一種苦參藥材中苦參堿和氧化苦參堿的薄層色譜鑒別法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及到中藥材鑒別技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及用一種改進(jìn)的薄層色譜鑒別法同時快速準(zhǔn)確對苦參藥材中兩種特征成分苦參堿和氧化苦參堿進(jìn)行鑒別的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]苦參為常用中藥，來源于豆科植物苦參Sop hor a f lavesens Ait.的干燥根，具清熱燥濕，殺蟲功效，主要含生物堿成分，其中苦參堿(matrine)為其有主要有效成分之一，具有抗腫瘤，平喘和抑菌作用；氧化苦參堿具有抗腫瘤，平喘等作用。因此鑒定苦參藥材中苦參堿、氧化苦參堿是苦參藥材質(zhì)量控制的方法的關(guān)鍵。
[0003]2010版《中華人民共和國藥典一部》對苦參中苦參堿和氧化苦參堿的薄層色譜鑒別，樣品處理方法為:苦參藥材粉末0.5g，加濃氨試液0.3ml，三氯甲烷25ml，放置過夜，過濾，濾液蒸干，殘?jiān)尤燃淄?.5ml使溶解；所用展開板為2%氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板；展開劑以甲苯一丙酮一甲醇(8:3:0.5)與甲苯一乙酸乙酯一甲醇一水(2:4:2:1) 10C以下放置的上層溶液進(jìn)行2次展開，顯色劑為依次噴以碘化鉍鉀試液和亞硝酸鈉乙醇試液。此法操作過程過于繁瑣，費(fèi)時，尤其是色譜結(jié)果不理想；用該法制備的薄層板，粘著力較差，有鼓包脫板現(xiàn)象，且雙相展開劑二次展開操作較麻煩，拖尾現(xiàn)象嚴(yán)重；以碘化鉍鉀試液作為顯色劑，顯色快，但顯現(xiàn)的斑點(diǎn)消失太快，不利于保持影像資料。此外，由于薄層色譜鑒別長時間測定結(jié)果存在偏差以及顯色不明顯等缺陷而實(shí)際應(yīng)用效果不佳。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明通過對苦參中苦參堿和氧化苦參堿鑒別方法的探索改變，提供了一種較為精確、快速、簡便、無測定偏差以及顯色持久明顯的效果改進(jìn)的苦參藥材中苦參堿和氧化苦參堿的薄層色譜法。
[0005]為達(dá)到上述目的，改進(jìn)的苦參藥材中苦參堿和氧化苦參堿的薄層色譜鑒別法主要包括以下步驟:
[0006](I)取苦參堿對照品和氧化苦參堿對照品，分別加入乙醇，制成每ImL乙醇含0.2?0.3mg苦參堿對照品或氧化苦參堿對照品的溶液，分別作為苦參堿對照品溶液和氧化苦參堿對照品溶液；
[0007](2)取苦參藥材超微粉粉末0.3?0.5g，加0.25?0.3mL濃氨水和20?25mL三氯甲烷的混合溶液，250W超聲15?25min，過濾，濾液水浴上蒸干，殘?jiān)右掖?.4?0.5mL使溶解，作為供試品溶液；
[0008](3)吸取苦參堿對照品溶液和供試品溶液各3?4uL，依次點(diǎn)樣于同一硅膠H薄層板同一水平線的不同位置，以氯仿-甲醇-濃氨-甲苯試液為展開劑，四者的質(zhì)量比為
5.5?6.5:0.6?0.7:0.5?0.6:0.5?0.8，展距為10?15cm，取出，晾干；所述11薄層色譜板在制備時摻有質(zhì)量百分比為3?8%的十八烷基硅烷鍵合劑作為固色劑；
[0009](4)分別吸取氧化苦參堿對照品溶液和供試品溶液各3?4uL，依次點(diǎn)樣于同一硅膠G薄層板同一水平線的不同位置，以氯仿-乙醇-濃氨-乙酸乙酯試液為展開劑，四者的質(zhì)量比為5.0?5.5:0.2?0.4:0.5?0.6:1.0?1.5，展距為10?15cm，取出，晾干；所述G薄層色譜板在制備時摻有質(zhì)量百分比為2?6%的十八烷基硅烷鍵合劑作為固色劑；
