中藥制劑乙肝扶正膠囊的檢測方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種藥物的檢測方法，特別涉及一種中藥制劑乙肝扶正膠囊的檢測方法。
【背景技術(shù)】
[0002]乙肝扶正膠囊是《衛(wèi)生部藥品標準》中藥成方制劑第一冊收載的品種，其標準編號為WS3-B-0001-89，處方何首烏、虎杖、貫眾、肉桂、明礬、石榴皮、當歸、丹參、沙苑子、人參、麻黃，是純中藥制成的膠囊劑，具有補肝腎，益氣活血的作用。臨床上用于治療乙型肝炎，辨證屬于肝腎兩虛證候。臨床表現(xiàn)為:肝區(qū)隱痛不適，全身乏力，腰膝酸軟，氣短心悸，自汗，頭暈，納少，舌淡脈弱的常用藥品。該藥品標準是衛(wèi)生部最早制定的藥品標準，收載于第一冊第一頁，在當時是比較好的藥品標準。原標準中僅對當歸和肉桂進行了顯微鑒別，沒有對其它幾種藥材和任何成份進行定性定量的質(zhì)量控制，既沒有質(zhì)量指標，也沒有這些質(zhì)量指標的鑒別和檢驗方法，由此會導致不法廠商在生產(chǎn)藥品時可能不嚴格按照處方的劑量配料，肆意減少原料，致使藥品的療效明顯下降，影響藥品的安全有效，嚴重損害患者的利益。
[0003]處方中的虎杖，為常用中藥材；主產(chǎn)于江蘇、浙江及安徽等地。因其采收期葉均枯萎、脫落，僅剩殘莖，與博落回的殘莖相似，均為中空似竹，故在浙江某些地方民間均稱作“猢猻竹”或“蛤蟆竹”，藥農(nóng)極易誤采誤收，導致虎杖商品中混有博落回根。而博落回為罌粟科植物，含多種生物堿，毒性較大，文獻上已屢有口服或肌注后中毒乃至死亡的報道，主要為引起急性心源性腦缺血綜合征。因此，控制乙肝扶正膠囊中博落回的混入非常必要。
[0004]處方中用到沙苑子，為豆科植物扁莖黃芪的干燥、成熟種子，具有溫補肝腎、固精、縮尿、明目等功效，是一種常用中藥材，臨床應用廣泛且療效肯定。由于市場需求量大，一些不法分子為達到其贏利的目的，常以次充好、以假亂真，造成市場上沙苑子的品種比較混亂，常有混入紫云英、豬屎豆的種子等情況發(fā)生。豬屎豆，又名太陽麻，為豆科多年生草本或直立矮小灌木，其種子和幼嫩枝葉有毒，人畜誤食種子或莖葉，嚴重者會因腹水和肝功能喪失而導致死亡。因此，控制豬屎豆，不讓其混入沙苑子中，對保證乙肝扶正膠囊的安全性十分必要。
[0005]在現(xiàn)有乙肝扶正膠囊的檢測方法中，均未對博落回和豬屎豆進行鑒別。根據(jù)乙肝扶正膠囊的處方特點，制定確實可行的檢測方法，尤其是對處方中虎杖和博落回、沙苑子和豬屎豆的鑒別，以保證產(chǎn)品的質(zhì)量和臨床療效非常迫切。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中所存在的上述不足，提供一種中藥制劑乙肝扶正膠囊的檢測方法。該檢測方法通過性狀、顯微觀察以及對制劑中的虎杖和博落回、沙苑子和豬屎豆、貫眾主要藥材進行薄層色譜定性鑒別，同時對丹參特征成分丹酚酸B進行含量測定，有效地控制了乙肝扶正膠囊的成分和含量，使該藥品更加安全、有效。
[0007]為了實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供了以下技術(shù)方案:
[0008]本發(fā)明所述乙肝扶正膠囊的制備方法為:分別稱取何首烏15g、虎杖25g、貫眾50g、肉桂5g、明礬10g、石榴皮6g、當歸10g、丹參15g、沙苑子10g、人參10g、麻黃6g。將當歸、肉桂、丹參、明礬粉碎為細粉；將余下七味藥材加水煎煮二次，第一次3h，第二次2h，合并煎液，濾過，濾液濃縮成稠膏狀，然后加入上述細粉，混勻，于70?80°C干燥，再粉碎成細粉，過篩，裝膠囊，即得乙肝扶正膠囊。
[0009]本發(fā)明所述中藥制劑乙肝扶正膠囊的檢測方法，包括性狀、顯微觀察、薄層色譜定性鑒別、含量測定項目，所述薄層色譜定性鑒別包括對制劑中虎杖和博落回的鑒別、貫眾的鑒別、沙苑子和豬屎豆的鑒別；所述含量測定包括對制劑中丹參特征成分丹酚酸B的含量測定；
[0010](I)性狀
[0011]本品內(nèi)容物為棕褐色粉末，味苦；
[0012]⑵顯微觀察
[0013]取本品，置顯微鏡下觀察，薄壁細胞紡錘形，直徑18?34 μ m，壁略厚非木化，有極微細的斜向交錯紋理；
[0014](3)薄層色譜定性鑒別
[0015]虎杖和博落回的鑒別:分別以虎杖對照藥材和博落回對照藥材為對照品，以體積比氯仿:甲醇=11?15: 3的氯仿-甲醇混合液為展開劑，用薄層色譜法鑒別；
[0016]貫眾的鑒別:以貫眾對照藥材為對照品，以體積比氯仿:丙酮:冰醋酸=13?17: 2.5?3.5: 0.5的氯仿-丙酮-冰醋酸混合液為展開劑，用薄層色譜法鑒別；
