一種測定血漿中香紫蘇醇濃度的方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種測定血漿中香紫蘇醇濃度的方法，屬于生物檢測技術領域。
【背景技術】
[0002] 香紫蘇醇（sclareol)又名硬尾醇，是從香紫蘇、煙草和其他鼠尾草屬唇形科植物 中分離提取的一種半日花焼類二聰二叔醇化合物。體內(nèi)、外研究證實，其具有抗炎、抗菌、殺 菌作用，對于人白血病細胞、人結腸癌細胞、人乳腺癌細胞等惡性腫瘤細胞均有不同程度的 殺傷作用，是一種具有良好開發(fā)前景的新藥源化合物。其結構式如下：
【主權項】
1. 一種測定血漿中香紫蘇醇濃度的方法，其特征是步驟為： (1) 血漿樣品預處理：取血漿樣品，加入內(nèi)標硝基安定，加入甲醇沉淀蛋白，離心取上清 液； (2) 色譜：將步驟（1)預處理后的血漿樣品進行液相色譜分離：色譜條件中色譜柱： Phenomenex kinetex XB-C18柱；流動相：甲醇：水體積比為80 :20,流動相中還含有IOmM 醋酸銨；流速：200~300 μ L/min ;柱溫：30~35°C ;進樣量：10 μ L ; (3) 質譜：離子源：電噴霧離子化ESI離子源，方式掃描：選擇反應檢測掃描（SRM)， 噴霧電壓：3500~4000V，鞘氣：20~50psi，輔助氣：10~20arb，毛細管溫度：350°C，離子源溫 度：30(TC ;檢測離子：香紫蘇醇選擇性反應檢測離子[M+H]+ m/z 309. 0 - m/z 230. 9CE: IleV;內(nèi)標硝基安定選擇性反應檢測離子[M+H]+ m/z 282. 3 - m/z 236. 2CE: 23eV; (4) 計算：采用內(nèi)標法，以香紫蘇醇和內(nèi)標硝基安定的峰面積比值代入標準曲線方程， 計算香紫蘇醇的血藥濃度。
2. 如權利要求1所述測定血漿中香紫蘇醇濃度的方法，其特征是：步驟（1)具體為：取 血漿樣品100 μ L，加入500ng/mL內(nèi)標硝基安定溶液10 μ L，再加入甲醇290 μ L，渦旋混勻 5~10min，13000rpm離心10~15min，離心后取上清液。
3. 如權利要求1所述測定血漿中香紫蘇醇濃度的方法，其特征是：步驟（2)中色譜柱長 度為100mm,內(nèi)徑為2. Imm,填料粒徑為2. 6 μ m。
4. 如權利要求2所述測定血漿中香紫蘇醇濃度的方法，其特征是：步驟（1)所述血漿樣 品為含香紫蘇醇的血漿。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種測定血漿中香紫蘇醇濃度的方法，屬于生物檢測技術領域。以硝基安定為內(nèi)標，采用蛋白沉淀法，通過血漿樣品預處理、色譜、質譜和內(nèi)標法計算得到定血漿中香紫蘇醇濃度。本發(fā)明方法快速、準確、靈敏度高、操作簡便，為香紫蘇醇在動物體內(nèi)的藥物代謝動力學研究奠定了方法學基礎。
【IPC分類】G01N30-02
【公開號】CN104569215
【申請?zhí)枴緾N201510044234
【發(fā)明人】黃凱, 張娜, 賀晴
【申請人】無錫市人民醫(yī)院
【公開日】2015年4月29日
【申請日】2015年1月28日