一種基于成分分析的花椒粉質(zhì)量檢測(cè)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于調(diào)味品質(zhì)量檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種基于成分分析的花椒粉質(zhì)量檢測(cè) 方法，具體是指采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀檢測(cè)花椒粉中的芳樟醇、乙酸芳樟酯、乙位石竹 烯和甲位石竹烯含量的質(zhì)量檢測(cè)方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 近年來(lái)，在我國(guó)食品安全領(lǐng)域中，各類(lèi)摻假和假冒食品事件頻發(fā)。人們物質(zhì)生活 水平日益提高，可是，餐桌上佳肴的色香味卻大打折扣，花椒不麻，辣椒不辣，香油不香。作 為食品生產(chǎn)原料調(diào)味粉摻假屢見(jiàn)不鮮，造假的一般做法是在食品中摻入價(jià)格較低的其他物 質(zhì)，其中大部分是危害人體健康的非食用物質(zhì)，而消費(fèi)者通常很難辨識(shí)這些食品。
[0003] 花椒是蕓香科花椒屬植物，花椒或青花椒的成熟干燥果皮，在我國(guó)大部分地區(qū)均 有生產(chǎn)。具有溫中止痛、殺蟲(chóng)止癢的功效，除此以外還可以作為重要的調(diào)味品，香料，具有營(yíng) 養(yǎng)功能?；ń贩凼且曰ń窞樵辖?jīng)磨碎、篩選、包裝制成的單一花椒粉產(chǎn)品。以花椒為原 料生產(chǎn)的花椒粉是一種優(yōu)質(zhì)的調(diào)味品原料，也是調(diào)味品生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)用量很多的調(diào)味品原料 之一，但是目前對(duì)花椒粉的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，一般只是針對(duì)花椒粉的理化及微生物作指標(biāo)，簡(jiǎn)單的 靠肉眼觀(guān)察和味覺(jué)識(shí)別不能準(zhǔn)確判斷其原料性質(zhì)，從而使在花椒粉加工品種摻假既容易進(jìn) 行，又有利可圖。
[0004] 氣相色譜質(zhì)譜（GC-MS)方法是一種快速、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、高效的分析檢測(cè)技術(shù)，已廣 泛用于植物中多種天然成分的分析，包括植物中的揮發(fā)油中的成分鑒定和含量檢測(cè)。揮發(fā) 油又稱(chēng)精油，是一類(lèi)植物源次生代謝物質(zhì)，是植物體內(nèi)分子量較小、可隨水蒸氣蒸出、具有 一定氣味的揮發(fā)性油狀液體物質(zhì)。
[0005] 花椒的香氣成分來(lái)自于其組織中所含的揮發(fā)油，花椒中揮發(fā)油的含量一般在 0. 9%，不同品種的花椒揮發(fā)油化學(xué)組成和含量差異較大，即使是同一品種，由于氣候、 產(chǎn)地等的影響，揮發(fā)油的含量及組成比例也不同?；ń返膿]發(fā)油中只含有揮發(fā)性的香味成 分，其麻辣成分不具有揮發(fā)性。陳孝泉在《植物化學(xué)分類(lèi)學(xué)》中提到：揮發(fā)油中主要組分為烯 烴類(lèi)和b-水芹烯、檸檬烯、b-蒎烯、a-蒎烯、b-羅勒烯等，這些物質(zhì)廣泛用于香料、食品工業(yè) 和藥物合成的重要中間體；還有烴類(lèi)的含氧化合物，包括醇類(lèi)如芳樟醇、萜品醇等，同類(lèi)如 胡椒酮、薄荷酮等，還有醛類(lèi)、酯類(lèi)及環(huán)氧化合物類(lèi)等，這些物質(zhì)在促進(jìn)人體荷爾蒙釋放，提 高甲狀腺素的滲透等方面起著重要作用。閻建輝通過(guò)GC-MS分析花椒的揮發(fā)油化學(xué)成分， 發(fā)現(xiàn)在已鑒定的組分中，烴類(lèi)化合物18種，占被測(cè)總量的24. 68%，其中石竹烯類(lèi)（a-石竹烯 1. 56%，b-石竹烯6. 88%)，組分中含量最多的是萜品醇類(lèi)化合物，其中b-里哪醇(芳樟醇)含 量0. 96%。吳素蕊通過(guò)同時(shí)蒸餾萃取法提取花椒中的精油，并將提取的精油進(jìn)行GC-MS分 析，研宄了花椒的香氣組成及特點(diǎn)，發(fā)現(xiàn)在花椒香氣中各物質(zhì)的貢獻(xiàn)由大到小排列為芳樟 醇、檜稀、b-月桂稀、a-薇稀、梓檬稀、a-芋酮、a-芋稀、4-松油醇、b-薇稀、香葉醇、a-異 松油烯、a-松油醇、橙花叔醇、乙酸芳樟醇、胡椒醇、b-苧酮。
