一種蘇木素染色方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及蘇木素染色技術(shù)領(lǐng)域,尤其涉及一種蘇木素染色方法。
【背景技術(shù)】
[0002]蘇木素是從洋蘇木中提取的一種染色劑,它在被氧化后生成蘇木精,同媒染劑(常用的是三價的鐵或鋁的鹽)一起使用,能夠使細(xì)胞核染色。蘇木素是一種堿性染料。蘇木素和伊紅在組織學(xué)上被經(jīng)常使用,與碘液不同,這是一種永久染色劑。
[0003]組織病理HE染色日常工作中,二甲苯脫蠟較久,染色流程時間長、著色差、掉片等不同現(xiàn)象頻繁出現(xiàn),如時間短會脫蠟不理想影響著色,蘇木素染色液配制或季節(jié)更替的溫差,冬季溫度低染色時間長,著色差,鹽酸酒精濃度偏高、分化過度而致的因素,分化清洗后流水沖洗返藍(lán)需時間長,效果不理想,碳酸鋰返藍(lán)先酸后堿易導(dǎo)致脫片。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004]為解決上述技術(shù)問題,本發(fā)明的目的在于提供一種蘇木素染色方法。
[0005]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題采用以下技術(shù)方案來實現(xiàn):
[0006]一種蘇木素染色方法,其特征在于:包括脫蠟、蘇木素染色、返藍(lán)、染伊紅的步驟,具體如下:
[0007](I)脫蠟:脫蠟過程中,涮過3步二甲苯及由高至低的梯度酒精后,脫蠟不完全的情況下,先用冷水清洗,再放入65°C?70°C的熱水中清洗10秒,可清洗掉殘余蠟漬,進(jìn)一步避免影響蘇木素著色;
[0008](2)蘇木素染色:定時染色結(jié)束后,從染色缸中拿出整架制片,直接放入清洗桶,開自來水沖洗,水流速度3m/s靜置沖洗,根據(jù)著色情況靜置沖洗I?2分鐘后,再鹽酸酒精分化清洗;經(jīng)過靜置沖洗后,細(xì)胞核著色明顯好于直接分化清洗的制片。
[0009]現(xiàn)有技術(shù)中,由于受到時間、季節(jié)溫度、配制方法、新配試劑氧化不完全等因素的影響,使蘇木素著色較淡。
[0010](3)返藍(lán):鹽酸酒精分化清洗后,用50°C?60°C溫?zé)崴邓{(lán)后流水沖洗,再用50°C?60°C溫?zé)崴邓{(lán),返藍(lán)后染伊紅。溫?zé)崴?xì)胞核返藍(lán)效果較好,可明顯減少脫片情況,注意水溫不可過高,以免影響組織染色。
[0011]染伊紅過程中,水溶性伊紅可返藍(lán)后直接染伊紅,醇溶性伊紅需返藍(lán)后先用95%乙醇清洗后再染伊紅。
[0012]現(xiàn)有技術(shù)中,鹽酸酒精分化清洗后,直接用飽和碳酸鋰返藍(lán)清洗,這個過程由于酸堿度不同較容易導(dǎo)致脫片,特別一些血凝塊組織最易脫片。
[0013]本發(fā)明的有益效果是:
[0014]本發(fā)明可清洗掉殘余蠟漬,進(jìn)一步避免影響蘇木素著色;經(jīng)過靜置沖洗后,細(xì)胞核著色明顯好于直接分化清洗的制片;溫?zé)崴?xì)胞核返藍(lán)效果較好,可明顯減少脫片情況。
【具體實施方式】
[0015]為了使本發(fā)明實現(xiàn)的技術(shù)手段、創(chuàng)作特征、達(dá)成目的與功效易于明白了解,下面結(jié)合具體實施例,進(jìn)一步闡述本發(fā)明,但下述實施例僅僅為本發(fā)明的優(yōu)選實施例,并非全部?;趯嵤┓绞街械膶嵤├绢I(lǐng)域技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動的前提下所獲得其它實施例,都屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
