一種檢測蒸餾酒醉度的方法及應用
【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬于釀造技術領域，特別涉及一種檢測蒸餾酒醉度的方法及應用。
【背景技術】
[0002]蒸餾酒是指白酒、白蘭地、威士忌等經發(fā)酵、蒸餾釀制而成的、高酒精度(含酒精18?70%)的酒，也包括用這些酒浸泡、勾兌形成的各種功能酒。由于釀酒原料很多，釀造方法各異，造成酒的風格各有千秋。如傳統的白酒是利用淀粉質原料和輔料，以酒餅、酵母等為發(fā)酵劑，經蒸煮、糖化、發(fā)酵、蒸餾、陳釀、勾兌等工序釀制而成，每一個環(huán)節(jié)都會對白酒的質量造成影響。因此，不同品牌、或同一品牌不同品種的酒，其質量優(yōu)劣都有差異。如今消費者已經從注重白酒的香型、風格、口感等表觀屬性，提升到注重酒后的舒適度與健康度。不容易喝醉的酒一一低醉度酒，成為消費者和生產廠商追求的一種趨勢。
[0003]乙醇是一種中樞神經抑制劑，少量飲酒會使人感覺興奮、愉悅、話多，但隨著飲用劑量的增大，認知和記憶判斷能力會減弱，運動技能下降，步伐不穩(wěn)、左右搖擺、腿腳乏力等癥狀，或導致人昏睡、失去意識，這是測量行為學醉酒的依據。
[0004]酒后人的血液中乙醇濃度升高，濃度大小與喝酒量、酒的質量及酒后時間有直接關系，這是測量血液乙醇濃度醉酒的依據。
[0005]酒的醉度是反映酒固有特性的指標之一。對于同酒度的酒，原則上醉度越低，質量越好。白酒中水和乙醇的含量占到98%，影響酒的醉度的關鍵因素是其余2%左右的物質，包括雜醇、酯類、酸類和其他微量物質，以及由它們混合形成的酒體結構。從而，不同酒的醉度存在差異。但是，目前仍缺乏科學有效檢測蒸餾酒醉度的方法。

【發(fā)明內容】

[0006]本發(fā)明的首要目的在于克服現有技術的缺點與不足，提供一種檢測蒸餾酒醉度的方法。
[0007]本發(fā)明的另一目的在于提供所述檢測蒸餾酒醉度方法的應用。
[0008]本發(fā)明的目的通過下述技術方案實現:一種檢測蒸餾酒醉度的方法，包括如下步驟:
[0009](I)用色譜純級無水乙醇和超純水配制成一種體積濃度或不同體積濃度的乙醇標準溶液；
[0010](2)用乙醇標準溶液和待測蒸餾酒分別給小鼠灌胃；其中，按純酒精劑量計算，使用η個灌胃劑量的乙醇標準溶液對小鼠灌胃后得到的小鼠形成對照組，使用η個灌胃劑量的待測蒸餾酒對小鼠灌胃后得到的小鼠形成試驗組；每個灌胃劑量設置至少2個重復；
[0011](3)對對照組和試驗組進行如下參數測定:
[0012]①測定小鼠灌酒前及灌酒后t時間點的行為參數值；t時間點為兩個，定義為tl和t2 ；
[0013]站立參數At，一分鐘內曠場站立次數，次/分鐘；
[0014]跑滾筒參數Bt，一分鐘內跑滾筒圈數，圈/分鐘；
[0015]游泳參數Ct，一分鐘內游泳距離，米/分鐘；
[0016]翻正參數Dt，仰臥翻正需要的時間，秒；
[0017]②測定灌酒后t時間點的小鼠血液乙醇濃度，為Nt，單位為mg/L ;
[0018](4)對步驟(3)得到的測定數據進行如下處理:
[0019]1、站次比Rlt =酒后t時間一分鐘站立次數A t/酒前一分鐘站立次數Atl;
[0020]I1、滾圈比R2t =酒后t時間一分鐘跑滾筒次數B J酒前一分鐘跑滾筒次數B。；
[0021]II1、游距比R3t =酒后t時間一分鐘游泳的距離C J酒前一分鐘游泳距離C。；
[0022]IV、翻正比 R4t= (T-翻正時間 D t)/T ；
[0023]其中T為小鼠酒后t時間后可翻正的最長時間，即在T時間內不能翻正的小鼠，在該時間段后5?10分鐘內將不能翻正；大于T秒翻正按Dt= T計算；T的單位為秒；
[0024]V、小鼠行為醉酒指數 St= l_(a*R lt+b*R2t+c*R3t+d*R4t)
[0025]其中，a =站立權重，b =跑滾筒權重，c =游泳權重，d =翻正權重，a+b+c+d = 1，O彡St彡I ;
[0026]St= O時，表示喝酒前，小鼠的行為參數正常，正常的站、跑、游、翻正，即Rlt= R2t
=^3t= R 4t= I ；
[0027]S t= I時，表示完全醉，小鼠行為參數異常，失去行為能力，不能站、不能跑、不能游、不能翻正，即 Rlt= R2t= R3t= R4t= O ；
[0028]以小鼠血液乙醇濃度Nt為橫坐標，站次比Rlt、滾圈比R2t、游距比R3t、翻正比R4t分別為縱坐標，作圖，進行線性回歸分析，得到回歸直線方程以及R2 ;進行計算，得到a、b、c和d的值，從而計算出S ^直；
[0029]V1、酒的行為致醉率Xt
[0030]Xt =—定劑量酒后小鼠行為醉酒指數S J乙醇溶液標準劑量后小鼠行為醉酒指數 Sts;
