一種組織光透明劑及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種組織光透明劑及其應(yīng)用，具體而言涉及一種能維持組織膠原蛋白 空間結(jié)構(gòu)的組織光透明劑及其應(yīng)用，屬于生物光學領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 隨著現(xiàn)代光學成像技術(shù)的發(fā)展和各種標記技術(shù)的出現(xiàn)，高分辨獲取生物組織結(jié)構(gòu) 功能信息成為可能，但生物組織的高散射特性嚴重制約了光學成像技術(shù)在生物醫(yī)學領(lǐng)域中 的應(yīng)用。多光子顯微成像技術(shù)通過采用近紅外光激發(fā)生色團，獲取英光或諧波信號，提高成 像的深度，但對于散射較大的生物組織，其穿透深度依然十分有限。
[0003] 近年來興起的生物組織光透明技術(shù)，通過向生物組織中引入高滲、高折射的化學 試劑能夠有效降低生物組織的散射，極大地提高成像的深度?，F(xiàn)有技術(shù)中采用的最新經(jīng)典 方法包括：（1)、基于四氨巧喃的梯度脫水的方法，其是將生物組織分別浸泡在梯度的四氨 巧喃溶液里（如50 %、70 %、80 %、100 %的四氨巧喃的水溶液）1小時，然后分別浸泡在二氯 甲焼和二予離里（分別為45分鐘和大于1小時），使組織變得透明；（2)、使用尿素溶液的 方法，其是將生物組織浸泡在8M的尿素溶液中一個月左右，使組織變得透明；(3)、基于水 和凝膠單體結(jié)合組織電泳的方法，其是將生物組織先用水和凝膠單體固定1-3天，然后將 生物組織放在十二焼基硫酸軸中電泳5-8天，使組織變得透明。
[0004] 此外，US6472216 B1公開了一種光透明劑，其選自由如下物質(zhì)組成的組：二甲基亞 諷、泛影酸、己二胺四己酸、葡糖胺、目-煙醜胺腺嘿嶺二核巧酸磯酸鹽、泛影酸軸、聚己二醇 及其組合。CN 102749231 A公開了一種骨組織光透明劑，其包括二甲基亞諷、碳酸氨軸，W 及下述物質(zhì)中的至少兩種；聚己二醇-400、水楊酸甲醋、己二胺四己酸、二醋楓苯酸軸、甘 油、葡萄糖、十二焼基苯賴酸軸、山梨醇和月桂醇，該光透明劑作用于骨組織之后，能使其變 得對光透明，并能提高成像深度。CN 103263678 A公開了一種足墊皮膚組織光透明劑，其包 含果糖、己醇、水，W及下述物質(zhì)中的至少H種：聚己二醇-400、山梨醇、葡萄糖、丙二醇、甘 油、十二焼基苯賴酸軸、二甲基亞諷、喔麗、氮麗、薄荷油和凡±林，該方案的光透明劑作用 于足墊皮膚組織之后，能使組織變得對光透明，能提高成像深度。W02013191274 A1中公開 了使用果糖溶液能使胚胎、前腦透明化。
[0005] 盡管現(xiàn)有技術(shù)提供了多種組織光透明劑，但目前該些技術(shù)主要基于膠原解離的基 本原理，會導(dǎo)致膠原蛋白的空間結(jié)構(gòu)被破壞，內(nèi)源信號減弱甚至消失，極大影響了膠原蛋白 光學二次諧波成像的效果。此外，現(xiàn)有技術(shù)所公開的光透明劑及其應(yīng)用方法耗時長；光透明 劑的組合物比較復(fù)雜。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的一個目的在于開發(fā)一種組織光透明劑，其不僅能在短時間內(nèi)有效降低生 物組織散射，使組織透明，還能最大限度的維持膠原蛋白的空間結(jié)構(gòu)，從而使內(nèi)源性光學強 度不受影響；此外，該組合物還能使成像深度得到極大提高。
[0007] 本發(fā)明的另一目的，在于提供所述組織光透明劑的應(yīng)用。
[0008] 為實現(xiàn)本發(fā)明目的，一方面，本發(fā)明提供一種組織光透明劑，W其總重量為100% 計，其包括30?70wt%的果糖、2?lOwt%的聚己二醇單辛基苯基離、5?25wt%的 N，N，N'，N' -四（2-輕基丙基）己二胺及余量的水。
[0009] 根據(jù)本發(fā)明的【具體實施方式】，本發(fā)明所述的組織光透明劑中各組分的含量可根據(jù) 不同生物組織的來源、年齡、體重而變化，可選地，在本發(fā)明所述的組織光透明劑中，W其 總重量為100%計，其包括40?70wt%的果糖、2?5wt%的聚己二醇單辛基苯基離、5? 10wt%的N，N，N'，N'-四（2-輕基丙基）己二胺及余量的水。
