專利名稱：葡萄糖傳感器的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及能夠迅速且簡便地對試樣中的特定組分進行高精度定量的葡萄糖傳感器。本發(fā)明更具體涉及以吡咯并喹啉醌為輔酶的葡萄糖傳感器所用的葡萄糖脫氫酶的穩(wěn)定化方法及穩(wěn)定的葡萄糖脫氫酶組合物。
以往，作為不對試樣溶液進行稀釋和攪拌等，就可簡便地對試樣溶液中的特定組分定量的方式，提出了各種生物傳感器。以下是生物傳感器的一個例子(日本專利公開公報平2-062952號)。
該生物傳感器包括通過網(wǎng)版印刷等方法在絕緣性基板上形成的由工作電極、配極和參考電極所構成的電極系統(tǒng)，以及在該電極系統(tǒng)上形成的包含親水性高分子、氧化還原酶和電子接受體的酶反應層。
如果在以上制作的生物傳感器的酶反應層上滴下包含底物的試樣溶液，酶反應層就會溶解，酶與底物便發(fā)生反應，與此同時電子接受體被還原。酶反應結束后，被還原的電子接受體發(fā)生了電化學氧化，由此時獲得的氧化電流可求得試樣溶液中的底物濃度。
利用上述生物傳感器，理論上根據(jù)作為測定對象的底物來選擇不同的酶，這樣便可對各種物質進行測定。
例如，選擇了葡萄糖氧化酶為底物酶，就能夠制得對試樣溶液中的葡萄糖濃度進行測定的葡萄糖傳感器。
通常，上述構成的生物傳感器中的酶在傳感器中保持干燥狀態(tài)，由于酶的主要成分為蛋白質，所以，如果與空氣等中的水分長期接觸，就有出現(xiàn)變性的危險。此外，在極端情況下，還有酶失活的危險。
因此，如果長時間保存?zhèn)鞲衅?，有時會出現(xiàn)酶活性降低、與底物反應的酶量不足、所得應答電流值與底物濃度不成比例的情況。
而且，一般即使在傳感器內(nèi)導入底物濃度為零的試樣溶液，也能夠獲得一定的傳感器應答電流值(以下稱其為“空白值”)。獲得該空白值的原因之一是，被導入傳感器的可溶解反應層的試樣溶液中的離子滯留在基板上的電極表面，引起了電極反應。如果空白值較大，由于應答電流值和底物濃度的相關性降低，所以，不能夠對底物進行正確的定量。
因此，為了獲得保存穩(wěn)定性良好、空白值較小的生物傳感器，很重要的一點是在酶周圍創(chuàng)造一個可長期保持酶活性的環(huán)境。另外，在基板上的電極表面附近創(chuàng)造一個可使空白值小到忽略不記的環(huán)境也是相當重要的。而且，為使酶反應時電子和底物的移動順利進行，有必要提高傳感器的應答性。
為了解決上述問題，以往采用的方法是在反應層中添加磷酸等添加劑。
另一方面，為了制得高性能的葡萄糖傳感器，以往使用的酶是以吡咯并喹啉醌為輔酶的葡萄糖脫氫酶(以下稱其為“PQQ-GDH”)。使用了PQQ-GDH的葡萄糖傳感器中，由于PQQ-GDH的催化反應與氧無關，所以，具有酶反應完全不受血中等溶存氧的影響的特性。因此，利用該葡萄糖傳感器測得的值不會因試樣溶液中的氧分壓的變化而出現(xiàn)誤差，也就是說，能夠獲得高性能的傳感器。
但是，使用PQQ-GDH酶時，即使在反應層中添加前述磷酸等添加劑，也不能夠獲得足夠小的傳感器應答電流空白值，而且，存在不能夠充分提高保存穩(wěn)定性的問題。
鑒于上述問題，本發(fā)明的目的是提供保存穩(wěn)定性較高、空白值較小的高性能葡萄糖傳感器。本發(fā)明的另一目的是提供PQQ-GDH的穩(wěn)定化方法，以及穩(wěn)定的葡萄糖脫氫酶組合物。
