一種用于抗原抗體反應體外診斷試劑的熱穩(wěn)定劑的制作方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及體外診斷領域或生物技術領域，用于提高抗原抗體反應體外診斷試劑 熱穩(wěn)定性。
【背景技術】
[0002] 免疫檢測是目前醫(yī)療衛(wèi)生和生物科學研宄領域常用的診斷方法。免疫檢測的核心 步驟為抗原-抗體間特異性的復合反應，通過復合反應產生檢測信號，實現對溶液中抗體 或抗原性的定量。由于抗體分子能夠識別非常有限的分子種類，因此免疫檢測能夠獲得極 高的準確性。
[0003] 目前關于抗原抗體反應的體外診斷試劑的穩(wěn)定性的報道都是針對2-10度保存條 件下的長期穩(wěn)定性來評價穩(wěn)定性。專利CN200610025351，CN101893619A等提到的改進膠乳 結合的抗原或抗體粒子穩(wěn)定性的方法僅僅從4度保存條件下來評價穩(wěn)定性；抗原抗體反應 的體外診斷試劑不僅僅包括膠乳增強的粒子方法的試劑，也包括普通的免疫比濁法試劑， 這些試劑的共同特點抗原或抗體在溶液中低溫如2-8度會發(fā)生緩慢的沉淀、結構卷曲或變 構，導致抗原抗體反應失真，影響測定。特別在高于10度以上的環(huán)境或溶液環(huán)境不佳（比 如膠乳試劑中緩沖液pH不適合，造成抗體脫落，BSA濃度過高，表面活性劑濃度太高等置換 出交聯(lián)的抗體），抗原或抗體在溶液中布朗運動加強，會導致反應靈敏度急劇下降，這種下 降是不可逆的，從而使得試劑失效。另外試劑盒在使用和實際運輸環(huán)節(jié)不可能完全保證在4 度的環(huán)境中進行。因此研宄一種能夠提高抗原抗體體外診斷試劑熱穩(wěn)定性方法非常必要。

【發(fā)明內容】

[0004] 本發(fā)明主要解決的技術問題是提供一種用于抗原抗體反應體外診斷試劑的熱穩(wěn) 定劑，提高抗原抗體體外診斷試劑的熱穩(wěn)定性。
[0005] 為了解決上述技術問題，本發(fā)明提供了一種用于抗原抗體反應體外診斷試劑的熱 穩(wěn)定劑，其特征在于，包含表面活性劑、封閉劑、防腐劑、緩沖液、穩(wěn)定劑和無機鹽。
[0006] 優(yōu)選地，所述的表面活性劑為非離子表面活性劑。
[0007] 更優(yōu)選地，所述的非離子表面活性劑為B66,每IL抗原抗體反應體外診斷試劑加 入非離子表面活性劑〇. 5-3ml。
[0008] 優(yōu)選地，所述的封閉劑為多聚賴氨酸，每IL抗原抗體反應體外診斷試劑加入封閉 劑的量為2-5g。
[0009] 優(yōu)選地，所述的防腐劑為PC300,每IL抗原抗體反應體外診斷試劑加入防腐劑的 量為l_5ml。
[0010] 優(yōu)選地，所述的緩沖液為MES緩沖液，每IL抗原抗體反應體外診斷試劑加入緩沖 液的量為20-50mmol。
[0011] 優(yōu)選地，所述的穩(wěn)定劑為蔗糖，每IL抗原抗體反應體外診斷試劑加入穩(wěn)定劑的量 為 5-10g。
[0012] 優(yōu)選地，所述的無機鹽為氯化鈉，每IL抗原抗體反應體外診斷試劑加入無機鹽的 量為 50-100mmol。
[0013] 優(yōu)選地，所述的抗原抗體反應體外診斷試劑為胱抑素 C測定試劑、脂蛋白（a)測定 試劑、β 2-微球蛋白測定試劑或前白蛋白測定試劑。
[0014] 與現有技術相比，本發(fā)明的有益效果是：
[0015] 本發(fā)明可有效改善抗原抗體反應體外診斷試劑的熱穩(wěn)定性，可有效延長試劑盒的 保存時間。
【具體實施方式】
[0016] 下面結合具體實施例，進一步闡述本發(fā)明。應理解，這些實施例僅用于說明本發(fā)明 而不用于限制本發(fā)明的范圍。此外應理解，在閱讀了本發(fā)明講授的內容之后，本領域技術人 員可以對本發(fā)明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附權利要求書所限定 的范圍。
[0017] 實施例
[0018] 一種用于抗原抗體反應體外診斷試劑的熱穩(wěn)定劑，包含表面活性劑、封閉劑、防腐 劑、緩沖液、穩(wěn)定劑和無機鹽。所述的表面活性劑為Emu I gen Β66，所述的封閉劑為多聚賴氨 酸，所述的防腐劑為PC300,所述的緩沖液為MES緩沖液，該緩沖液為AMRESC0公司生產，溶 液的PH為6. 0 (25°C )，所述的穩(wěn)定劑為蔗糖，所述的無機鹽為氯化鈉。
[0019] 按照常規(guī)方法制備胱抑素 C測定試劑、脂蛋白（a)測定試劑、β 2-微球蛋白測定 試劑和前白蛋白測定試劑，各試劑組成如下：
[0020] 胱抑素 C測定試劑組成：
[0021] Rl ：
[0022] Tris :50mmol/L