[0010] 根據(jù)本發(fā)明的【具體實施方式】，本發(fā)明所述的組織光透明劑中，W其總重量為100% 計，其為50wt%的果糖、5wt%的聚己二醇單辛基苯基離、10wt%的N，N，N'，N'-四（2-輕 基丙基）己二胺W及余量的水；或其為30wt %的果糖、lOwt %的聚己二醇單辛基苯基離、 25wt%的N，N，N'，N'-四（2-輕基丙基）己二胺W及余量的水；或其為70wt%的果糖、2wt% 的聚己二醇單辛基苯基離、5wt%的N，N，N'，N'-四（2-輕基丙基）己二胺W及余量的水。
[0011] 本發(fā)明中所述的聚己二醇單辛基苯基離（octyl地enylpolyethylene glycol)，其 通用名為曲拉通X-100(triton X-100)為商購產(chǎn)品，可通過J&K、A1化或Sigma-Al化ich等 試劑公司購買得到，其具有如下結(jié)構(gòu)式：
[0012]
【主權(quán)項】
1. 一種組織光透明劑，以其總重量為100%計，其包括30?70wt %的果糖、2?IOwt % 的聚乙二醇單辛基苯基醚、5?25wt %的Ν，Ν，Ν'，Ν'-四（2-羥基丙基）乙二胺及余量的水。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的組織光透明劑，其中，以其總重量為100%計，其包括40? 70wt %的果糖、2?5wt %的聚乙二醇單辛基苯基醚、5?IOwt %的Ν，Ν，Ν'，Ν' -四（2-羥基 丙基）乙二胺及余量的水。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的組織光透明劑，以其總重量為100%計，其為50wt%的果糖、 5wt %的聚乙二醇單辛基苯基醚、IOwt %的Ν，Ν，Ν'，Ν'-四（2-羥基丙基）乙二胺以及余 量的水；或其為30被％的果糖、10被％的聚乙二醇單辛基苯基醚、25被％的^^州'-四 (2-羥基丙基）乙二胺以及余量的水；或其為70wt%的果糖、2wt%的聚乙二醇單辛基苯基 醚、5wt%的Ν，Ν，Ν'，Ν'-四（2-羥基丙基）乙二胺以及余量的水。
4. 權(quán)利要求1?3中任一項所述的組織光透明劑在使組織透明中的應(yīng)用。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其中使組織透明是為獲得該組織的二次諧波信號圖和 /或熒光信號圖。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其中，所述的使組織透明是使眼球透明。
7. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其中，所述的使組織透明是使皮膚透明。
8. -種使組織透明的方法，該方法包括： 將生物組織浸泡在權(quán)利要求1?3中所述組織光透明劑中室溫下進行處理，使組織透 明。
9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其中，所述組織在組織光透明劑中的處理時間為10? 30分鐘。
10. 根據(jù)權(quán)利要求8或9所述的方法，其中，所述組織為皮膚、大腦、眼球或肌肉。
【專利摘要】本發(fā)明提供一種組織光透明劑及其應(yīng)用，所述組織光透明劑，以其總重量為100％計，其包括30～70wt％的果糖、2～10wt％的聚乙二醇單辛基苯基醚、5～25wt％的N,N,Nˊ,Nˊ-四(2-羥基丙基)乙二胺及余量的水。本發(fā)明所述的組織光透明劑不對組織中的膠原蛋白的空間結(jié)構(gòu)產(chǎn)生破壞，能夠獲得組織的膠原蛋白的二次諧波信號圖或熒光信號圖，并且所述的組織光透明劑能使成像深度得到極大的提高。
【IPC分類】G01N1-30, G01N21-64
【公開號】CN104568553
【申請?zhí)枴緾N201410841350
【發(fā)明人】鄭煒, 張洋
【申請人】深圳先進技術(shù)研究院
【公開日】2015年4月29日
【申請日】2014年12月30日