能同時(shí)檢測(cè)醬香型白酒中6種人工合成甜味劑的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明專利設(shè)及一種能同時(shí)檢測(cè)醬香型白酒中6種人工合成甜味劑的方法，屬于 人工合成甜味劑的檢測(cè)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 白酒是我國(guó)的傳統(tǒng)消費(fèi)品，歷史悠久，源遠(yuǎn)流長(zhǎng)，具有龐大的消費(fèi)群體。貴州素有 酒鄉(xiāng)之稱，白酒的發(fā)展在貴州經(jīng)濟(jì)中占有重要的位置。釀酒工業(yè)，特別是發(fā)展白酒工業(yè)，對(duì) 促進(jìn)貴州經(jīng)濟(jì)的發(fā)展具有舉足輕重的地位和作用。
[0003] 甜味劑是一類重要的食品添加劑，但近幾年有研究發(fā)現(xiàn)糖精鋼、甜蜜素等一些人 工甜味劑具有潛在致癌、致崎、損害腎功能的副作用。隨著食品毒理學(xué)研究的不斷發(fā)展，對(duì) 食品添加劑提出更加嚴(yán)格的衛(wèi)生要求。國(guó)家強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)GB2760-2011《食品添加劑使用衛(wèi) 生標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定了白酒中嚴(yán)禁添加任何的甜味劑。當(dāng)前，在酒類產(chǎn)品生產(chǎn)中，對(duì)甜味劑的使用 也存在不少問(wèn)題，如；1、在發(fā)酵酒中違法添加非自生發(fā)酵產(chǎn)物，如糖精鋼、甜蜜素等甜味劑； 2、各企業(yè)原材料進(jìn)貨檢驗(yàn)把關(guān)不嚴(yán)，造成白酒中被動(dòng)添加人工甜味劑的問(wèn)題十分突出。
[0004] 因此，人工甜味劑在生產(chǎn)中的合法使用，不僅關(guān)系到產(chǎn)品的品質(zhì)，更關(guān)系到消費(fèi)者 的安全與健康。目前針對(duì)白酒中甜味劑檢測(cè)方法較多，最普遍的是液相色譜-紫外檢測(cè)法， 另外還有離子色譜法、液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測(cè)法。上述幾種方法主要是針對(duì)單一甜味 劑或者對(duì)兩種甜味劑進(jìn)行測(cè)定，檢測(cè)靈敏度也有待提高，而且由于甜蜜素與=氯庶糖的紫 外吸收較弱，不適宜使用紫外檢測(cè)器，使得多種甜味劑同時(shí)檢測(cè)受到限制。也有利用液相色 譜-飛行時(shí)間質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)多種甜味劑的報(bào)道，但飛行時(shí)間質(zhì)譜屬于高分辨質(zhì)譜，造價(jià)高 昂，不宜在我國(guó)普遍推廣。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是，提供一種效率高、省時(shí)、高效的能同時(shí)檢測(cè)醬香型白 酒中6種人工合成甜味劑的方法，可W克服現(xiàn)有技術(shù)的不足。
[0006] 本發(fā)明的技術(shù)方案是：能同時(shí)檢測(cè)醬香型白酒中6種人工合成甜味劑的方法包括 W下步驟： a、 取標(biāo)準(zhǔn)品甜蜜素、糖精鋼、安塞蜜、阿斯己甜、S氯庶糖和紐甜分別配制成1.OOmg/ml 的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，于-4°C冰箱中儲(chǔ)存?zhèn)溆茫?b、 將步驟a中的6類標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液分別取于容量瓶，用空白稀釋液配制成5(K)ng/ml，200 ng/ml，100ng/ml，50ng/ml，20ng/ml，10ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液，過(guò) 0. 45]im濾膜，待上機(jī)； C、在b步驟基礎(chǔ)上，采用Ci8柱分離，W0. 1%甲酸水溶液-甲醇為流動(dòng)相，梯度洗脫，W保留時(shí)間和質(zhì)荷比對(duì)分離出的組分進(jìn)行定性，用峰面積進(jìn)行定量得到6種甜味劑的回歸方 程及相關(guān)系數(shù)；并將回歸方程及相關(guān)系數(shù)輸入計(jì)算機(jī)； d、分別取釀酒原料、大曲和成品酒10.OOg，純水稀釋定容至100ml，禍旋提取后，靜置 后取清液過(guò)0. 45ym濾膜，待分析； e、取d步驟中待分析檢測(cè)樣品，采用Ci8柱分離，W0. 1%甲酸水溶液-甲醇為流動(dòng)相， 梯度洗脫，W保留時(shí)間和質(zhì)荷比對(duì)分離出的組分進(jìn)行定性，用峰面積進(jìn)行定量得出步驟d 樣品中的安賽蜜、糖精鋼、甜蜜素、阿斯己甜、紐甜及S氯庶糖的數(shù)值。
[0007] 上述的能檢測(cè)醬香型型白酒中6種人工合成甜味劑的方法是，步驟C和步驟e中 的監(jiān)測(cè)分析分為S段進(jìn)行，分別為0-2. 30分鐘、2. 31-3. 30分鐘、3. 31-4. 5分鐘。
[000引與現(xiàn)有技術(shù)比較，本發(fā)明建立了醬香型白酒中安賽蜜、糖精鋼、甜蜜素、阿斯己甜、 紐甜及=氯庶糖6種人工合成甜味劑的高效液相串聯(lián)質(zhì)譜同時(shí)檢測(cè)的方法。該方法快速、 高效、準(zhǔn)確，可同時(shí)測(cè)定6種甜味劑，檢測(cè)限10yg/kg，能夠在4. 5min內(nèi)完成樣品的分析。 白酒樣品只需直接稀釋，即可進(jìn)樣檢測(cè)，前處理簡(jiǎn)單。該方法便于廣大白酒企業(yè)對(duì)原材料把 關(guān)和成品檢驗(yàn)，W及監(jiān)管部口抽查時(shí)使用。