[0017]沙苑子和豬屎豆的鑒別:分別以沙苑子對照藥材和豬屎豆對照藥材為對照品，以體積比甲醇:水=7?9: 3的甲醇-水混合液為展開劑，用薄層色譜法鑒別；
[0018]⑷含量測定
[0019]丹酚酸B的含量測定:照高效液相色譜法《中國藥典》2010年版一部附錄VI D測定;
[0020]用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積比甲醇:乙腈:甲酸:水=28?32: 9?11:1: 57?61的甲醇-乙腈-甲酸-水混合液為流動相；檢測波長為286nm;理論板數(shù)按丹酚酸B峰計算應不低于2000 ;
[0021]精密稱取丹酚酸B對照品適量，加70?80v%甲醇制成對照品溶液；
[0022]取本品，取其內(nèi)容物，研細，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70?80v%甲醇，稱定重量，超聲處理，取出，放冷，再稱定重量，用70?80v%甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，得供試品溶液；
[0023]分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀，測定，本品每粒含丹酚酸B不得少于0.5mgo
[0024]貫眾，多年生草本，為鱗毛蕨科植物粗莖鱗毛蕨的根莖及葉柄殘基，性味苦、澀、微寒、有小毒；歸肝經(jīng)、胃經(jīng)。其功能殺蟲、清熱、解毒、涼血止血。因為貫眾有毒，所以必須嚴格控制好其在乙肝扶正膠囊中的含量，否則會對患者帶來不良反應?，F(xiàn)有技術(shù)中，許多廠家由于無法嚴格控制貫眾在乙肝扶正膠囊中的含量，導致許多廠家直接取消貫眾入藥，而貫眾為乙肝扶正膠囊中的主要藥方，取消貫眾入藥會顯著影響乙肝扶正膠囊的療效。因此，對乙肝扶正膠囊中的貫眾進行鑒別非常重要。
[0025]虎杖，為常用中藥材；主產(chǎn)于江蘇、浙江及安徽等地。因其采收期葉均枯萎、脫落，僅剩殘莖，與博落回的殘莖相似，均為中空似竹，故在浙江某些地方民間均稱作“猢猻竹”或“蛤蟆竹”，藥農(nóng)極易誤采誤收，導致虎杖商品中混有博落回根。而博落回為罌粟科植物，含多種生物堿，毒性較大，文獻上已屢有口服或肌注后中毒乃至死亡的報道，主要為引起急性心源性腦缺血綜合征。因此，控制乙肝扶正膠囊中博落回的混入非常必要。
[0026]沙苑子，為豆科植物扁莖黃芪的干燥、成熟種子，具有溫補肝腎、固精、縮尿、明目等功效，是一種常用中藥材，臨床應用廣泛且療效肯定。由于市場需求量大，一些不法分子為達到其贏利的目的，常以次充好、以假亂真，造成市場上沙苑子的品種比較混亂，常有混入紫云英、豬屎豆的種子等情況發(fā)生。豬屎豆，又名太陽麻，為豆科多年生草本或直立矮小灌木，其種子和幼嫩枝葉有毒，人畜誤食種子或莖葉，嚴重者會因腹水和肝功能喪失而導致死亡。因此，控制豬屎豆，不讓其混入沙苑子中，對保證乙肝扶正膠囊的安全性十分必要。
[0027]丹參，為唇形科植物丹參的干燥根和根莖，具有活血祛瘀，通經(jīng)止痛，清心除煩，涼血消癰之功效?，F(xiàn)代研宄表明，丹參中含有丹參酮II A、丹酚酸B、原兒茶醛等多種成份，其主要有效成份的熱穩(wěn)定性差，其中以丹酚酸B的熱穩(wěn)定性最差，甚至在高于60°C的溫度時，低濃度下受熱20min左右即損失50%以上。因此在乙肝扶正膠囊生產(chǎn)過程中，如果沒有控制好工藝條件，乙肝扶正膠囊中的有效成份會發(fā)生損失，直接影響到乙肝扶正膠囊的療效。對熱穩(wěn)定性最差的丹酚酸B進行含量測定，不僅可有效保證丹參中其它有效成份不受影響，也基本上保證了乙肝扶正膠囊中其它成份不受影響，從而保證了乙肝扶正膠囊的療效。
[0028]在本發(fā)明所述丹酚酸B的含量測定中，采用超聲提取，與傳統(tǒng)的加熱水流提取方式相比，提取效果相當，但是操作更加簡單，易掌握。采用體積比甲醇:乙腈:甲酸:水=28?32: 9?11:1: 57?61的甲醇-乙腈-甲酸-水混合液為流動相，丹酚酸B在5min內(nèi)即可出峰，出峰時間短，而且分離度好，圖譜基線穩(wěn)定。
[0029]本發(fā)明所述檢測方法通過對貫眾、虎杖、博落回、沙苑子、豬屎豆進行薄層色譜鑒另IJ，并對丹酚酸B進行含量測定，有效地控制了乙肝扶正膠囊的成分和含量，使該藥品更加安全、有效，從而保證了該膠囊制劑的臨床療效，維護了患者利益。
[0030]優(yōu)選地，所述(3)項下虎杖和博落回薄層色