[0010](5)以碘化鉍鉀試液和質(zhì)量濃度為0.5?0.6mol/L的鹽酸按照體積比為1:3?5的混合試液作顯色劑顯色；白光下，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，當(dāng)顯相同顏色的斑點(diǎn)則為合格苦參藥材超微粉。
[0011]進(jìn)一步地，步驟(I)中制成每ImL乙醇含0.25?0.28mg苦參堿對照品或氧化苦參堿對照品的溶液。
[0012]進(jìn)一步地，步驟(2)中供試品溶液的制備方法為取苦參藥材超微粉粉末0.4?0.5g，加0.3mL濃氨和25mL三氯甲烷的混合溶液，250W超聲20?25min，過濾，濾液水浴上蒸干，殘?jiān)右掖?.5mL使溶解，作為供試品溶液。
[0013]進(jìn)一步地，步驟(3)中以氯仿-甲醇-濃氨-甲苯試液為展開劑，四者的質(zhì)量比為6.0 ?6.5:0.6 ?0.7:0.55:0.7 ?0.8。
[0014]進(jìn)一步地，步驟(4)中以氯仿-乙醇-濃氨-乙酸乙酯試液為展開劑，四者的質(zhì)量比為 5.5:0.3 ?0.4:0.5 ?0.6:1.2 ?1.5。
[0015]進(jìn)一步地，步驟(5)中以碘化鉍鉀試液和質(zhì)量濃度為0.6mol/L的鹽酸按照體積比為1:3的混合試液作顯色劑顯色。
[0016]本發(fā)明以改良的碘化鉍鉀試液作為顯色試劑，顯色時間短且保留時間長，斑點(diǎn)清晰，重復(fù)性，穩(wěn)定性好。再者，本發(fā)明通過對苦參堿對照品、氧化苦參堿對照品不同特性的研宄，分別開發(fā)了不同的展開體系，從而得到展開效果精確、無拖尾、有針對性的鑒別方法。此夕卜，薄層色譜板在制備時，通過多項(xiàng)研發(fā)，開發(fā)了摻有質(zhì)量百分比為2?6 %的十八烷基硅烷鍵合劑作為固色劑，從而避免了薄層色譜顯色不夠持久的缺陷。
[0017]經(jīng)系統(tǒng)適用性考察證實(shí)，本發(fā)明方法具有良好的重復(fù)性和顯色穩(wěn)定性，能夠良好地適用于苦參的薄層色譜鑒別。
【附圖說明】
[0018]圖1為采用2010年版中國藥典規(guī)定方法鑒別苦參中苦參堿和氧化苦參堿薄層色譜圖，其中第I個斑點(diǎn)為氧化苦參堿對照品，第2個斑點(diǎn)為苦參堿對照品，第3個斑點(diǎn)為苦參供試品。
[0019]圖2為采用本發(fā)明改進(jìn)方法鑒別苦參中苦參堿和氧化苦參堿的薄層色譜圖。
[0020]圖3為采用改進(jìn)方法鑒別苦參中苦參堿和氧化苦參堿的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
【具體實(shí)施方式】
[0021]下面結(jié)合實(shí)施例和附圖對本發(fā)明作進(jìn)一步的說明。
[0022]實(shí)施例1
[0023](I)取苦參堿對照品和氧化苦參堿對照品，分別加入乙醇，制成每ImL乙醇含0.2?0.3mg苦參堿對照品或氧化苦參堿對照品的溶液，分別作為苦參堿對照品溶液和氧化苦參堿對照品溶液；
[0024](2)取苦參藥材超微粉粉末0.3?0.5g，加0.25?0.3mL濃氨水和20?25mL三氯甲烷的混合溶液，250W超聲15?25min，過濾，濾液水浴上蒸干，殘?jiān)右掖?.4?0.5mL使溶解，作為供試品溶液；
[0025](3)吸取苦參堿對照品溶液和供試品溶液各3?4uL，依次點(diǎn)樣于同一硅膠H薄層板同一水平線的不同位置，以氯仿-甲醇-濃氨-甲苯試液為展開劑，四者的質(zhì)量比為
6.0?6.5:0.6?0.7:0.55:0.7?0.8，展距為10?15cm，取出，晾干；所述H薄層色譜板在制備時摻有質(zhì)量百分比為3?8%的十八烷基硅烷鍵合劑作為固色劑；
[0026](4)分別吸取氧化苦參堿對照品溶液和供試品溶液各3?4uL，依次點(diǎn)樣于同一硅膠G薄層板同一水平線的不同位置，以氯仿-乙醇-濃氨-乙酸乙酯試液為展開劑，四者的質(zhì)量比為5.5:0.3?0.4:0.5