本發(fā)明的葡萄糖傳感器的特征是，在具備電絕緣性基板，設置在前述基板上的至少由工作電極和配極構成的電極系統(tǒng)，以及連接在前述電極系統(tǒng)上或形成于其附近的至少包含以吡咯并喹啉醌為輔酶的葡萄糖脫氫酶的反應層的葡萄糖傳感器中，在前述反應層中添加了選自苯二甲酸、苯二甲酸鹽、馬來酸、馬來酸鹽、琥珀酸、琥珀酸鹽、三乙醇胺、三乙醇胺鹽、檸檬酸、檸檬酸鹽、二甲基戊二酸、2-(N-嗎啉代)乙磺酸、2-(N-嗎啉代)乙磺酸鹽、三(羥甲基)甘氨酸、三(羥甲基)甘氨酸鹽、三(羥甲基)氨基甲烷、三(羥甲基)氨基甲烷鹽、咪唑及三甲基吡啶中的至少1種添加劑。
這里，前述酶最好被前述添加劑覆蓋。
本發(fā)明還涉及葡萄糖傳感器用葡萄糖脫氫酶的穩(wěn)定化方法，該方法的特征是，在以吡咯并喹啉醌為輔酶的葡萄糖脫氫酶中添加了選自苯二甲酸、苯二甲酸鹽、馬來酸、馬來酸鹽、琥珀酸、琥珀酸鹽、三乙醇胺、三乙醇胺鹽、檸檬酸、檸檬酸鹽、二甲基戊二酸、2-(N-嗎啉代)乙磺酸、2-(N-嗎啉代)乙磺酸鹽、三(羥甲基)甘氨酸、三(羥甲基)甘氨酸鹽、三(羥甲基)氨基甲烷、三(羥甲基)氨基甲烷鹽、咪唑及三甲基吡啶中的至少1種添加劑。
本發(fā)明還涉及葡萄糖傳感器用葡萄糖脫氫酶組合物，該組合物的特征是，在以吡咯并喹啉醌為輔酶的葡萄糖脫氫酶中添加了選自苯二甲酸、苯二甲酸鹽、馬來酸、馬來酸鹽、琥珀酸、琥珀酸鹽、三乙醇胺、三乙醇胺鹽、檸檬酸、檸檬酸鹽、二甲基戊二酸、2-(N-嗎啉代)乙磺酸、2-(N-嗎啉代)乙磺酸鹽、三(羥甲基)甘氨酸、三(羥甲基)甘氨酸鹽、三(羥甲基)氨基甲烷、三(羥甲基)氨基甲烷鹽、咪唑及三甲基吡啶中的至少1種添加劑。


圖1表示本發(fā)明的一個實施例中除去了反應層的葡萄糖傳感器的簡單平面圖。
圖2表示圖1所示葡萄糖傳感器的主要部分的縱剖面圖。
圖3表示作為本發(fā)明的一個實施例和一個比較例而制得的葡萄糖傳感器的應答特性圖。
圖4表示作為本發(fā)明的一個實施例和一個比較例而制得的葡萄糖傳感器的應答特性圖。
圖5表示作為本發(fā)明的一個實施例和一個比較例而制得的葡萄糖傳感器的應答特性圖。
圖6表示作為本發(fā)明的一個實施例和一個比較例而制得的葡萄糖傳感器的應答特性圖。
圖7表示作為本發(fā)明的一個實施例和一個比較例而制得的葡萄糖傳感器的應答特性圖。
圖8表示作為本發(fā)明的一個實施例和一個比較例而制得的葡萄糖傳感器的應答特性圖。
圖9表示作為本發(fā)明的一個實施例和一個比較例而制得的葡萄糖傳感器的應答特性圖。
圖10表示作為本發(fā)明的一個實施例和一個比較例而制得的葡萄糖傳感器的應答特性圖。
圖11表示作為本發(fā)明的一個實施例和一個比較例而制得的葡萄糖傳感器的應答特性圖。
如上所述，本發(fā)明的葡萄糖傳感器是以PQQ-GDH為酶的反應層中包含苯二甲酸等添加劑的一種傳感器。
一旦滴下上述添加劑，如苯二甲酸氫鉀和PQQ-GDH的混合溶液，干燥后形成反應層，酶表面就被苯二甲酸氫鉀包圍，所以，利用溫度、濕度、電荷狀態(tài)等環(huán)境變化，可對酶進行保護。其結果是，能夠使酶活性長期保持穩(wěn)定。
另外，在傳感器中導入試樣溶液時，反應層被溶解而離子化，前述添加劑會對試樣溶液中的離子和因反應層溶解而生成的離子產(chǎn)生影響。其結果是，離子不滯留在基板上的電極表面，能夠減小空白值。
