一種組織切片的固定方法及其用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及病理切片粘附防掉片方法。
【背景技術(shù)】
[0002]組織切片脫落始終是病理染色過(guò)程中不可避免的問(wèn)題。目前已有的切片預(yù)防掉片的方法主要包括火棉膠涂覆、多聚賴氨酸及鉻釩明膠處理玻片等。硬組織切片雖然也可以防止掉片，但其切片過(guò)厚(約40?100 μ m)，組織重疊不易觀察，無(wú)法進(jìn)行病理染色。石蠟及冰凍切片可達(dá)到1ym以內(nèi)，可以較好的觀察細(xì)胞形態(tài)，但始終存在一些組織貼片不牢，在染色時(shí)易掉片的問(wèn)題，尤其在蠶絲以及人工韌帶等組織工程材料的切片染色中，掉片現(xiàn)象更加突出。同時(shí)在HE、麗春紅三色和免疫組化等染色中，由于染色步驟繁瑣，組織浸泡時(shí)間過(guò)長(zhǎng)等原因，組織掉片現(xiàn)象尤為嚴(yán)重。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的在于提供一種組織切片的固定方法及其用途。
[0004]為達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用了以下技術(shù)方案。
[0005]—種組織切片的固定方法，包括以下步驟:
[0006]I)將實(shí)驗(yàn)取材或手術(shù)病理標(biāo)本用多聚甲醛固定，若實(shí)驗(yàn)取材或手術(shù)病理標(biāo)本為骨組織，則在多聚甲醛固定后進(jìn)行脫鈣處理；
[0007]2)將經(jīng)過(guò)步驟I)處理后的實(shí)驗(yàn)取材或手術(shù)病理標(biāo)本用阿拉伯樹膠溶液浸泡24?48小時(shí)，然后用冰凍切片機(jī)切至5?10 μ m，得組織切片；
[0008]3)將速干膠均勻涂覆于載玻片上，然后將組織切片固定在載玻片上均勻涂覆速干膠的區(qū)域上，然后自然風(fēng)干或用烤片機(jī)于55?65°C烤片I?2小時(shí)。
[0009]所述組織切片取材自容易掉片的所有實(shí)驗(yàn)取材或手術(shù)病理標(biāo)本。
[0010]所述實(shí)驗(yàn)取材或手術(shù)病理標(biāo)本為蠶絲組織工程韌帶。
[0011]所述將速干膠均勻涂覆于載玻片上具體包括以下步驟:滴若干滴速干膠于載玻片A上，然后立即用載玻片B覆蓋在載玻片A上面，使滴在載玻片A上的速干膠水平鋪展，從而使速干膠均勻涂覆于載玻片A以及載玻片B上。
[0012]上述組織切片的固定方法在組織染色中的用途。
[0013]所述組織切片用于HE染色、麗春紅三色染色或免疫組化染色。
[0014]所述組織切片取材于蠶絲組織工程韌帶。
[0015]本發(fā)明的有益效果體現(xiàn)在:
[0016]本發(fā)明在普通載玻片上均勻涂覆薄層速干膠后，將冰凍組織切片貼片，組織切片與載玻片結(jié)合緊密，且制作方便、操作簡(jiǎn)單，需要處理的時(shí)間短，成本低，有效避免了染色過(guò)程中出現(xiàn)的掉片現(xiàn)象，徹底解決了病理染色的掉片問(wèn)題，尤其適用于易脫落的蠶絲材料、組織工程韌帶或其他組織工程材料的切片染色，且有效解決了硬組織切片過(guò)厚，無(wú)法清晰顯示細(xì)胞等結(jié)構(gòu)的問(wèn)題。
【附圖說(shuō)明】
[0017]圖1為在經(jīng)鉻釩明膠處理玻片上固定蠶絲韌帶切片并進(jìn)行HE染色結(jié)果；
[0018]圖2為在涂覆速干膠的玻片上固定蠶絲韌帶切片并進(jìn)行HE染色結(jié)果。
【具體實(shí)施方式】
[0019]下面結(jié)合附圖和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作詳細(xì)說(shuō)明。
