一種蔬菜中55種農(nóng)藥殘留量測(cè)定的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種蔬菜中農(nóng)藥殘留量的測(cè)定方法，具體涉及一種蔬菜中55種農(nóng)藥 殘留測(cè)定的在線凝膠色譜串聯(lián)氣相色譜-質(zhì)譜方法，屬于農(nóng)藥殘留的理化檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 蔬菜與人們的日常生活密切相關(guān)，隨著人們生活水平的提高，人們已經(jīng)開始關(guān)注 蔬菜的質(zhì)量問題，人們不但蔬菜的營養(yǎng)成分，還關(guān)注其質(zhì)量問題。
[0003] 20世紀(jì)80年代以來，溫室、大棚等保護(hù)地蔬菜種植面積迅速增加，重茬、連作導(dǎo)致 蔬菜病蟲害加重，各地在防治蔬菜病蟲害中，大量和連續(xù)地使用化學(xué)農(nóng)藥，使得蔬菜病蟲對(duì) 化學(xué)農(nóng)藥產(chǎn)生了普遍的抗藥性，菜農(nóng)只能加大農(nóng)藥的使用量，由此，農(nóng)藥使用和依賴程度呈 現(xiàn)出惡性循環(huán)狀態(tài)，使得蔬菜中農(nóng)藥殘留量超標(biāo)問題突出。目前使用的農(nóng)藥，有些在較短時(shí) 間內(nèi)可以通過生物降解成為無害物質(zhì)，而一些有機(jī)氯類農(nóng)藥卻難以降解，是殘留性強(qiáng)的農(nóng) 藥。
[0004] 化學(xué)農(nóng)藥的主要危害是化學(xué)農(nóng)藥在蔬菜作物上未完全降解的殘留物進(jìn)入食物，造 成食物污染，直接毒害人畜。食用農(nóng)藥殘留特別是有機(jī)磷農(nóng)藥殘留嚴(yán)重超標(biāo)的蔬菜、會(huì)直 接危及人體的神經(jīng)系統(tǒng)和肝、腎等重要器官，有的人在農(nóng)藥中毒后會(huì)出現(xiàn)頭暈、頭痛、腹痛、 食欲減退、視覺模糊、惡心、嘔吐、多汗等癥狀，重度中毒者還會(huì)出現(xiàn)胸部有擠壓感、肌肉顫 抖等，嚴(yán)重的可出現(xiàn)脈博、呼吸加快及潛質(zhì)昏迷癥狀，甚至引起急性中毒而致死。長期食用 受污染的蔬菜，殘留農(nóng)藥在人體內(nèi)蓄積過一定限度后會(huì)導(dǎo)致一些慢性疾病，如癌癥、動(dòng)脈硬 化、心血管病、胎兒畸形、死胎、早夭、早衰等疾病。農(nóng)藥殘留不但對(duì)人體健康造成極大的危 害，同時(shí)也嚴(yán)重污染人類生存環(huán)境，造成空氣、土壤、河流等污染，并在環(huán)境中不斷積累起 來，造成動(dòng)植物中毒，破壞了生態(tài)平衡。
[0005] 目前，國內(nèi)外報(bào)道的農(nóng)藥殘留檢測(cè)多采用氣相色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法等。 由于氣相色譜法一般只能夠同時(shí)分析檢測(cè)一類化合物，難以滿足多類多殘留分析的發(fā)展趨 勢(shì)。
[0006] 在線凝膠色譜串聯(lián)氣相色譜質(zhì)譜技術(shù)是由GPC純化前處理裝置與GC/MS在線聯(lián)接 組成，采用微型GPC色譜柱的分離能力與新開發(fā)的GC/MS大體積進(jìn)樣法，實(shí)現(xiàn)了農(nóng)藥殘留的 多組份的同時(shí)快速分析。通過在線凝膠色譜串聯(lián)氣相色譜-質(zhì)譜技術(shù)檢測(cè)農(nóng)藥有些報(bào)道， 楊惠琴利用在線凝膠色譜串聯(lián)氣相色譜-質(zhì)譜技術(shù)對(duì)食品中的殺菌劑進(jìn)行了分析，檢出限 為0. 01yg/kg;鄭健琨等通過在線凝膠色譜串聯(lián)氣相色譜-質(zhì)譜技術(shù)，對(duì)土壤中36種農(nóng)藥 進(jìn)行了研宄。但這類文獻(xiàn)往往僅限于幾種或一類農(nóng)藥殘留進(jìn)行分析檢測(cè)，通過在線凝膠色 譜串聯(lián)氣相色譜-質(zhì)譜技術(shù)分析蔬菜中的多類農(nóng)藥殘留，還未見報(bào)道，因此，發(fā)明一種快速 高效的多農(nóng)殘檢測(cè)方法是非常有必要的。