此外，如果反應層中包含上述添加劑，則反應層易溶于水，所以，在反應層中添加試樣溶液后，反應層立即溶解，可使酶反應和電極反應順利進行。
能夠獲得上述效果的添加劑包括苯二甲酸，苯二甲酸氫鉀等苯二甲酸鹽，馬來酸，馬來酸鈉等馬來酸鹽，琥珀酸，琥珀酸鈉等琥珀酸鹽，三乙醇胺，三乙醇胺鹽酸鹽等三乙醇胺鹽，檸檬酸，檸檬酸一鉀、檸檬酸鈣、檸檬酸三鉀、檸檬酸三鈉、檸檬酸三鋰、檸檬酸氫二銨、檸檬酸氫二鈉、檸檬酸鈉、檸檬酸二銨、檸檬酸二氫鉀、檸檬酸二氫鈉、檸檬酸二鈉、檸檬酸鎂等檸檬酸鹽，二甲基戊二酸，2-(N-嗎啉代)乙磺酸，2-(N-嗎啉代)乙磺酸鹽，三(羥甲基)甘氨酸，三(羥甲基)甘氨酸鹽，三(羥甲基)氨基甲烷，三(羥甲基)氨基甲烷鹽酸鹽等三(羥甲基)氨基甲烷鹽，咪唑及三甲基吡啶等。
特別是使用苯二甲酸氫鉀后，保存穩(wěn)定性和應答特性俱佳，能夠獲得空白值非常小的葡萄糖傳感器。
這些添加劑全部是可作為緩沖劑使用的化合物，根據(jù)需要，可添加鹽酸、乙酸等酸和NaOH、KOH等堿，將pH值調(diào)整到規(guī)定程度。較好的pH值范圍是5.0～8.5。當然，也可在其他緩沖液中配合使用這些添加劑。
前述添加劑的添加量一般是對應于PQQ-GOH 250～10000U/ml，在5-80μM的范圍內(nèi)即可，從穩(wěn)定性和較小的空白值方面考慮，最好是在10～50μM的范圍內(nèi)，U表示單位(unit)。
本發(fā)明的反應層中還可包含在酶反應的同時被還原的電子接受體。該電子接受體可使用鐵氰化離子、對苯醌及其衍生物、N-甲基吩嗪(硫酸單甲酯)鹽、亞甲藍、二茂鐵及其衍生物等。
本發(fā)明的反應層中還可包含親水性高分子。通過在反應層中添加親水性高分子，能夠防止反應層從電極系統(tǒng)表面剝離。而且，親水性高分子還具有防止反應層表面裂開的效果，能夠有效地提高生物傳感器的可靠性。
上述親水性高分子最好使用羧甲基纖維素、羥乙基纖維素、羥丙基纖維素、甲基纖維素、乙基纖維素、乙基羥乙基纖維素、羧甲基乙基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇、聚賴氨酸等聚氨基酸、聚苯乙烯磺酸、明膠及其衍生物、丙烯酸及其鹽的聚合體、甲基丙烯酸及其鹽的聚合體、淀粉及其衍生物、馬來酸酐及其鹽的聚合體、瓊脂糖凝膠及其衍生物。
生物傳感器中的反應層除了可設置在形成于電絕緣性基板上的電極系統(tǒng)上之外，只要無損本發(fā)明的效果，亦可設置在其他各位置上。例如，可設置在前述基板的電極系統(tǒng)之外的位置。此外，生物傳感器中還包括覆蓋部件，該覆蓋部件與前述基板組合，在基板間形成供給前述電極系試樣溶液的試樣溶液供給通道，也可在該覆蓋部件露出于試樣溶液供給通道的表面設置前述反應層。
氧化電流的測定方法包括只使用工作電極和配極的二電極方式，和加用了參考電極的三電極方式，三電極方式能夠更精確地進行測定。
此外，本發(fā)明還涉及在以吡咯并喹啉醌為輔酶的葡萄糖脫氫酶中添加前述添加劑，使葡萄糖傳感器用葡萄糖脫氫酶穩(wěn)定的方法。添加的方式只要對本發(fā)明的效果無損即可，對其沒有特別的限定。
本發(fā)明還涉及包含以吡咯并喹啉醌為輔酶的葡萄糖脫氫酶和前述添加劑的葡萄糖傳感器用葡萄糖脫氫酶組合物。
本發(fā)明的穩(wěn)定化組合物中除了前述添加劑之外，只要無損于本發(fā)明的效果，還可添加其他穩(wěn)定劑。
