黑加侖中矢車菊-3-蕓香糖苷的hplc測定方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及藥物分析提取技術(shù)領(lǐng)域，特別設(shè)及一種黑加侖中矢車菊-3-蕓香糖巧 的HPLC測定方法。
【背景技術(shù)】
[000引黑加侖學(xué)名黑穗醋栗巧ibes nigrum L.)又名黑醋栗，黑豆果，紫梅，虎耳草目茶 薦子科茶薦子屬，小型灌木，其成熟果實為黑色小漿果，內(nèi)富含維生素C、花青素，可W食用。 也可W加工成果汁，果醬等食品。黑加侖含有非常豐富的維生素C、磯、儀、鐘、巧、花青素、酪 類物質(zhì)。目前已經(jīng)知道的黑加侖的保健功效包括預(yù)防痛風(fēng)、貧血、水腫、關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕病、口 腔和咽喉疾病、咳嗽等。
[0003] 黑加侖是我國北方的主要漿果產(chǎn)品，產(chǎn)量較高，果實營養(yǎng)豐富并具有多種花青素 昔，還具有重要的生理功能和保健功能，具有很好的市場前景。
[0004] 現(xiàn)有的黑加侖中矢車菊-3-蕓香糖巧的測定方法，步驟繁瑣，準(zhǔn)確率低，且在測定 過程中會對黑加侖果實造成較大損耗，造成產(chǎn)品經(jīng)濟效益低下。
[0005] 矢車菊-3-蕓香糖巧是黑加侖果實中的主要色素成分。本發(fā)明在現(xiàn)有技術(shù)基礎(chǔ)上 建立了一種黑加侖果實中矢車菊素-3-0-蕓香糖巧含量的HPLC測定方法。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0006] 為解決上述現(xiàn)有技術(shù)存在的問題，本發(fā)明的目的在于提供一種黑加侖中矢車 菊-3-蕓香糖巧的HPLC測定方法。
[0007] 為達到上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案為：
[000引一種黑加侖中矢車菊-3-蕓香糖巧的HPLC測定方法，包括如下步驟：
[0009] 步驟一、選取成熟新鮮的黑加侖果實，清洗干凈后充分壓棒打漿；
[0010] 步驟二、將步驟一所得漿液及黑加侖果實殘渣利用己醇充分提取矢車菊-3-蕓香 糖巧；
[0011] 步驟=、將步驟二所得含有矢車菊-3-蕓香糖巧的濾液利用高效液相色譜儀 Agilent 2600,采用Zorbax SB C18柱；紫外檢測器；VWD，G1314F，檢測波長為520nm ;流 動相A液選取濃度1. 6%的甲酸水溶液，B液選取濃度1. 6%的甲酸己膳溶液；柱溫箱溫度 30 ; °C進樣量lOul ;流速Iml/min，進行梯度洗脫；
[0012] 步驟四、依據(jù)梯度洗脫數(shù)據(jù)建立矢車菊-3-蕓香糖巧標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程。
[0013] 進一步的，所述步驟S中，ZorbaxSB C18柱的具體參數(shù)為250mmX4. 60mm，5ym。
[0014] 進一步的，所述步驟S中，梯度洗脫的具體操作為；0-5min，85% A液，15% B液； 5-10min，80% A 液，20% B 液；10-30min，72% A 液，28% B 液；30-36min，100% B 液。
[0015] 進一步的，所述步驟四中：矢車菊-3-蕓香糖巧標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為；Y = 2X 107X- 33120(r = 0.9998)，在0.1041~1.041yg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，平均回收率 分別為96. 4%，矢車菊素-3-0-蕓香糖巧含量范圍為5. 263~12. 829mg/g。
[0016] 相對于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明的有益效果為：
[0017] 本發(fā)明方法簡便、準(zhǔn)確，可用于黑加侖果實質(zhì)量控制。結(jié)果顯示利用本發(fā)明矢車 菊-3-蕓香糖巧標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為；Y = 2X 107X- 33120(r = 0.9998)，在0.1041~ 1. 041 y g范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，平均回收率分別為96. 4%，矢車菊素-3-0-蕓香糖巧含量 范圍為 5. 263 ~12. 829mg/g。
