一種金屬元素全血質(zhì)控品的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種金屬元素全血質(zhì)控品的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]隨著金屬元素與人體健康關(guān)系的深入研宄，體內(nèi)金屬元素含量的準(zhǔn)確測定顯得越來越重要。質(zhì)控品是專門用于室內(nèi)質(zhì)控的、穩(wěn)定的、與待測樣品近似的材料，是保證準(zhǔn)確測定的重要基礎(chǔ)，因而對金屬元素相關(guān)質(zhì)控品的需求量也逐漸增大。
[0003]目前，金屬元素質(zhì)控品幾乎被國外進(jìn)口產(chǎn)品壟斷，產(chǎn)品價(jià)格昂貴。因此，研發(fā)穩(wěn)定性、均一性和基質(zhì)效應(yīng)都符合要求的金屬元素質(zhì)控品制備方法具有重要意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]為解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的問題，本發(fā)明提供一種金屬元素全血質(zhì)控品的制備方法，制備方法簡單，成本低，通過該方法，可以制得穩(wěn)定性、均一性和基質(zhì)效應(yīng)都符合要求的金屬元素全血質(zhì)控品，從而滿足臨床和日常檢測對金屬元素全血質(zhì)控品的需求。
[0005]本發(fā)明的目的將通過下面的詳細(xì)描述來進(jìn)一步體現(xiàn)和說明。
[0006]本發(fā)明提供一種金屬元素全血質(zhì)控品的制備方法，包括如下步驟:
A)收集牛全血；收集的牛全血無明顯溶血、黃疸、脂血或污染，也無其他傳染性指標(biāo)；
B)測定牛全血中金屬元素的濃度，所述金屬元素包括鎂、鐵、銅、鋅、鉛、錳和鈣；
C)結(jié)合牛全血中的本底值，根據(jù)各金屬元素的醫(yī)學(xué)決定水平濃度，加入金屬元素物質(zhì)，將牛全血中金屬元素的濃度調(diào)節(jié)至目標(biāo)濃度；
D)離心或過濾去除纖維沉淀物；
E)加入防腐劑，輕輕混勻，即得。
[0007]優(yōu)選地，所述步驟C)中，采用少量多次的方式加入金屬元素物質(zhì)，所述金屬元素物質(zhì)包括金屬元素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和/或金屬鹽。采用少量多次的方式加入，避免加入大量的金屬元素與血液的快速凝集反應(yīng)。采用市售金屬元素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)作為金屬元素物質(zhì)將牛全血中金屬元素的濃度調(diào)節(jié)至目標(biāo)濃度時(shí)，根據(jù)產(chǎn)品說明書計(jì)算后直接添加即可。
[0008]鎂單元素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)購自中國計(jì)量科學(xué)研宄院，貨號為GBW (E) 080126 ;鐵單元素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)購自中國計(jì)量科學(xué)研宄院，貨號為GBW 08616 ;銅單元素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)購自中國計(jì)量科學(xué)研宄院，貨號為GBW 08615 ;鋅單元素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)購自中國計(jì)量科學(xué)研宄院，貨號為GBW08620 ;鉛單元素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)購自中國計(jì)量科學(xué)研宄院，貨號為GBW 08619 ;錳單元素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)購自中國計(jì)量科學(xué)研宄院，貨號為GBW (E) 080157 ;鈣單元素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)購自中國計(jì)量科學(xué)研宄院，貨號為GBff (E) 080118。
[0009]優(yōu)選地，所述金屬鹽需用小于牛全血體積的1%的超純水溶解。
[0010]優(yōu)選地，所述金屬元素物質(zhì)包括硝酸鎂、氯化鐵、銅單元素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、鋅單元素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、鉛單元素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、錳單元素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和鈣單元素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。
[0011]優(yōu)選地，本發(fā)明提供的制備方法包括如下步驟: A)收集牛全血；
B)測定牛全血中金屬元素的濃度；測定方法可以采用現(xiàn)有常規(guī)檢測方法，如原子吸收光譜法(AAS)和/或電感耦合等離子體質(zhì)譜法(ICP-MS)；
C)加入金屬元素物質(zhì)，輕輕混勻，采用潔凈紗布進(jìn)行過濾，將牛全血中金屬元素的濃度調(diào)節(jié)至目標(biāo)濃度；