這些穩(wěn)定劑包括金屬鹽、蛋白質、氨基酸、糖、有機酸、表面活性劑等。
金屬鹽除了鈣、鍶及錳等的鹵化物之外，還包括它們的硫酸鹽和硝酸鹽等。
所用蛋白質只要對酶活性無影響即可，包括牛血清白蛋白、卵白蛋白、明膠等。
氨基酸除了賴氨酸、組氨酸、谷氨酸等普通氨基酸之外，還可用甘氨酰替甘氨酸、聚賴氨酸等。其中，最好的是水溶性較高的氨基酸。
糖可使用單糖、二糖、低聚糖及多糖等，各個種類的糖均可。還可使用它們的衍生物。具體包括葡萄糖、果糖、半乳糖、甘露糖、木糖、蔗糖、乳糖、麥芽糖、海藻糖、麥芽三糖、麥芽糖環(huán)糊精、α-環(huán)糊精、β-環(huán)糊精、γ-環(huán)糊精、糊精、直鏈淀粉、糖原、淀粉、旋復花粉、葡萄糖胺、肌醇、甘露醇、山梨醇、核醇及脫氧葡萄糖等。
有機酸包括α-氧代戊二酸、蘋果酸、苯二甲酸、葡萄糖酸、膽酸及脫氧膽酸等。
表面活性劑以非離子型為宜。
另外，還可添加硼酸、硼砂、氯化鉀、氯化鈉、硫酸銨、甘油、フイコ-ル、EDTA、EGTA、DTT、DTE、GSH、2-巰基乙醇等。
上述穩(wěn)定劑的添加量最好是對應于1.0重量份葡萄糖脫氫酶，加入0.0001～1.0重量份穩(wěn)定劑。
包含上述添加劑，根據(jù)需要還可包含前述穩(wěn)定劑的本發(fā)明的以吡咯并喹啉醌為輔酶的葡萄糖脫氫酶組合物價格低廉，且不會影響酶的基本性能，可保持其活性。
本發(fā)明中使用的輔酶吡咯并喹啉醌的起始原料可以任選。
以下，對以吡咯并喹啉醌為輔酶的葡萄糖脫氫酶活性的測定方法進行說明。
所用試劑為50nM的PIPES緩沖液、0.2mM的PMS(pH6.5)、0.2mM的NTB、30.6mM的葡萄糖和0.19％的TritonX-100的混合試劑。
在37℃將3ml混合試劑預熱約5分鐘后，加入0.1ml酶溶液，慢慢攪拌。然后，以水為對照，用溫度控制在37℃的分光光度計測定5分鐘內(nèi)的吸光度，由記錄的直線部分算出每1分鐘內(nèi)吸光度的變化。用蒸餾水代替酶溶液，將其加入到前述混合試劑中，測定其吸光度進行雙盲試驗。
利用上述方法，將1分鐘內(nèi)生成1/2μmol雙甲的酶量計為1個單位(U)。
以下，通過實施例對本發(fā)明進行說明，但本發(fā)明并不僅限于此。
圖1是本發(fā)明的一個實施例中除去了反應層的生物傳感器的簡單平面圖。通過網(wǎng)版印刷在聚對苯二甲酸乙二醇酯為原料的電絕緣性基板1上涂布含銀糊狀物，形成導線2和3。然后，在基板1上涂布包含樹脂粘合劑的導電性碳糊，形成工作電極4。該工作電極4與導線2接觸。接著，在基板1上涂布絕緣性糊狀物，形成絕緣層6。絕緣層6覆蓋工作電極4的外周部分，這樣就可確保工作電極4露出部分的面積一定。在基板1上涂布包含樹脂粘合劑的導電性碳糊，使其與導線3接觸，形成環(huán)狀配極5。
圖2是圖1的生物傳感器的簡單縱剖面圖。如圖1所示，制得的電極系統(tǒng)上形成了親水性高分子層7，在該親水性高分子層7上形成了包含PQQ-GDH和添加劑的反應層8。
實施例1在圖1的基板1的電極上滴下0.5wt％作為親水性高分子的羧甲基纖維素鈉鹽(以下簡稱為“CMC”)的水溶液，在50℃的溫風干燥器中干燥10分鐘，形成CMC層7。然后，在CMC層7上滴下在1ml水中溶有5000個單位的PQQ-GDH和20μM的苯二甲酸氫鉀及50μM的鐵氰化鉀的混合溶液，干燥后便形成反應層8。這樣就制得了葡萄糖傳感器。