【具體實施方式】
[0018] 下面結(jié)合【具體實施方式】對本發(fā)明技術(shù)方案做進一步詳細描述：
[0019] 試驗例；
[0020] 儀器；Agilent 2600 ;
[0021]檢測波長；515nm，，檢測器；VWD佑1314巧；
[002引 柱溫箱溫度；30°C，TCC佑1316A);
[0023]進樣量；10ul
[0024]流速；Iml/min
[0025] 流動相；A液；1. 6%甲酸水溶液；B液；1. 6%甲酸甲醇溶液
[0026] 運行程序：
[0027]
【主權(quán)項】
1. 一種黑加侖中矢車菊-3-蕓香糖苷的HPLC測定方法，其特征在于，包括如下步驟： 步驟一、選取成熟新鮮的黑加侖果實，清洗干凈后充分壓榨打漿； 步驟二、將步驟一所得漿液及黑加侖果實殘渣利用乙醇充分提取矢車菊-3-蕓香糖 苷； 步驟三、將步驟二所得含有矢車菊-3-蕓香糖苷的濾液利用高效液相色譜儀Agilent 2600,采用ZorbaxSB C18柱；紫外檢測器：VWD，G1314F，檢測波長為520nm ;流動相A液選 取濃度1. 6%的甲酸水溶液，B液選取濃度1. 6%的甲酸乙腈溶液；柱溫箱溫度30°C ;進樣 量IOul ;流速lml/min，進行梯度洗脫； 步驟四、依據(jù)梯度洗脫數(shù)據(jù)建立矢車菊-3-蕓香糖苷標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的黑加侖中矢車菊-3-蕓香糖苷的HPLC測定方法，其特征在 于，所述步驟三中，Zorbax SB C18柱的具體參數(shù)為250mmX 4. 60mm，5 ym。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的黑加侖中矢車菊-3-蕓香糖苷的HPLC測定方法，其特征在 于，所述步驟三中，梯度洗脫的具體操作為：〇-5min，85% A液，15% B液；5-10min，80% A 液，20% B 液；10-30min，72% A 液，28% B 液；30-36min，100% B 液。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的黑加侖中矢車菊-3-蕓香糖苷的HPLC測定方法，其特征在 于，所述步驟四中：矢車菊-3-蕓香糖苷標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為：Y = 2X 107X - 33120 (r = 0.9998)，在0. 1041~1.041yg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，平均回收率分別為96.4%，矢車菊 素-3-0-蕓香糖苷含量范圍為5. 263~12. 829mg/g。
【專利摘要】一種黑加侖中矢車菊-3-蕓香糖苷的HPLC測定方法，包括如下步驟：步驟一、選取成熟新鮮的黑加侖果實，清洗干凈后充分壓榨打漿；步驟二、將步驟一所得漿液及黑加侖果實殘渣利用乙醇充分提取矢車菊-3-蕓香糖苷；步驟三、將步驟二所得含有矢車菊-3-蕓香糖苷的濾液利用高效液相色譜儀Agilent 2600，采用Zorbax SB C18柱；紫外檢測器：VWD，G1314F，檢測波長為520nm；流動相A液選取濃度1.6％的甲酸水溶液，B液選取濃度1.6％的甲酸乙腈溶液；柱溫箱溫度30℃；進樣量10μl；流速1ml/min，進行梯度洗脫；步驟四、依據(jù)梯度洗脫數(shù)據(jù)建立矢車菊-3-蕓香糖苷標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程。本發(fā)明方法簡便、準(zhǔn)確，可用于黑加侖果實質(zhì)量控制。平均回收率分別為96.4％。
【IPC分類】G01N30-02
【公開號】CN104749279
【申請?zhí)枴緾N201510142303
【發(fā)明人】夏惠, 梁東, 唐懿, 呂秀蘭, 王迅, 王志輝, 孫國超, 林玲, 朱婷婷, 楊濤
【申請人】四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
【公開日】2015年7月1日
【申請日】2015年3月27日