【具體實(shí)施方式】
[0009] 實(shí)施例，1實(shí)驗(yàn)部分 1.1試劑與儀器 超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀（WaterS公司UPLC高效液相色譜儀串聯(lián)Quattro PremierXE質(zhì)譜儀）；縱禍振蕩器（IKA); 甲酸，甲醇，己膳均為色譜純，己酸錠(分析純)，超純水； 空白稀釋液；考慮到白酒中己醇濃度較高，配置標(biāo)準(zhǔn)溶液時(shí)取空白樣品50.OOg于 500ml容量瓶中，用純水稀釋至刻度作為標(biāo)準(zhǔn)稀釋液，W降低樣品的的基質(zhì)效應(yīng)。
[0010] 標(biāo)準(zhǔn)品；甜蜜素（sodium巧clamate)，糖精鋼（sodiumsaccharim)，購(gòu) 于SUPEILCO;安塞蜜（potassiumacesulfame)，阿斯己甜（aspartame)，S氯庶糖 (sucralose)，購(gòu)于DrE虹enstorferGmbH;紐甜（neotame)，購(gòu)于USP。將上述標(biāo)準(zhǔn)品分別 配制成1.OOmg/ml(少量水溶解，甲醇定容）的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液于-4°C冰箱中儲(chǔ)存?zhèn)溆谩?br>[0011] 標(biāo)準(zhǔn)混合液；分別吸取標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液于容量瓶，用空白稀釋液配制成5(K)ng/ml，200 ng/ml，100ng/ml，50ng/ml，20ng/ml，10ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液，過(guò) 0. 45]im濾膜，待上機(jī)。
[0012] 儀器參數(shù)條件： 液相條件： 色譜柱：B邸。8，100X2.Imm, 1.7ym進(jìn)樣量；l〇.OOyL 流動(dòng)相；A; 0. 1%甲酸水溶液B;甲醇 柱溫；35 + 1。C 洗脫方式：梯度洗脫，見(jiàn)表1 表1梯度洗脫
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種能同時(shí)檢測(cè)醬香型白酒中6種人工合成甜味劑的方法，其特征在于：該方法包 括以下步驟： a、 取標(biāo)準(zhǔn)品甜蜜素、糖精鈉、安塞蜜、阿斯巴甜、三氯蔗糖和紐甜分別配制成1.0 Omg/ml 的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，于-4°C冰箱中儲(chǔ)存?zhèn)溆茫? b、 將步驟a中的6類標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液分別取于容量瓶，用空白稀釋液配制成500ng/ml，200 ng/ml，100 ng/ml，50 ng/ml，20 ng/ml，10 ng/ml 的標(biāo)準(zhǔn)溶液，過(guò) 0.45ym 濾膜，待上機(jī)； c、 在b步驟基礎(chǔ)上，采用C18柱分離，以0. 1%甲酸水溶液-甲醇為流動(dòng)相，梯度洗脫，以 保留時(shí)間和質(zhì)荷比對(duì)分離出的組分進(jìn)行定性，用峰面積進(jìn)行定量得到6種甜味劑的回歸方 程及相關(guān)系數(shù)；并將回歸方程及相關(guān)系數(shù)輸入計(jì)算機(jī)； d、 分別取釀酒原料、大曲和成品酒10. 00g，純水稀釋定容至100ml，渦旋提取后，靜置 后取清液過(guò)0. 45 y m濾膜，待分析； e、 取d步驟中待分析檢測(cè)樣品，采用C18柱分離，以0. 1%甲酸水溶液-甲醇為流動(dòng)相， 梯度洗脫，以保留時(shí)間和質(zhì)荷比對(duì)分離出的組分進(jìn)行定性，用峰面積進(jìn)行定量得出步驟d 樣品中的安賽蜜、糖精鈉、甜蜜素、阿斯巴甜、紐甜及三氯蔗糖的數(shù)值。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的能同時(shí)檢測(cè)醬香型白酒中6種人工合成甜味劑的方法，其特 征在于：步驟c和步驟e中的監(jiān)測(cè)分析分為三段進(jìn)行，分別為0-2. 30分鐘、2. 31-3. 30分鐘、 3. 30-4. 5 分鐘。
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種能同時(shí)檢測(cè)醬香型白酒中6種人工合成甜味劑的方法，它是將樣品直接稀釋，過(guò)0.45μm濾膜上機(jī)分析。采用C18柱分離，以0.1%甲酸水溶液-甲醇為流動(dòng)相，梯度洗脫，以保留時(shí)間和質(zhì)荷比對(duì)分離出的組分進(jìn)行定性，用峰面積進(jìn)行定量。結(jié)果表明，6種甜味劑的質(zhì)量濃度與其峰面積在一定范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系，10-200ng/ml范圍內(nèi)相關(guān)系數(shù)為0.9915-0.9943，20-500ng/ml范圍內(nèi)相關(guān)系數(shù)為0.9961-0.9983，檢出限均為10μg/kg，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差2.1%-7.9%。
【IPC分類】G01N30-02
【公開(kāi)號(hào)】CN104880516
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510153612
【發(fā)明人】余磊, 朱明 , 張桂玲, 曾加, 趙杰, 嚴(yán)學(xué)芬, 楊秀群
【申請(qǐng)人】貴陽(yáng)學(xué)院
【公開(kāi)日】2015年9月2日
【申請(qǐng)日】2015年4月2日