然后，調(diào)制各種濃度的葡萄糖水溶液作為試樣溶液，將上述試樣溶液滴加在反應層8上。一旦包含葡萄糖的試樣溶液滴加在反應層上，試樣中的葡萄糖就會被PQQ-GDH氧化。與此同時，反應層中的鐵氰化鉀被還原成亞鐵氰化鉀。
滴加試樣溶液1分鐘后，以配極5為基準，在工作電極4上施加+0.5V的電壓，使亞鐵氰化鉀氧化，5秒鐘后，測定配極和工作電極間的電流值。
用同樣的方法，測定各種濃度的葡萄糖水溶液所對應的電流值，以葡萄糖濃度為橫軸、電流值為縱軸，制得傳感器的應答特性曲線圖。其結果如圖3所示。
將制得的生物傳感器室溫保存6個月后，以同樣的方法制得生物傳感器的應答特性曲線圖。其結果如圖3所示。
從圖3可以看出，所制作的傳感器的空白值非常小。而且，濃度和電流值間存在一定相關性，顯示出良好的線性關系。
剛制作完成的傳感器和保存6個月后的傳感器在應答特性方面幾乎無差異，說明所制作的傳感器的保存性良好。
比較例1除了用磷酸鉀代替苯二甲酸氫鉀之外，其他操作與實施例1相同，制得葡萄糖傳感器。然后，與實施例1同樣，畫出剛制作完成的傳感器和保存6個月后的傳感器的應答特性圖。其結果如圖3所示。
從圖3可以明顯看出，該傳感器的空白值較大、當葡萄糖濃度在低于110mg/dl的低濃度區(qū)域，顯示出高于反映葡萄糖濃度的實際電流值的應答電流值。相反，當葡萄糖濃度在高于110mg/dl的高濃度區(qū)域，應答電流值小于實施例1，葡萄糖濃度和電流值的線性關系有所降低。
并且，保存6個月后的傳感器的線性關系更低于剛制作完成時的傳感器的線性關系，所得的傳感器的保存性不佳。
比較例2除了不添加苯二甲酸氫鉀之外，其他操作與實施例1同樣，制得葡萄糖傳感器。然后，與實施例1同樣，畫出剛制作完成時和保存6個月后的傳感器的應答特性圖。
其結果是，所制作的傳感器的空白值非常大，而且，即使增加底物濃度，應答電流值也幾乎不增加。保存6個月后，傳感器中的酶失活，即使增加底物濃度，應答電流值也幾乎沒有增加。
實施例2除了不在電極上形成CMC層7之外，與實施例1同樣操作，制得葡萄糖傳感器。然后，與實施例1同樣，畫出剛制作完成時和保存6個月后的傳感器的應答特性圖。
其結果是，葡萄糖濃度和電流值間存在一定的相關性，具有良好的線性關系?？瞻字狄草^小，而且，傳感器在剛制作完成時和保存6個月后的傳感器的應答特性幾乎沒有差異，顯示出良好保存性。
實施例3～10除了用馬來酸(實施例3)、琥珀酸(實施例4)、三乙醇胺鹽酸鹽(實施例5)、檸檬酸二氫鈉(實施例6)、二甲基戊二酸(實施例7)、2-(N-嗎啉代)乙磺酸(實施例8)、三(羥甲基)甘氨酸(實施例9)或三(羥甲基)氨基甲烷(實施例10)來代替苯二甲酸氫鉀之外，其他操作與實施例1相同，制得葡萄糖傳感器，然后，畫出剛制作完成時和保存6個月后的傳感器的應答特性圖。該應答特性圖如圖4～圖11所示。
從圖4～圖11可以看出，所制作的傳感器的空白值非常小，濃度和電流值間存在一定的相關性。而且，應答性較高，顯示出良好的線性關系。此外，傳感器在剛制作完成時和保存6個月后其應答特性幾乎沒有差異，顯示出良好的保存性。
實施例11～18除了不在電極上形成CMC層7之外，其他操作與實施例3～10相同，制得葡萄糖傳感器。并畫出剛制作完成時和保存6個月后的傳感器的應答特性圖。
