同時(shí)測(cè)定食品或保健品當(dāng)中多種水溶性維生素含量的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種可同時(shí)測(cè)定食品或保健品中多種水溶性維生素含量的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 維生素是維持人體正常物質(zhì)代謝和某些特殊生理功能不可缺少的低分子有機(jī)化 合物，多數(shù)是輔基和酶的組成部分。維生素根據(jù)其物理性質(zhì)可分為脂溶性維生素和水溶性 維生素。水溶性維生素包括B族維生素（VB 1JB2JB3JB6JB1^)Jc,泛酸等。人體每天 需要攝取不同的維生素來(lái)參與人體的正常生理代謝過(guò)程，而這些維生素主要來(lái)源于食物。 但是人體攝取的維生素太多和太少都有可能引起身體的不適，嚴(yán)重的還會(huì)引起病變。例如， 能促進(jìn)食欲的維生素 VB9 (葉酸），不僅存在于綠色蔬菜中，也存在于肝臟和腎臟中，腸道中 細(xì)菌也能合成。VB9缺乏會(huì)引起骨髓巨紅細(xì)胞成熟受損，引起巨紅細(xì)胞貧血，白血球減少癥， 還會(huì)導(dǎo)致孕婦妊娠中毒、早產(chǎn)等。因此，測(cè)定食品和飲料中維生素含量具有十分重要的意 義。
[0003] 食品中多種維生素含量的檢測(cè)方法已有一些報(bào)道，但多數(shù)是對(duì)基體較為簡(jiǎn)單，維 生素種類少的食品進(jìn)行檢測(cè)。在液相色譜中，為了提高檢測(cè)的靈敏度，也采用多種檢測(cè)器并 用。韓雅珊等同時(shí)檢測(cè)四種維生素（VB 1JB2JB5JB6)，在檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm下測(cè)定VB 1JB2 和VB5，而在熒光（EX295/EX395nm)條件下測(cè)定VB6。廖國(guó)東等人采用膠束液相色譜分離測(cè) 定嬰兒食品中的水溶性維生素，使用十二烷基磺酸鈉的水溶液為流動(dòng)相，加入三乙胺等有 機(jī)改性劑，考察了 6種水溶性維生素 （VBp VB2、VB6、VC、PP)的最佳分離條件，與其他相關(guān) 報(bào)道相比，該方法結(jié)果比較滿意，但分析的維生素種類仍然較少。
[0004] 高效液相色譜法由于能進(jìn)行快速、靈敏準(zhǔn)確的測(cè)定，并能與其他分析技術(shù)聯(lián)用等 優(yōu)點(diǎn)，已經(jīng)成為了目前最常用的分析手段，如中國(guó)專利申請(qǐng)201210584541. 4中揭示的一種 檢測(cè)水溶性維生素的方法，雖然能同時(shí)測(cè)定維生素&、B2、B3、B 6四種維生素，但測(cè)試種類仍 然較少。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于解決上述技術(shù)問(wèn)題，提出一種同時(shí)測(cè)定食品或保健品當(dāng)中多種 水溶性維生素含量的方法。
[0006] 本發(fā)明的技術(shù)方案是：一種同時(shí)測(cè)定食品或保健品當(dāng)中多種水溶性維生素含量的 方法，所述食品或保健品包括片劑、粉劑、膠囊、軟膠囊、沖劑、口服液、飲品形式。
[0007] 具體包括如下步驟：
[0008] 步驟一、標(biāo)準(zhǔn)液的制備
[0009] 按照以下參數(shù)進(jìn)行各種維生素標(biāo)準(zhǔn)液的制備
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 同時(shí)測(cè)定食品或保健品當(dāng)中多種水溶性維生素含量的方法，其特征在于：具體包括 如下步驟： 步驟一、標(biāo)準(zhǔn)液的制備 分別配制水溶性維生素 VB1, VB2, VB3, VC，VB5, VB6, VB9, VB1^標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液，進(jìn)而按一 定比例提取各標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液，然后定量加入已知濃度的H3PO4溶液，配制成多組混合標(biāo)樣； 步驟二、待測(cè)液的制備 取含有多種水溶性維生素的食品或保健品樣品，在樣品中加入提取溶劑，進(jìn)行蝸旋、超 聲，再加入稀釋溶劑，再超聲離心，最后用稀釋溶劑稀釋后通過(guò)過(guò)濾膜進(jìn)行過(guò)濾；其中， 所述提取溶劑按以下步驟制備獲得：稱取硫氰酸銨置于離心管中，加入二甲基亞砜和 冰醋酸，超聲使其溶解； 所述稀釋溶劑按以下步驟制備獲得：稱取硫酸鈉置于離心管中，加入冰醋酸和去離子 水，超聲使其溶解； 步驟三、利用串聯(lián)有紫外檢測(cè)器和熒光檢測(cè)器、柱溫箱、二元梯度泵、自動(dòng)進(jìn)樣器組成 的高效液相色譜儀，以乙腈-磷酸溶液為流動(dòng)相梯度洗脫分離各種維生素，對(duì)步驟一和步 