在線衍生測(cè)定化妝品中甲醛的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種在線衍生-液相色譜法測(cè)定化妝品中甲醛的測(cè)定方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 甲醛俗稱(chēng)福爾馬林，是無(wú)色、具有強(qiáng)烈氣味的刺激性氣體，其35%~40%的水溶 液通稱(chēng)福爾馬林。甲醛被世界衛(wèi)生組織確認(rèn)為致癌和致畸物質(zhì)，在我國(guó)有毒化學(xué)品控制名 單上高居第二。2011年1月，歐盟非食品消費(fèi)類(lèi)產(chǎn)品快速預(yù)警系統(tǒng)通報(bào)了我國(guó)輸歐化妝品 中的游離甲醛含量超標(biāo)問(wèn)題。對(duì)照歐盟的化妝品指令76/768/EEC中的限量，被通報(bào)的三批 護(hù)發(fā)素中游離甲醛含量超過(guò)了限量值的8倍之多，將遭到退貨乃至銷(xiāo)毀處理。2011年11月， 美國(guó)安全化妝品運(yùn)動(dòng)聯(lián)盟宣布，部分強(qiáng)生嬰兒洗發(fā)水含有可致癌的二惡烷及釋放出微量甲 醛的季銨鹽-15,并號(hào)召消費(fèi)者抵制強(qiáng)生嬰兒洗發(fā)水，直至這些產(chǎn)品不再含有害化學(xué)物質(zhì)。 化妝品中甲醛超標(biāo)問(wèn)題越來(lái)越引起消費(fèi)者的關(guān)注。
[0003] 化妝品中含有甲醛以及可釋放甲醛的殺菌防腐劑，甲醛緩釋劑通常被添加至化妝 品中，通過(guò)緩慢釋放甲醛或衍生物達(dá)到殺菌防腐目的。我國(guó)《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》（2007版） 規(guī)定甲醛為限用物質(zhì)，口腔衛(wèi)生產(chǎn)品< 0. 1%，其他產(chǎn)品< 0. 2% (均以游離甲醛計(jì)），指甲 硬化劑<5%，同時(shí)禁止用于噴霧產(chǎn)品。當(dāng)成品中甲醛質(zhì)量分?jǐn)?shù)超過(guò)0.05% (以游離甲醛 計(jì)）時(shí)，必須在產(chǎn)品標(biāo)簽上標(biāo)印"含甲醛"?；瘖y品中使用率較高的甲醛緩釋劑類(lèi)防腐劑主 要有：2_溴-2-硝基-1，3-丙二醇、雙（羥甲基）咪唑烷基脲、咪唑烷基脲、DMDM乙內(nèi)酰脲、 季銨鹽-15、烏洛托品、多聚甲醛等，多達(dá)十幾種，《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》（2007版）規(guī)定其限量 為0. 1%~0.6%不等。
[0004] 國(guó)外某研宄組分析了瑞典的潤(rùn)膚霜，結(jié)果顯示10%的樣品中含有甲醛（0.02%~ 0.09% )，這些產(chǎn)品雖沒(méi)有直接加入甲醛，但大多含有可釋放甲醛的防腐劑。國(guó)內(nèi)市場(chǎng)上有 許多除臭或抑汗類(lèi)化妝品含有高達(dá)20%~40%濃度的烏洛托品，可能對(duì)消費(fèi)者的健康構(gòu) 成威脅。文獻(xiàn)報(bào)道甲醛引起過(guò)敏或皮炎所需的閾濃度很低，分別為30 μ g/L(0. 003%)和 250 yg/L(0. 0025% )〇
[0005] 歐盟化妝品化學(xué)分析方法工作組在開(kāi)發(fā)甲醛緩釋劑類(lèi)防腐劑的分析方法時(shí)發(fā)現(xiàn)， 這些物質(zhì)在溶于水和其它極性溶劑時(shí)很快釋放出甲醛。甲醛供體釋放甲醛量的多少和甲醛 釋放體所處的物理化學(xué)環(huán)境有關(guān)，隨PH值、溫度和時(shí)間的增加而增加?；瘖y品中甲醛的測(cè) 定方法主要有比色法、柱前衍生-色譜法、柱后衍生法和核磁共振法?；瘖y品中甲醛檢測(cè)的 難點(diǎn)是，在樣品前處理過(guò)程中，甲醛緩釋劑大量分解導(dǎo)致甲醛檢測(cè)結(jié)果偏高。比色法能測(cè)定 甲醛總量，在衍生化過(guò)程中甲醛緩釋劑分解，檢測(cè)甲醛為游離甲醛、復(fù)合甲醛和聚合甲醛總 量。柱后衍生法能測(cè)定游離甲醛，液相色譜將游離甲醛和甲醛緩釋劑分開(kāi)，柱后衍生避免了 甲醛緩釋劑的干擾，但是在樣品提取和凈化過(guò)程，甲醛緩釋劑在溶于水或其它極性溶劑時(shí) 會(huì)釋放出甲醛。