[0023] 氯化鈉 ：50mmol/L
[0024] PEG2000 ：5g/L
[0025] R2 ：
[0026] 甘氨酸：10mmol/L
[0027] 羊抗人胱抑素 C抗體致敏膠乳：IOml/L
[0028] 脂蛋白（a)測定試劑組成
[0029] Rl ：
[0030] Tris :50mmol/L
[0031] 氯化鈉：40mmol/L
[0032] PEG6000 ：5g/L
[0033] R2 ：
[0034] 甘氨酸：10mmol/L
[0035] 鼠抗人脂蛋白（a)抗體致敏膠乳：20ml/L
[0036] β 2-微球蛋白測定試劑組成
[0037] Rl ：
[0038] Tris ：40mmol/L
[0039] 氯化鈉：3Ommol/L
[0040] PEG8000 ：5g/L
[0041] R2 ：
[0042] 甘氛酸：5mmol/L
[0043] 羊抗人β 2-微球蛋白抗體致敏膠乳：20ml/L
[0044] 前白蛋白測定試劑組成
[0045] Rl ：
[0046] Tris :50mmol/L
[0047] 氯化鈉：50mmol/L
[0048] PEG2000 ：5g/L
[0049] R2 ：
[0050] 甘氨酸：10mmol/L
[0051] 羊抗人前白蛋白抗體：100ml/L
[0052] 將表面活性劑、封閉劑、防腐劑、緩沖液、穩(wěn)定劑和無機鹽加入到上述的各抗原抗 體反應體外診斷試劑的R2試劑中混勻即可得到試驗試劑，每IL抗原抗體反應體外診斷試 劑的R2試劑加入非離子表面活性劑B661ml，每IL抗原抗體反應體外診斷試劑的R2試劑加 入封閉劑的量為5g。每IL抗原抗體反應體外診斷試劑的R2試劑加入防腐劑的量為lml。 每IL抗原抗體反應體外診斷試劑的R2試劑加入緩沖液的量為20mmol。每IL抗原抗體反 應體外診斷試劑的R2試劑加入穩(wěn)定劑的量為5g。每IL抗原抗體反應體外診斷試劑的R2 試劑加入無機鹽的量為50mmol。取未加入上述熱穩(wěn)定劑的各抗原抗體反應體外診斷試劑作 為對照試劑。
[0053] 將以上試驗試劑和對照試劑分別在2_8°C、20°C、37°C三個溫度下放置5天后測定 各試劑靈敏度、觀察試劑的外觀，以下是實驗結果：
[0054] 胱抑素 C測定試劑（試驗試劑）
[0055]
【主權項】
1. 一種用于抗原抗體反應體外診斷試劑的熱穩(wěn)定劑，其特征在于，包含表面活性劑、封 閉劑、防腐劑、緩沖液、穩(wěn)定劑和無機鹽。
2. 如權利要求1所述的用于抗原抗體反應體外診斷試劑的熱穩(wěn)定劑，其特征在于，所 述的表面活性劑為非離子表面活性劑。
3. 如權利要求2所述的用于抗原抗體反應體外診斷試劑的熱穩(wěn)定劑，其特征在于，所 述的非離子表面活性劑為B66,每IL抗原抗體反應體外診斷試劑加入非離子表面活性劑 0? 5_3ml 〇
4. 如權利要求1所述的用于抗原抗體反應體外診斷試劑的熱穩(wěn)定劑，其特征在于，所 述的封閉劑為多聚賴氨酸，每IL抗原抗體反應體外診斷試劑加入封閉劑的量為2-5g。
5. 如權利要求1所述的用于抗原抗體反應體外診斷試劑的熱穩(wěn)定劑，其特征在于，所 述的防腐劑為PC300,每IL抗原抗體反應體外診斷試劑加入防腐劑的量為l-5ml。
6. 如權利要求1所述的用于抗原抗體反應體外診斷試劑的熱穩(wěn)定劑，其特征在于，所 述的緩沖液為MES緩沖液，每IL抗原抗體反應體外診斷試劑加入緩沖液的量為20-50mmol。
7. 如權利要求1所述的用于抗原抗體反應體外診斷試劑的熱穩(wěn)定劑，其特征在于，所 述的穩(wěn)定劑為鹿糖，每IL抗原抗體反應體外診斷試劑加入穩(wěn)定劑的量為5-10g。
8. 如權利要求1所述的用于抗原抗體反應體外診斷試劑的熱穩(wěn)定劑，其特征在于，所 述的無機鹽為氯化鈉，每IL抗原抗體反應體外診斷試劑加入無機鹽的量為50-100_〇1。
9. 如權利要求1所述的用于抗原抗體反應體外診斷試劑的熱穩(wěn)定劑，其特征在于，所 述的抗原抗體反應體外診斷試劑為胱抑素C測定試劑、脂蛋白a測定試劑、0 2-微球蛋白 測定試劑或前白蛋白測定試劑。
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種用于抗原抗體反應體外診斷試劑的熱穩(wěn)定劑，其特征在于，包含表面活性劑、封閉劑、防腐劑、緩沖液、穩(wěn)定劑和無機鹽。本發(fā)明可有效改善抗原抗體反應體外診斷試劑的熱穩(wěn)定性，可有效延長試劑盒的保存時間。
【IPC分類】G01N33-53
【公開號】CN104807990
【申請?zhí)枴緾N201510239329
【發(fā)明人】孫先勝
【申請人】駿實生物科技(上海)有限公司
【公開日】2015年7月29日
【申請日】2015年5月12日