其結果是，葡萄糖濃度和電流值間存在一定的相關性，顯示出良好的線性關系。所得傳感器的空白值也非常小，而且，傳感器在剛制作完成時和保存6個月后在應答特性方面幾乎沒有差異，顯示出良好的保存性。
實施例19在包含1mM氯化鉀的20mM各種添加劑(緩沖液)中加入10U/ml本發(fā)明的以吡咯并喹啉醌為輔酶的葡萄糖脫氫酶，于37℃保持3天后，測定活性殘存率(對應于剛溶解時的活性值的比例)。但是，不在磷酸鉀緩沖液中添加氯化鈣。
各添加劑中的活性殘存率如表1所示。
表1
從表2可看出，與以往廣泛使用的緩沖液，磷酸鉀緩沖液和Tris-鹽酸緩沖液相比，本發(fā)明的添加劑有助于提高經(jīng)過冷凍干燥的酶制品的穩(wěn)定性。
如上所述，通過本發(fā)明能夠制得長期保存性良好、空白值較小的高性能葡萄糖傳感器。而且，能夠獲得穩(wěn)定性優(yōu)于以往的以吡咯并喹啉醌為輔酶的葡萄糖傳感器用葡萄糖脫氫酶組合物。
權利要求
1.一種葡萄糖傳感器，具備電絕緣性基板，設置在前述基板上的至少由工作電極和配極構成的電極系統(tǒng)，以及連接在前述電極系統(tǒng)上或形成于其附近的至少包含以吡咯并喹啉醌為輔酶的葡萄糖脫氫酶的反應層，其特征在于，前述反應層中包含選自苯二甲酸、苯二甲酸鹽、馬來酸、馬來酸鹽、琥珀酸、琥珀酸鹽、三乙醇胺、三乙醇胺鹽、檸檬酸、檸檬酸鹽、二甲基戊二酸、2-(N-嗎啉代)乙磺酸、2-(N-嗎啉代)乙磺酸鹽、三(羥甲基)甘氨酸、三(羥甲基)甘氨酸鹽、三(羥甲基)氨基甲烷、三(羥甲基)氨基甲烷鹽、咪唑及三甲基吡啶中的至少1種添加劑。
2.如權利要求1所述的葡萄糖傳感器，其特征還在于，前述葡萄糖脫氫酶被前述添加劑覆蓋。
3.葡萄糖傳感器用葡萄糖脫氫酶的穩(wěn)定化方法，其特征在于，在以吡咯并喹啉醌為輔酶的葡萄糖脫氫酶中摻入選自苯二甲酸、苯二甲酸鹽、馬來酸、馬來酸鹽、琥珀酸、琥珀酸鹽、三乙醇胺、三乙醇胺鹽、檸檬酸、檸檬酸鹽、二甲基戊二酸、2-(N-嗎啉代)乙磺酸、2-(N-嗎啉代)乙磺酸鹽、三(羥甲基)甘氨酸、三(羥甲基)甘氨酸鹽、三(羥甲基)氨基甲烷、三(羥甲基)氨基甲烷鹽、咪唑及三甲基吡啶中的至少1種添加劑。
4.一種葡萄糖傳感器用葡萄糖脫氫酶組合物，其特征在于，包含以吡咯并喹啉醌為輔酶的葡萄糖脫氫酶和選自苯二甲酸、苯二甲酸鹽、馬來酸、馬來酸鹽、琥珀酸、琥珀酸鹽、三乙醇胺、三乙醇胺鹽、檸檬酸、檸檬酸鹽、二甲基戊二酸、2-(N-嗎啉代)乙磺酸、2-(N-嗎啉代)乙磺酸鹽、三(羥甲基)甘氨酸、三(羥甲基)甘氨酸鹽、三(羥甲基)氨基甲烷、三(羥甲基)氨基甲烷鹽、咪唑及三甲基吡啶中的至少1種添加劑。
全文摘要
本說明書揭示了在具備電絕緣性基板,設置在前述基板上的至少由工作電極和配極構成的電極系統(tǒng),以及連接在前述電極系統(tǒng)上或形成于其附近的至少包含以吡咯并喹啉醌為輔酶的葡萄糖脫氫酶的反應層的葡萄糖傳感器的前述反應層中包含苯二甲酸等添加劑的葡萄糖傳感器。本發(fā)明提供了加入添加劑后保存穩(wěn)定性有所提高、空白值較小的高性能葡萄糖傳感器,以及前述葡萄糖脫氫酶的穩(wěn)定化方法。
文檔編號G01N27/327GK1250161SQ9912100
公開日2000年4月12日 申請日期1999年9月29日 優(yōu)先權日1998年9月29日
發(fā)明者湯川系子, 吉岡俊彥, 南海史朗, 巖田潤子, 宮崎正次, 馬場英行, 竹嶋誠嗣 申請人:松下電器產(chǎn)業(yè)株式會社