[0007] 中國發(fā)明"一種蔬果中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留測(cè)定的提取凈化方法"，申請(qǐng)?zhí)?201310175339. 0公開了一種蔬果中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留測(cè)定的方法；中國發(fā)明"辣椒紅色素中 有機(jī)磷農(nóng)殘的檢測(cè)方法"，申請(qǐng)?zhí)?01210220762. 3公開了一種辣椒紅色素中有機(jī)磷農(nóng)殘的 檢測(cè)方法。這些檢測(cè)方法只能檢測(cè)少數(shù)種類的殘留農(nóng)藥，不能進(jìn)行相對(duì)全面的農(nóng)藥殘留檢 測(cè)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種操作簡單，快速，自動(dòng)化程度高， 萃取效率高，回收率和重復(fù)性好的蔬菜中55種農(nóng)藥殘留測(cè)定的方法。
[0009] 為實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明的目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案如下：
[0010] 一種蔬菜中55種農(nóng)藥殘留量測(cè)定的方法，包括如下步驟：
[0011] ⑴樣品制備：將樣品絞碎勻衆(zhòng)，冷凍保存；
[0012] (2)樣品前處理：稱取冷凍的樣品于50.OmL聚丙烯塑料離心管中，加入5.OmL去 離子水，浸泡10分鐘，加入乙腈，15000rpm均質(zhì)2min，均質(zhì)后加入氯化鈉和無水硫酸鈉， 9000rpm離心lOmin，吸取上清液5mL于離心管中；在離心管中加入PSA填料，禍旋2.Omin 后，9000rpm離心lOmin，吸取上清液10mL于試管中；溫度45°C下水浴，高純氮?dú)獯抵两桑?用lmL丙酮+環(huán)己烷定容，經(jīng)0. 22ym微孔有機(jī)濾膜過濾，供在線凝膠色譜-氣相色譜質(zhì)譜 分析；
[0013] (3)標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：混合標(biāo)準(zhǔn)工作液用丙酮：環(huán)己烷稀釋；
[0014] (4)在線凝膠色譜串聯(lián)氣相色譜-質(zhì)譜測(cè)定：配制不同濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液，注 入配有在線凝膠色譜串聯(lián)氣相色譜-質(zhì)譜儀中；
[0015] (5)殘留量測(cè)定結(jié)果的計(jì)算：以保留時(shí)間與SIM方法相結(jié)合進(jìn)行55種農(nóng)藥的定性 分析，以峰面積進(jìn)行55種農(nóng)藥的定量分析，用外標(biāo)法計(jì)算結(jié)果；所述樣品為菠菜；步驟（1) 所述冷凍保存條件是-18°C;
[0016] 步驟（2)所述加入乙腈的體積為每克樣品加入5mL，所述加入氯化鈉和無水硫酸 鈉的質(zhì)量為每克樣品分別加入1克氯化鈉和1克無水硫酸鈉，所述PSA填料的量為，每毫升 提取液加入l〇mg的PSA填料；
[0017] 所述氯化鈉和無水硫酸鈉在使用前，均在馬弗爐400°C烘干；步驟（2)所述定容液 丙酮+環(huán)己烷的體積比是3+7 ;步驟（3)所述溶劑丙酮：環(huán)己烷的體積比為3:7 ;步驟⑷所 述混合標(biāo)準(zhǔn)工作液的系列梯度濃度為0. 〇l、〇. 02、0. 05、0. 1、0. 2和0. 5yg/mL;
[0018]步驟（5)所述采用的GPC條件：色譜柱：ShodexCLNpakEV-200(2.l_X150mm); 流動(dòng)相：體積比3+7的丙酮/環(huán)己烷；流速：0.lmL/min;柱溫：40°C;進(jìn)樣量：10yL;GCMS 條件：色譜柱：惰性石英管：5mX0. 53mm;預(yù)柱：Rtx_5MS，5mX0. 25mmX0. 25ym;分析柱： Rtx-5MS，25mX0. 25mmX0. 25ym;PTV進(jìn)樣 口溫度：120°C;柱溫程序：82°C(5min)-8°C/ min-300°C(7. 75min);載氣：氦氣；不分流進(jìn)樣：7min;溶劑延遲：9. 7min;接口溫度： 300°C;離子源溫度：230°C;采集方式：離子監(jiān)測(cè)模式。
[0019] 本發(fā)明的有益效果是：
[0020] 用本方法檢測(cè)蔬菜農(nóng)藥殘留量，農(nóng)藥品種覆蓋面廣，處理操作簡單，快速，自動(dòng)化 程度高，萃取效率高，是一種回收率和重復(fù)性好的測(cè)定蔬菜農(nóng)藥殘留量的方法。
【附圖說明】
[0021] 圖1 :55種農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖（濃度為0. 1 y g/mL):
[0022] 圖中1-10依次為：甲胺磷，敵敵畏，乙酰甲胺磷，敵百蟲，氧樂果，滅線磷，治螟磷， 亞胺硫磷，久效磷，樂果；圖中11-20依次為：特丁硫磷，地蟲硫磷，二嗪磷，磷銨，倍硫磷，對(duì) 硫磷，水胺硫磷，甲基異柳磷，硫環(huán)磷，喹硫磷；圖中21-29