[0006] 揮發(fā)油的提取方法主要包括傳統(tǒng)水蒸汽蒸餾法、溶劑萃取法、超臨界C02萃取法、 同時(shí)蒸餾萃取法等，其中水蒸氣蒸餾法是最傳統(tǒng)的揮發(fā)油提取方法，具有操簡(jiǎn)便、成本低、 易于實(shí)現(xiàn)等特點(diǎn)，比較適合實(shí)驗(yàn)室樣品的操作。
[0007] 針對(duì)目前尚缺乏一套完整有效的花椒粉質(zhì)量檢測(cè)技術(shù)，因此，有必要研發(fā)一種簡(jiǎn) 單迅速、結(jié)果穩(wěn)定可靠的花椒粉質(zhì)量檢測(cè)方法以填補(bǔ)現(xiàn)有技術(shù)的空白。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 本發(fā)明的目的在于提供一種采用氣相色譜質(zhì)譜法對(duì)花椒粉中的芳樟醇、乙酸芳樟 酯、乙位石竹烯和甲位石竹烯含量進(jìn)行檢測(cè)，其可更快速、簡(jiǎn)便、靈活、準(zhǔn)確地檢測(cè)花椒粉的 品質(zhì)，可用于花椒粉企業(yè)質(zhì)量驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)。
[0009] 本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案以實(shí)現(xiàn)上述目的的，一種基于成分分析的花椒粉質(zhì)量 檢測(cè)方法，包括以下步驟： (1) 花椒提取液的制備：精密稱(chēng)取花椒粉樣品l〇g，置于燒瓶中，加入50mL 95%乙醇，加 熱回流3h，冷卻至室溫后，將溶液濾入棕色容量瓶中，用乙醇沖洗抽濾瓶和過(guò)濾器3次，洗 液一并濾入容量瓶中，并加乙醇至刻度，搖勻備用； (2) 內(nèi)標(biāo)溶液的制備：稱(chēng)取丙酸苯乙酯，配制丙酸苯乙酯的乙醇溶液，作為內(nèi)標(biāo)溶液，備 用； (3) 標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的配制：稱(chēng)取芳樟醇、乙酸芳樟酯、乙位石竹烯和甲位石竹烯，用內(nèi)標(biāo) 溶液溶解并定容到容量瓶中，作為標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，將標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液通過(guò)逐級(jí)稀釋配制含芳樟醇、 乙酸芳樟酯、乙位石竹烯和甲位石竹烯的系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液； (4) 樣品的處理：精密稱(chēng)取1. 5g步驟（1)制備的花椒提取液，加入步驟（2)制備的內(nèi)標(biāo) 溶液5. OmL，充分振蕩后靜置，過(guò)濾，作為待測(cè)樣； (5) 樣品的測(cè)定： 氣相色譜質(zhì)譜儀的色譜條件：使用非極性色譜柱，載氣為高純氦氣，柱流速為lmL/min 恒流，分流比1:1，進(jìn)樣量：1 U L，進(jìn)樣口溫度為250°C，程序升溫為柱初始溫度60°C，保持 2min，以3°C /min的速率升到150°C，保持lmin，然后以15°C /min的速率升到280°C，保持 4min ； 氣相色譜質(zhì)譜儀的質(zhì)譜條件：接口溫度為280°C，離子源溫度為250°C，四級(jí)桿溫度為 150°C，電離能量為70eV，溶劑延時(shí)3min，全掃描質(zhì)譜范圍為50~450amu，選擇離子監(jiān)測(cè)模 式； 取1 U L待測(cè)樣、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)以及待測(cè)樣添加標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，分別注入氣相色譜質(zhì)譜儀，丙 酸苯乙酯、芳樟醇、乙酸芳樟酯、乙位石竹烯和甲位石竹烯分別以m/z為105, 178 ;71，93 ; 80, 93, 121 ;93, 133 ;93, 121離子定量，使用內(nèi)標(biāo)法繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，試樣與標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)擬合，得 出試樣中芳樟醇、乙酸芳樟酯、乙位石竹烯和甲位石竹烯的含量。
