發(fā)明中(B)式的指示劑。然后取上述10毫升溴甲酚紫指示劑加入100毫升上述中性紅乙醇液指示劑，充分混勻，即得本發(fā)明所述變色指示劑。
按以下組分配制酶聯(lián)免疫試劑盒樣品稀釋液(純水定溶至100毫升)
為了觀察本發(fā)明變色劑能否適應(yīng)實(shí)際應(yīng)用酸度略有不同的樣品稀釋液，采用幾種不同動(dòng)物血清配制成五種酸度略有差異的樣品稀釋液，編號(hào)為①、②、③、④、⑤，取上述五種樣品稀釋液各100ml加入1ml本發(fā)明變色指示劑，結(jié)果均得一呈玫瑰紅色半透明液體，用酸度計(jì)測(cè)這五種變色樣品稀釋液酸堿度，然后在96孔微孔反應(yīng)板中各加入100μl該樣品稀釋液，分別按編號(hào)加入臨床血清，各孔加5μl，觀察顏色變化，記錄結(jié)果如下
權(quán)利要求
1.一種變色劑組合物，包括有機(jī)指示劑(A)和有機(jī)指示劑(B)，組分(A)為(i)或(ii)，其中(i)的通式為
式中R1代表H，K，Na；R2代表溴基或H，(ii)為結(jié)構(gòu)式為
式中R3代表H，K，Na；組分(B)的結(jié)構(gòu)式為
其中R4代表I或Cl。
2.按照權(quán)利要求1所述組合物，其中組分(A)中含固體指示劑的含量為0.10-2.0％，最佳含量為1.0％。
3.按照權(quán)利要求1-2所述組合物，其中組分(A)用無(wú)水乙醇或稀堿溶液配制，無(wú)水乙醇加純水的濃度為40-60％，最佳為60％，稀堿濃度為0.1M-1.0M，最佳為0.1MNaOH。
4.按照權(quán)利要求1所述組合物，其中組分(B)含固體指示劑的含量為0.1-2.0％，最佳含量為0.1％。
5.按照權(quán)利要求1～4所述組合物，其中組分(B)用無(wú)水乙醇或稀堿溶液配制，乙醇兌水濃度為40-60％，最佳為60％；稀堿濃度為0.1M-1.0M，最佳為0.1MNaOH。
6.按照權(quán)利要求1所述組合物，本發(fā)明由(A)的溶液與(B)的溶液按一定體積配制，VA/VB可以為5～20，最佳比例VA/VB為10。
7.按照權(quán)利要求1～6所述任何一種組合物用于酶聯(lián)免疫診斷試劑樣品稀釋液加血清變色顯示。
8.按照權(quán)利要求1～7所述組合物，用于酶聯(lián)診斷試劑盒本發(fā)明變色組合物按100～200毫升樣品稀釋液加1毫升本發(fā)明變色組合物，其中最佳為每100毫升樣品稀釋液加入1毫升本發(fā)明變色組合物。
9.按照權(quán)利要求1～7所述組合物用于酸聯(lián)免疫診斷試劑盒時(shí)，樣品稀釋液的PH值可以為7.00-7.30，其中最佳為7.20。
10.按照權(quán)利要求1～8所述組合物，本發(fā)明適用于任何一種酸度變化為0.05-0.10個(gè)PH單位的變色要求。
全文摘要
本發(fā)明變色劑組合物中包括兩種有機(jī)指示劑溶液,其中一種為溴甲酚紫或間甲酚紫或?qū)ο趸椒拥拇蓟蛳A溶液。另一種為中性紅的醇或稀堿溶液。該變色劑組合物可以有效地應(yīng)用于酶聯(lián)免疫診斷試劑盒樣品稀釋液加血清變色顯示,能有效防止臨床操作中漏加血清或重復(fù)加血清的差錯(cuò)。
文檔編號(hào)G01N33/531GK1201907SQ9710446
公開(kāi)日1998年12月16日 申請(qǐng)日期1997年6月9日 優(yōu)先權(quán)日1997年6月9日
發(fā)明者金紅軍, 汪建, 李志杰, 張久春, 熊云陵 申請(qǐng)人:金紅軍