[0020]取經(jīng)多聚甲醛固定、脫鈣的蠶絲韌帶組織，使用阿拉伯樹膠溶液(含質(zhì)量分?jǐn)?shù)10%阿拉伯樹膠和30%的蔗糖的水溶液)浸泡24?48小時(shí)，得到樣本，利用冰凍切片機(jī)將樣本切成5?10 μ m厚的組織切片，在普通載玻片上滴I滴速干膠(例如，義烏市綠潔日用品廠，大象卡膠水)，利用另外一張載玻片采用迅速壓片的方法，將速干膠均勻地涂覆于兩片載玻片上，再迅速將組織片粘附于其中一片載玻片上涂覆速干膠的區(qū)域上；然后自然風(fēng)干或烤片機(jī)上(60°C )烤片I?2小時(shí)。對(duì)照組使用經(jīng)鉻釩明膠處理玻片粘附組織切片，同時(shí)進(jìn)行HE染色。
[0021]參見圖1以及圖2，圖1中可見染色后組織掉片嚴(yán)重(鉻釩明膠處理玻片)；圖2中染色色澤正常(本發(fā)明方法處理的玻片)，幾乎無(wú)掉片現(xiàn)象。
[0022]本發(fā)明所述組織切片固定方法可以有效避免組織染色過(guò)程中的掉片(脫片)現(xiàn)象。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種組織切片的固定方法，其特征在于:包括以下步驟: 1)將實(shí)驗(yàn)取材或手術(shù)病理標(biāo)本用多聚甲醛固定，若實(shí)驗(yàn)取材或手術(shù)病理標(biāo)本為骨組織，則在多聚甲醛固定后進(jìn)行脫鈣處理； 2)將經(jīng)過(guò)步驟I)處理后的實(shí)驗(yàn)取材或手術(shù)病理標(biāo)本用阿拉伯樹膠溶液浸泡24?48小時(shí)，然后用冰凍切片機(jī)切至5?10 μ m，得組織切片； 3)將速干膠均勻涂覆于載玻片上，然后將組織切片固定在載玻片上均勻涂覆速干膠的區(qū)域上，然后自然風(fēng)干或用烤片機(jī)于55?65°C烤片I?2小時(shí)。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種組織切片的固定方法，其特征在于:所述組織切片取材自容易掉片的所有實(shí)驗(yàn)取材或手術(shù)病理標(biāo)本。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種組織切片的固定方法，其特征在于:所述實(shí)驗(yàn)取材或手術(shù)病理標(biāo)本為蠶絲組織工程韌帶。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種組織切片的固定方法，其特征在于:所述將速干膠均勻涂覆于載玻片上具體包括以下步驟:滴若干滴速干膠于載玻片A上，然后立即用載玻片B覆蓋在載玻片A上面，使滴在載玻片A上的速干膠水平鋪展，從而使速干膠均勻涂覆于載玻片A以及載玻片B上。5.一種如權(quán)利要求1所述組織切片的固定方法在組織染色中的用途。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的用途，其特征在于:所述組織切片用于HE染色、麗春紅三色染色或免疫組化染色。7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的用途，其特征在于:所述組織切片取材于蠶絲組織工程韌帶。
【專利摘要】本發(fā)明提供一種組織切片的固定方法及其用途，將速干膠滴在載玻片上，均勻涂抹成薄層，將組織切片迅速粘附在掛速干膠的載玻片上，組織切片與載玻片結(jié)合緊密，幾乎不會(huì)發(fā)生掉片現(xiàn)象，且操作簡(jiǎn)單，使用的載玻片比市場(chǎng)上帶膠的切片價(jià)格低廉，且可用于HE染色、免疫組化等各種染色。
【IPC分類】G01N1/31, F16B11/00
【公開號(hào)】CN105004594
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510419068
【發(fā)明人】李宏國(guó), 范宏斌, 孫立國(guó), 郝章英, 朱小燕, 薛英森, 劉鑫成, 吳拮
【申請(qǐng)人】中國(guó)人民解放軍第513醫(yī)院
【公開日】2015年10月28日
【申請(qǐng)日】2015年7月16日