[0031]其中，乙醇溶液標準劑量是步驟(2)的乙醇標準溶液灌胃劑量中選定的一個灌胃劑量；
[0032]VI1、酒的平均行為致醉率X
[0033]X = (Xtl+Xt2) /2 ；
[0034]其中，Xtl、Xt2表示11時間和t2時間分別得到的X值；
[0035]VII1、酒的血液致醉率Yt
[0036]Yt =—定劑量酒后小鼠血液乙醇濃度N J乙醇溶液標準劑量后小鼠血液乙醇濃度 Nts;
[0037]此處的乙醇溶液標準劑量與Xt相同；
[0038]IX、酒的平均血液致醉率Y
[0039]Y = (Ytl+Yt2) /2 ；
[0040]X、酒的綜合致醉率Z
[0041]Z = (X+Y) /2 ；
[0042]X1、酒的綜合醉度Q
[0043]蒸餾酒醉度Q的定義:用蒸餾酒和乙醇標準溶液給小鼠灌胃，達到相同綜合致醉率Z時，灌乙醇標準溶液純酒精劑量/灌蒸餾酒純酒精劑量的比值，即為蒸餾酒醉度；
[0044]乙醇標準溶液在η個灌胃劑量下就會得到η個綜合致醉率Z乙醇鎌，同樣蒸餾酒試樣在η個灌胃劑量下也會得到η個綜合致醉率Zsilis ;以乙醇溶液的η個綜合致醉率Z乙曹?為縱坐標，對應η個灌胃劑量為橫坐標作圖，進行線性回歸分析，得到回歸直線，求出斜率為K乙醇溶液，問樣求出K蒸館酒；
[0045]酒的綜合醉度Q = K蒸館酒/K乙醇溶液。
[0046]步驟(I)中所述的乙醇標準溶液優(yōu)選為不同體積濃度的乙醇標準溶液，以便于在給小鼠灌胃時，控制在無影響灌胃劑量下達到不同的純酒精劑量的目的；
[0047]步驟⑵中所述的蒸餾酒為白酒、白蘭地或威士忌；
[0048]步驟⑵中所述的小鼠包括清潔(CL)級小鼠和無特定病原體動物(SPF)級小鼠；優(yōu)選為SPF級小鼠；
[0049]步驟⑵中所述的小鼠優(yōu)選為體重為20土3g的SPF級小鼠；
[0050]步驟⑵中所述的η為自然數，η的數值的設置以得到綜合致醉率與灌胃劑量之間線性回歸R2大于0.9為準；優(yōu)選為4個；更優(yōu)選為6?7個；
[0051]步驟(2)中所述的灌胃劑量的設置優(yōu)選如下:最低的灌胃劑量為對小鼠行為反應略有影響的劑量，最高的灌胃劑量為使得小鼠完全失去行為能力的劑量；優(yōu)選為按純酒精劑量計算，0.356g純酒精/10g小鼠體重、0.435g純酒精/10g小鼠體重、0.514g純酒精/10g小鼠體重、0.593g純酒精/10g小鼠體重、0.672g純酒精/10g小鼠體重、0.751g純酒精/10g小鼠體重；
[0052]步驟⑵中所述的重復的數量優(yōu)選為3個；
[0053]步驟(3)中所述的小鼠血液乙醇濃度優(yōu)選通過氣相色譜法測定，其具體測定步驟優(yōu)選如下:
[0054]⑷血液預處理:在1.5mL離心管中預先加入1yL 2mg/ml的肝素鈉溶液，采用尾部取血100 μ L，加入500 μ L色譜純乙腈、340 μ L超純水和50yL10mg/ml的內標物，1200r/min離心5min，0.23 μ m有機膜過濾；
[0055](B)氣相色譜條件:使用島津氣相色譜GC 2014C進行檢測，色譜柱為WONDACAPffAX,其規(guī)格為30m*0.25mm*0.25 μπι;進樣I μ I ;升溫程序如下:初試柱溫48°C，3°C /min升溫至55°C，接著30°C /min升溫至200°C保留2min ;載氣類型為氮氣；進樣模式為分流；壓力為100.0KPa ;總流量為18.7mL/min ;柱流量為1.43mL/min ;分流比為10.0 ；
[0056](C)制備標準曲線:使用乙醇和內標物配制5個不同乙醇濃度的標準溶液，其中，乙醇的濃度分別為200mg/L、400mg/L、800mg/L、1200mg/L、1600mg/L，內標物的濃度固定為500mg/L;按步驟(B)氣相色譜條件制作測定血液乙醇的標準曲線，得到乙醇和內標物出現的時間；
[0057](D)血液乙醇濃度測定:將按步驟(A)預處理好的血液樣品，按步驟(B)氣相色譜條件分析，將得到的數據和步驟(C)比對，得到血液乙醇濃度。
[0058]所述的內標物優(yōu)選為叔丁醇；
[0059]步驟(3)中所述的乙醇溶液標準劑量優(yōu)選為步驟(2)中對照組的非兩端值的灌胃劑量，更優(yōu)選為中間值的灌胃劑量，最優(yōu)選為0.593g/100g ；
[0060]所述的檢測蒸餾酒醉度的方法用于評價蒸餾酒的品質，特別適合用于在制備蒸餾酒過程的工藝優(yōu)化中進行應用，得到滿足消費者需求的低醉度的蒸餾酒。
[0061]本發(fā)明相對于現有技術具有如下的優(yōu)點及效果:本發(fā)明所提供的方法是四個行為參數與血液乙醇濃度參數相結合的綜