驟二制得的各混合標(biāo)樣和待測(cè)液當(dāng)中的各種水溶性維生素的含量進(jìn)行檢測(cè)； 步驟四、根據(jù)步驟三的檢測(cè)結(jié)果，依據(jù)多組混合標(biāo)樣的檢測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行線性回歸，得到 VB1, VB2, VB3, VC，VB5, VB6, VB9, VB1^線性回歸方程，進(jìn)而依據(jù)這些線性回歸方程以及待測(cè) 液的檢測(cè)數(shù)據(jù)，分析計(jì)算待測(cè)液中水溶性維生素 VB1, VB2, VB3, VC，VB5, VB6, VB9, VB12含量，從 而推知所測(cè)食品或保健品樣品當(dāng)中各種水溶性維生素的含量。
2. 如權(quán)利要求1所述的同時(shí)測(cè)定食品或保健品當(dāng)中多種水溶性維生素含量的方法，其 特征在于：步驟三當(dāng)中，色譜條件如下： 色譜柱：Phenomenex Luna C18, 5. 0 μ m，4. 6mmX 250mm 內(nèi)徑； 流動(dòng)相：流動(dòng)相A :0. 1% H3PO4，流動(dòng)相B :80%乙腈； 流速：〇· 8-lml/min ; 柱溫：30°C ; 進(jìn)樣量：20 μ 1 ; 洗脫時(shí)間：〇~5min，100%A ;5~13min，線性下降至70%Α ;13~25min，保持在70% A0
3. 如權(quán)利要求1或2所述的同時(shí)測(cè)定食品或保健品當(dāng)中多種水溶性維生素含量的方 法，其特征在于：波長(zhǎng)經(jīng)過(guò)優(yōu)化，水溶性維生素的最優(yōu)紫外吸收波長(zhǎng)最終確定為=VB^eOnm, VB3280nm，VC 230nm，VB5210nm，VB9210nm，VB12210nm，VB 2210nm;VB6的熒光檢測(cè)波長(zhǎng)為 Ex 290nm/Em 395nm。
4. 如權(quán)利要求1或2所述的同時(shí)測(cè)定食品或保健品當(dāng)中多種水溶性維生素含量的方 法，其特征在于：步驟二待測(cè)液的配制過(guò)程中，使用0. 45 μ m的濾膜進(jìn)行過(guò)濾。
5. 如權(quán)利要求1所述的同時(shí)測(cè)定食品或保健品當(dāng)中多種水溶性維生素含量的方法，其 特征在于：步驟一中樣品標(biāo)準(zhǔn)液的配制按照以下參數(shù)進(jìn)行制備，
然后，分別吸取 0.6ml VBpOJml VB2,0.2ml VB3,0.4ml VB5,0.4ml VB9,0.1ml VB6， 0.1ml VC，0.1 ml VB12置于5ml離心管中，加入1.9ml 0.85% H3PO4,配成混合標(biāo)樣，再將配 制好的混合標(biāo)樣溶液用0. 85% H3PO4四倍稀釋成4個(gè)不同濃度的混合標(biāo)樣。
6. 如權(quán)利要求1所述的同時(shí)測(cè)定食品或保健品當(dāng)中多種水溶性維生素含量的方法，其 特征在于：所述食品或保健品為復(fù)合維生素片，所述步驟二中待測(cè)液的制備過(guò)程中，先將復(fù) 合維生素片研磨成粉末，然后加入提取溶劑，繼而再進(jìn)行后續(xù)處理。
7. 如權(quán)利要求1所述的同時(shí)測(cè)定食品或保健品當(dāng)中多種水溶性維生素含量的方法，其 特征在于：所述食品或保健品包括片劑、粉劑、膠囊、軟膠囊、沖劑、口服液、飲品。
【專利摘要】本發(fā)明揭示了一種同時(shí)測(cè)定食品或保健品當(dāng)中多種水溶性維生素含量的方法，具體步驟包括：分別制備樣品混合標(biāo)準(zhǔn)溶液和待測(cè)液，利用高效液相色譜儀，以乙腈-磷酸溶液為流動(dòng)相梯度洗脫分離各種維生素，對(duì)各混合標(biāo)樣和待測(cè)液進(jìn)行檢測(cè)，然后依據(jù)多組混合標(biāo)樣的檢測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行線性回歸，進(jìn)而依據(jù)這些線性回歸方程以及待測(cè)液的檢測(cè)數(shù)據(jù)，分析計(jì)算待測(cè)液中水溶性維生素VB1，VB2，VB3，VC，VB5，VB6，VB9，VB12的含量，從而推知所測(cè)食品或保健品樣品當(dāng)中各種水溶性維生素的含量本發(fā)明能一次性同時(shí)完成8種水溶性維生素的檢測(cè)分析，能夠有效改善多種維生素的分離效率，可以測(cè)定基質(zhì)較為復(fù)雜的樣品。
【IPC分類】G01N30-88
【公開(kāi)號(hào)】CN104730190
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510096034
【發(fā)明人】張盟, 李鵬高, 張先勇
【申請(qǐng)人】蘇州源澤生物技術(shù)有限公司
【公開(kāi)日】2015年6月24日
【申請(qǐng)日】2015年3月4日