柱前衍生-色譜法，采用衍生反應(yīng)-萃取阻斷法，能有效抑制甲醛緩釋劑 分解釋放甲醛，但是人工操作耗時(shí)，重現(xiàn)性不佳。核磁共振法作為一種純物理方法，雖不會(huì) 影響游離甲醛和甲醛緩釋劑之間的平衡，但核磁共振儀器昂貴，方法難以推廣。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 為了解決上述的化妝品中甲醛的測(cè)定方法中存在的技術(shù)缺陷，本發(fā)明的目的是提 供一種在線衍生-液相色譜法測(cè)定化妝品中甲醛的方法，該方法采用乙腈提取樣品中甲 醛，2,4_二硝基苯肼的乙腈-乙酸（4 :l，v/v)溶液為衍生液，在線自動(dòng)衍生，液相色譜法測(cè) 定。
[0007] 為了實(shí)現(xiàn)上述的目的，本發(fā)明采用了以下的技術(shù)方案：
[0008] 在線衍生測(cè)定化妝品中甲醛的方法，該方法包括以下的步驟：
[0009] 1)提取
[0010] 稱(chēng)取試樣〇. 2g，精確至0. 001g，置于IOmL具塞刻度離心管中，加入適量乙腈，渦旋 溶解；用乙腈定容至10mL，蓋上塞后禍旋混勾lmin，以不低于3000r/min的速率離心3min ; 過(guò)微孔濾膜，濾液2h內(nèi)供HPLC測(cè)定；
[0011] 2)甲醛標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的制備
[0012] 移取適量的甲醛標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，置于IOmL容量瓶中，用乙腈定容至10mL，蓋上塞 后渦旋混勻，供HPLC測(cè)定；上述的甲醛標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液的濃度為100mg/L ;
[0013] 3)測(cè)定
[0014] 根據(jù)樣液中甲醛濃度的情況選定峰面積相近的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液系列，標(biāo)準(zhǔn)工作溶液 和樣液中甲醛衍生物的響應(yīng)值均應(yīng)在儀器檢測(cè)的線性范圍內(nèi)，標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和樣液等體積 參插進(jìn)樣測(cè)定，用保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量；液相色譜條件為：
[0015] a)色譜柱：C18柱，150_X4. 6mm內(nèi)徑，5 μπι，或相當(dāng)者；
[0016] b)流動(dòng)相：乙腈-水，體積比為65 :35 ;
[0017] c)流速：L OmT ,/mi η ；
[0018] d)檢測(cè)波長(zhǎng)：355nm ;
[0019] e)自動(dòng)衍生程序：吸取衍生液10 μ L，樣品溶液5 μ L，衍生液10 μ L，充分混合， 反應(yīng)2min，進(jìn)樣；上述的衍生液為2,4-二硝基苯肼的乙腈溶液與乙酸構(gòu)成的混合溶液，2， 4-二硝基苯肼的濃度為2g/L，衍生液中乙腈：乙酸的體積比為4 :1 ;
[0020] 4)空白試驗(yàn)
[0021] 除不加試樣外，按上述1)和3)操作步驟進(jìn)行；
[0022] 5)結(jié)果計(jì)算和表述
[0023] 按以下公式計(jì)算試樣中甲醛的殘留量或采用色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)計(jì)算，計(jì)算結(jié)果需 扣除空白值：
【主權(quán)項(xiàng)】
1.在線衍生測(cè)定化妝品中甲醛的方法，其特征在于該方法包括以下的步驟： 1) 提取 稱(chēng)取試樣〇.2g，精確至O.OOlg，置于IOmL具塞刻度離心管中，加入適量乙腈，渦旋溶 解；用乙腈定容至10mL，蓋上塞后禍旋混勾lmin，以不低于3000r/min的速率離心3min ;過(guò) 微孔濾膜，濾液2h內(nèi)供HPLC測(cè)定； 2) 甲醛標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的制備 移取適量的甲醛標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，置于IOmL容量瓶中，用乙腈定容至10mL，蓋上塞后渦 