D)離心或過濾去除纖維沉淀物；
E)加入防腐劑，輕輕混勻，即得。
[0012]通過加入金屬元素物質(zhì)，可以將金屬元素的濃度調(diào)節(jié)至目標(biāo)濃度。加入的金屬元素可能與牛全血中的蛋白質(zhì)結(jié)合形成不溶性金屬鹽沉淀，因此需要除去沉淀并根據(jù)檢測結(jié)果繼續(xù)少量多次的添加金屬元素物質(zhì)。為了除去沉淀，本發(fā)明人首先想到了離心的方式，但通過不同離心條件的嘗試仍無法實(shí)現(xiàn)沉淀的有效分離，而不影響其他成分。本發(fā)明人經(jīng)過大量試驗(yàn)探索發(fā)現(xiàn):使用潔凈紗布過濾的方法可解決該問題，方便快捷，而且不影響其他成分。
[0013]優(yōu)選地，所述潔凈紗布為潔凈無菌密孔紗布。
[0014]優(yōu)選地，所述防腐劑采用Proclin 300防腐劑，加入量為牛全血體積的0.02-0.05%。
[0015]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是:本發(fā)明提供的制備方法簡單，成本低，通過該方法，可以制得穩(wěn)定性、均一性和基質(zhì)效應(yīng)都符合要求的金屬元素全血質(zhì)控品，從而滿足臨床和日常檢測對金屬元素全血質(zhì)控品的需求。采用本發(fā)明提供的制備方法制得的金屬元素全血質(zhì)控品在_20°C的條件下可保存18個(gè)月以上，在2~8°C的條件下可保存2周以上，從-20°C條件取出常溫復(fù)溶后的均一性、穩(wěn)定性、基質(zhì)效應(yīng)都能符合質(zhì)控品要求。
【附圖說明】
[0016]圖1為鐵兀素基質(zhì)效應(yīng)檢測結(jié)果不意圖。
【具體實(shí)施方式】
[0017]下面通過具體實(shí)施例對本發(fā)明做進(jìn)一步的詳細(xì)說明。
[0018]實(shí)施例一金屬元素全血質(zhì)控品的制備
收集牛全血，測定牛全血中金屬元素的濃度，所述金屬元素包括鎂、鐵、銅、鋅、鉛、錳和鈣；根據(jù)檢測結(jié)果，加入硝酸鎂、氯化鐵、銅單元素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、鋅單元素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、鉛單元素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、錳單元素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和鈣單元素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，將牛全血中金屬元素的濃度調(diào)節(jié)至目標(biāo)濃度；離心去除纖維沉淀物；加入Proclin 300防腐劑，加入量為牛全血體積的0.03%，輕輕混勻，即得。
[0019]實(shí)施例二金屬元素全血質(zhì)控品的制備
收集牛全血，測定牛全血中金屬元素的濃度，所述金屬元素包括鎂、鐵、銅、鋅、鉛、錳和鈣；根據(jù)檢測結(jié)果，加入鎂單元素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、氯化鐵、銅單元素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、鋅單元素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、鉛單元素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、錳單元素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和鈣單元素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，將牛全血中金屬元素的濃度調(diào)節(jié)至目標(biāo)濃度；過濾去除纖維沉淀物；加入Proclin 300防腐劑，加入量為牛全血體積的0.02%，輕輕混勻，即得。
[0020]實(shí)施例三金屬元素的空白本底檢測
取實(shí)施例一和實(shí)施例二金屬元素全血質(zhì)控品制備過程中，對所用到的盛裝容器、過濾紗布袋、防腐劑等進(jìn)行金屬元素的空白本底檢測。
[0021]結(jié)果:實(shí)施例一和實(shí)施例二金屬元素全血質(zhì)控品制備過程中所用的盛裝容器、過濾紗布袋、防腐劑等都符合要求。
[0022]實(shí)施例四金屬元素全血質(zhì)控品的抑菌試驗(yàn)
取實(shí)施例一制得的金屬元素全血質(zhì)控品，用無菌吸管分別取ImL接種于2塊滅菌平皿，平皿內(nèi)加入已高壓滅菌的營養(yǎng)瓊脂15mL，邊傾注邊搖勻，待瓊脂凝固，置于36°C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h，計(jì)算2塊平皿的平均菌落數(shù)。
[0023]結(jié)果:菌落數(shù)為O。
[0024]實(shí)施例五金屬元素全血質(zhì)控品的基質(zhì)效應(yīng)
每個(gè)待檢項(xiàng)目準(zhǔn)備20例樣品，濃度分布整個(gè)線性范圍，分別使用比較方法(原子吸收方法)和待檢方法(ICP-MS方法)進(jìn)行測定，使用美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(CLSI )EP14-A進(jìn)tx評估。