[0016]一種蘇木素染色方法,具體如下:
[0017](I)脫蠟:脫蠟過程中,涮過3步二甲苯及由高至低的梯度酒精后,脫蠟不完全的情況下,先用冷水清洗,再放入65°C?70°C的熱水中清洗10秒,可清洗掉殘余蠟漬,進(jìn)一步避免影響蘇木素著色;
[0018](2)蘇木素染色:定時染色結(jié)束后,從染色缸中拿出整架制片,直接放入清洗桶,開自來水沖洗,水流速度3m/s靜置沖洗,根據(jù)著色情況靜置沖洗I?2分鐘后,再鹽酸酒精分化清洗;
[0019](3)返藍(lán):鹽酸酒精分化清洗后,用50°C?60°C溫?zé)崴邓{(lán)后流水沖洗,再用50°C?60°C溫?zé)崴邓{(lán),返藍(lán)后染伊紅;染伊紅過程中,水溶性伊紅可返藍(lán)后直接染伊紅,醇溶性伊紅需返藍(lán)后先用95%乙醇清洗后再染伊紅。
[0020]以上顯示和描述了本發(fā)明的基本原理、主要特征和本發(fā)明的優(yōu)點。本行業(yè)的技術(shù)人員應(yīng)該了解,本發(fā)明不受上述實施例的限制,上述實施例和說明書中描述的僅為本發(fā)明的優(yōu)選例,并不用來限制本發(fā)明,在不脫離本發(fā)明精神和范圍的前提下,本發(fā)明還會有各種變化和改進(jìn),這些變化和改進(jìn)都落入要求保護(hù)的本發(fā)明范圍內(nèi)。本發(fā)明要求保護(hù)范圍由所附的權(quán)利要求書及其等效物界定。
【主權(quán)項】
1.一種蘇木素染色方法,其特征在于:包括脫蠟、蘇木素染色、返藍(lán)、染伊紅的步驟,具體如下: (1)脫蠟:脫蠟過程中,涮過3步二甲苯及由高至低的梯度酒精后,脫蠟不完全的情況下,先用冷水清洗,再放入65°C?70°C的熱水中清洗10秒,可清洗掉殘余蠟漬,進(jìn)一步避免影響蘇木素著色; (2)蘇木素染色:定時染色結(jié)束后,從染色缸中拿出整架制片,直接放入清洗桶,開自來水沖洗,水流速度3m/s靜置沖洗,根據(jù)著色情況靜置沖洗I?2分鐘后,再鹽酸酒精分化清洗; (3)返藍(lán):鹽酸酒精分化清洗后,用50°C?60°C溫?zé)崴邓{(lán)后流水沖洗,再用50°C?60 °C溫?zé)崴邓{(lán),返藍(lán)后染伊紅。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蘇木素染色方法,其特征在于:染伊紅過程中,水溶性伊紅可返藍(lán)后直接染伊紅,醇溶性伊紅需返藍(lán)后先用95%乙醇清洗后再染伊紅。
【專利摘要】本發(fā)明提供一種蘇木素染色方法,涉及蘇木素染色技術(shù)領(lǐng)域,步驟:(1)脫蠟:脫蠟過程中,先用冷水清洗,再放入65℃~70℃的熱水中清洗10秒,可清洗掉殘余蠟漬,進(jìn)一步避免影響蘇木素著色;(2)蘇木素染色:定時染色結(jié)束后,從染色缸中拿出整架制片,直接放入清洗桶,開自來水沖洗,水流速度3m/s靜置沖洗,根據(jù)著色情況靜置沖洗1~2分鐘后,再鹽酸酒精分化清洗;(3)返藍(lán):鹽酸酒精分化清洗后,用50℃~60℃溫?zé)崴邓{(lán)后流水沖洗,再用50℃~60℃溫?zé)崴邓{(lán),返藍(lán)后染伊紅。本發(fā)明可清洗掉殘余蠟漬,避免影響蘇木素著色;經(jīng)過靜置沖洗后,細(xì)胞核著色明顯好于直接分化清洗的制片;溫?zé)崴?xì)胞核返藍(lán)效果較好,可明顯減少脫片情況。
【IPC分類】G01N1-30
【公開號】CN104807686
【申請?zhí)枴緾N201510224406
【發(fā)明人】劉興亮
【申請人】合肥金域醫(yī)學(xué)檢驗所有限公司
【公開日】2015年7月29日
【申請日】2015年4月29日