旋混勻，供HPLC測(cè)定；上述的甲醛標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液的濃度為100mg/L ; 3) 測(cè)定 根據(jù)樣液中甲醛濃度的情況選定峰面積相近的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液系列，標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和樣 液中甲醛衍生物的響應(yīng)值均應(yīng)在儀器檢測(cè)的線性范圍內(nèi)，標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和樣液等體積參插 進(jìn)樣測(cè)定，用保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量；液相色譜條件為： a) 色譜柱：C18柱，150mmX4. 6mm內(nèi)徑，5 μπι，或相當(dāng)者； b) 流動(dòng)相：乙腈-水，體積比為65 :35 ; c) 流速：1. OmL/min ; d) 檢測(cè)波長(zhǎng)：355nm ; e) 自動(dòng)衍生程序：吸取衍生液10 μ L，樣品溶液5 μ L，衍生液10 μ L，充分混合，反應(yīng) 2min，進(jìn)樣；上述的衍生液為2,4-二硝基苯肼的乙腈溶液與乙酸構(gòu)成的混合溶液，2,4-二 硝基苯肼的濃度為2g/L，衍生液中乙腈：乙酸的體積比為4 :1 ; 4) 空白試驗(yàn) 除不加試樣外，按上述1)和3)操作步驟進(jìn)行； 5) 結(jié)果計(jì)算和表述 按以下公式計(jì)算試樣中甲醛的殘留量或采用色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)計(jì)算，計(jì)算結(jié)果需扣除 空白值： " AxcxV X -- As X m 式中： X--試樣中甲醛的殘留量，單位為μ g/g ; A一一樣液中甲醛衍生物的峰面積； c一一標(biāo)準(zhǔn)溶液中甲醛衍生物的濃度，單位為mg/L ; V 樣液最終定容體積，單位為mL ; As一一標(biāo)準(zhǔn)溶液中甲醛衍生物的峰面積； m一一試樣溶液所代表的試樣質(zhì)量，單位為g。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及一種在線衍生-液相色譜法測(cè)定化妝品中甲醛的測(cè)定方法，步驟如下：1)提?。悍Q(chēng)取試樣，置于具塞刻度離心管中，加入適量乙腈，渦旋溶解；用乙腈定容，蓋上塞后渦旋混勻；過(guò)微孔濾膜，濾液2h內(nèi)供HPLC測(cè)定；2)甲醛標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的制備；3)測(cè)定：根據(jù)樣液中甲醛濃度的情況選定峰面積相近的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液系列，標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和樣液等體積參插進(jìn)樣測(cè)定，用保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量；4)空白試驗(yàn)：除不加試樣外，按上述1)和3)操作步驟進(jìn)行；5)結(jié)果計(jì)算和表述：按公式計(jì)算試樣中甲醛的殘留量或采用色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)計(jì)算，計(jì)算結(jié)果需扣除空白值。本發(fā)明簡(jiǎn)化了樣品制備步驟，提高了檢測(cè)效率，快速、簡(jiǎn)便、重現(xiàn)性高。
【IPC分類(lèi)】G01N30-02
【公開(kāi)號(hào)】CN104634889
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201410754274
【發(fā)明人】呂春華, 侯建波, 黃超群, 謝文, 陳笑梅
【申請(qǐng)人】浙江出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心
【公開(kāi)日】2015年5月20日
【申請(qǐng)日】2014年12月10日