[0010] 進(jìn)一步的，所述步驟（2)中的丙酸苯乙醋的濃度為100 y g/mL。
[0011] 進(jìn)一步的，所述步驟（3)中的系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的濃度分別為10 y g/mL、25 y g/ mL、50 y g/mL、100 y g/mL、150 y g/mL、250 y g/mL。
[0012] 進(jìn)一步的，所述步驟（4)中使用0. 45 ym的有機(jī)相過(guò)濾膜過(guò)濾。
[0013] 進(jìn)一步的，所述步驟（5)中的非極性色譜柱為HP-5MS。
[0014] 采用本發(fā)明于成分分析的花椒粉質(zhì)量檢測(cè)方法對(duì)10批次的花椒粉樣品進(jìn)行試 驗(yàn)，測(cè)定出花椒粉中的芳樟醇、乙酸芳樟酯、乙位石竹烯和甲位石竹烯含量范圍分別為 30. 81~37. 65mg/g，13. 76~16. 82mg/g，1. 58~1. 92mg/g，2. 07~2. 53mg/g。本發(fā)明方法中芳棒 醇回收率為102. 41%~103. 71%，平均值為103. 07% ;乙酸芳樟酯回收率為97. 48~102. 79%，平 均值為99. 46% ;乙位石竹烯回收率為86. 71%~91. 92%，平均值為89. 26% ;甲位石竹烯回收率 為 82. 50%~91. 05%，平均值為 85. 72%。
[0015] 因此，本發(fā)明的優(yōu)勢(shì)在于： 本發(fā)明基于成分分析的花椒粉質(zhì)量檢測(cè)方法是一種采用氣相色譜質(zhì)譜法對(duì)花椒粉中 的芳樟醇、乙酸芳樟酯和乙位石竹烯、甲位石竹烯標(biāo)進(jìn)行定量檢測(cè)的方法，具有較好的方法 重現(xiàn)性，準(zhǔn)確度高，可滿(mǎn)足實(shí)際工作中對(duì)花椒粉含量檢測(cè)的需要，同時(shí)本發(fā)明方法操作簡(jiǎn)單 迅速，結(jié)果穩(wěn)定可靠，適用于花椒粉的質(zhì)量控制工作中，尤其是用于花椒粉企業(yè)質(zhì)量驗(yàn)收標(biāo) 準(zhǔn)。
【附圖說(shuō)明】
[0016] 圖1 GC-MS S頂方法獲得的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)離子流圖，其中a-芳樟醇、b-乙酸芳樟酯、 c-丙酸苯乙酯、d-乙位石竹烯、e-甲位石竹烯。
[0017]圖2 GC-MS SM方法獲得的花椒提取液的離子流圖，其中a-芳樟醇、b-乙酸芳樟 酯、c-丙酸苯乙酯、d-乙位石竹烯、e-甲位石竹烯。
[0018] 圖3 GC-MS SIM方法獲得的花椒提取液及花椒提取液添加標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)后的離子流 圖，其中a-芳樟醇、b-乙酸芳樟酯、c-丙酸苯乙酯、d-乙位石竹烯、e-甲位石竹烯。
[0019] 圖4芳樟醇的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線(xiàn)。
[0020] 圖5乙酸芳樟酯的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線(xiàn)。
[0021] 圖6乙位石竹烯的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線(xiàn)。
[0022] 圖7甲位石竹烯的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線(xiàn)。
[0023] 具體實(shí)施方法 以下通過(guò)【具體實(shí)施方式】進(jìn)一步描述本發(fā)明，但本發(fā)明不僅僅限于以下實(shí)施例。在本發(fā) 明的范圍內(nèi)或者在不脫離本發(fā)明的內(nèi)容、精神和范圍內(nèi)，對(duì)本發(fā)明所述的花椒粉質(zhì)量檢測(cè) 方法進(jìn)行適當(dāng)改進(jìn)、替換功效相同的組分，對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員來(lái)說(shuō)是顯而易見(jiàn)的，它們都 被視為包括在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。
[0024] 實(shí)施例1、基于成分分析的花椒粉質(zhì)量檢測(cè)方法 1、實(shí)驗(yàn)試劑和儀器： 1. 1試劑：乙醇（分析純)、丙酸苯乙酯、芳樟醇