[0025]結(jié)果:金屬元素全血質(zhì)控品與人體全血樣品相比，基質(zhì)效應(yīng)可以忽略。以鐵元素為例，結(jié)果如圖1所示。
[0026]實(shí)施例六金屬元素全血質(zhì)控品的均一性和穩(wěn)定性
將實(shí)施例一制得的金屬元素全血質(zhì)控品實(shí)施分裝，隨機(jī)抽取10份，對每份質(zhì)控品平行測定2次，進(jìn)行方差分析。結(jié)果:方差值小于3.02，本發(fā)明制得的金屬元素全血質(zhì)控品具有良好的均一性。
[0027]將實(shí)施例一制得的金屬元素全血質(zhì)控品實(shí)施分裝，于-20°C的條件下保存，每隔60天，采用3天的結(jié)果，每天對質(zhì)控品平行檢測2次，進(jìn)行配對T檢驗(yàn)分析。結(jié)果:T值小于2.23，保存18個(gè)月后仍符合相關(guān)要求，本發(fā)明制得的金屬元素全血質(zhì)控品具有良好的穩(wěn)定性。
[0028]以上內(nèi)容是結(jié)合具體的優(yōu)選實(shí)施方式對本發(fā)明所作的進(jìn)一步詳細(xì)說明，不能認(rèn)定本發(fā)明的具體實(shí)施只局限于這些說明。對于本發(fā)明所屬技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干簡單推演或替換，都應(yīng)當(dāng)視為屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種金屬元素全血質(zhì)控品的制備方法，其特征在于:包括如下步驟: A)收集牛全血； B)測定牛全血中金屬元素的濃度，所述金屬元素包括鎂、鐵、銅、鋅、鉛、錳和鈣； C)加入金屬元素物質(zhì)，將牛全血中金屬元素的濃度調(diào)節(jié)至目標(biāo)濃度； D)離心或過濾去除纖維沉淀物； E)加入防腐劑，輕輕混勻，即得。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的金屬元素全血質(zhì)控品的制備方法，其特征在于:所述步驟C)中，采用少量多次的方式加入金屬元素物質(zhì)，所述金屬元素物質(zhì)包括金屬元素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和/或金屬鹽。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的金屬元素全血質(zhì)控品的制備方法，其特征在于:所述金屬鹽需用小于牛全血體積的1%的超純水溶解。4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的金屬元素全血質(zhì)控品的制備方法，其特征在于:所述金屬元素物質(zhì)包括硝酸鎂、錳單元素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、氯化鐵、銅單元素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、鋅單元素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、鉛單元素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和鈣單元素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的金屬元素全血質(zhì)控品的制備方法，其特征在于:包括如下步驟: A)收集牛全血； B)測定牛全血中金屬元素的濃度； C)加入金屬元素物質(zhì)，輕輕混勻，采用潔凈紗布進(jìn)行過濾，將牛全血中金屬元素的濃度調(diào)節(jié)至目標(biāo)濃度； D)離心或過濾去除纖維沉淀物； E)加入防腐劑，輕輕混勻，即得。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的金屬元素全血質(zhì)控品的制備方法，其特征在于:所述潔凈紗布為潔凈無菌密孔紗布。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的金屬元素全血質(zhì)控品的制備方法，其特征在于:所述防腐劑采用Proclin 300防腐劑，加入量為牛全血體積的0.02-0.05%。
【專利摘要】本發(fā)明提供一種金屬元素全血質(zhì)控品的制備方法，包括如下步驟：A）收集牛全血；B）測定牛全血中金屬元素的濃度，所述金屬元素包括鎂、鐵、銅、鋅、鉛、錳和鈣；C）加入金屬元素物質(zhì)，將牛全血中金屬元素的濃度調(diào)節(jié)至目標(biāo)濃度；D）離心或過濾去除纖維沉淀物；E）加入防腐劑，輕輕混勻，即得。本發(fā)明屬于醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)領(lǐng)域，本發(fā)明提供的制備方法簡單，成本低，通過該方法，可以制得穩(wěn)定性、均一性和基質(zhì)效應(yīng)都符合要求的金屬元素全血質(zhì)控品，從而滿足臨床和日常檢測對金屬元素全血質(zhì)控品的需求。
【IPC分類】G01N33/96
【公開號】CN104965092
【申請?zhí)枴緾N201510300359
【發(fā)明人】文國學(xué), 沙小花, 陳文彬, 程雅婷, 陳靜宜, 梁秋妮, 徐冠文
【申請人】廣州金域醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心有限公司
【公開日】2015年10月7日
【申請日】2015年6月4日