一種橄欖油鑒別方法及橄欖油標(biāo)準(zhǔn)品離子遷移譜圖的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及食品鑒定領(lǐng)域，尤其涉及一種橄欖油鑒別方法及橄欖油標(biāo)準(zhǔn)品離子迀移譜圖。
【背景技術(shù)】
[0002]橄欖油含有豐富的不飽和脂肪酸、多酚、角鯊烯、維生素等物質(zhì)。具有抗氧化、調(diào)節(jié)膽固醇、美容養(yǎng)顏、預(yù)防癌癥、抗衰老等功效。中國(guó)市售橄欖油多以進(jìn)口為主，消費(fèi)者對(duì)于橄欖油的認(rèn)知有限，一直以來(lái)，橄欖油摻假問(wèn)題較為嚴(yán)重，摻假形式主要為在橄欖油中摻入低價(jià)植物油，如榛子油、菜籽油、大豆油、花生油等。目前，常有的檢測(cè)方法有理化檢測(cè)(以感官性質(zhì)、水分含量、過(guò)氧化值、酸值、碘值等為指標(biāo))，色譜法(根據(jù)橄欖油中脂肪酸的組成和含量，β-谷留醇、角鯊烯、豆留二醇、生育酚等含量)，核磁共振、紫外、紅外、熒光、拉曼等光譜法(主要根據(jù)橄欖油區(qū)別于其他油的特性，結(jié)合主成分分析等方法進(jìn)行)。但由于橄欖油摻假的復(fù)雜性以及和摻入的其他油指標(biāo)相似性，常常使檢測(cè)鑒定存在很大問(wèn)題。
[0003]離子迀移譜是一種微量物質(zhì)分析技術(shù)，具有裝置簡(jiǎn)單、體積小、樣品處理便捷、效率高、成本低等特點(diǎn)，同時(shí)對(duì)可檢測(cè)的有機(jī)化合物的分析靈敏度高達(dá)10 9-10 w數(shù)量級(jí)，適合現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)分析。在早期，離子迀移譜更多地應(yīng)用于司法、軍事、安全和反恐方面，包括化學(xué)戰(zhàn)劑、毒品、爆炸物等危險(xiǎn)品的探測(cè)等。目前，離子迀移譜在醫(yī)療、生物、環(huán)境和食品方面有了全新的應(yīng)用。
[0004]離子迀移譜儀具有體積小，重量輕，靈敏度高，功耗低和分析時(shí)間快等有點(diǎn)。離子迀移譜儀的現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)功能，使食品企業(yè)對(duì)生產(chǎn)全過(guò)程實(shí)施全程監(jiān)控成為可能。隨著離子迀移譜技術(shù)不斷發(fā)展和改進(jìn)，離子迀移譜和其它分析儀器連用，使離子迀移譜在各個(gè)領(lǐng)域應(yīng)用范圍越來(lái)越廣，分析靈敏度和檢出速度也越來(lái)越高。離子迀移譜在食品方面應(yīng)用才剛剛開始，在國(guó)內(nèi)更是少見，但離子迀移譜在檢出靈敏度和檢出速度及其便攜程度上的優(yōu)勢(shì)，使得對(duì)食品安全快速準(zhǔn)確檢測(cè)有良好前景。隨著食品工業(yè)的飛速發(fā)展，快速檢測(cè)已經(jīng)成為農(nóng)產(chǎn)品和食品質(zhì)量安全分析發(fā)展的重要趨勢(shì)。
[0005]離子迀移譜技術(shù)為食品鑒定提供一種思路，但是CN104155359A和CN104237370A采用離子迀移譜進(jìn)行食用植物油和芝麻油的鑒定，需基于MetaboAnalyst數(shù)據(jù)處理平臺(tái)進(jìn)行聚類分析，對(duì)儀器要求較高。本發(fā)明提供的方法無(wú)需復(fù)雜數(shù)據(jù)處理，簡(jiǎn)單快捷，更適用于日常檢測(cè)中。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的在于提供一種操作簡(jiǎn)單、鑒定快速、正確率高的橄欖油真?zhèn)舞b定方法。
[0007]為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供一種橄欖油真?zhèn)握鐒e方法，其特征在于，步驟為，
[0008]前處理待測(cè)樣品:量取樣品于50mL試管中，加入正己烷溶液，氫氧化鉀甲醇溶液進(jìn)行甲酯化，渦旋混勻；水浴加熱，離心，氮吹，復(fù)溶，過(guò)膜，待上機(jī)；
[0009]采集待測(cè)樣品離子迀移圖譜信息:設(shè)置技術(shù)參數(shù)，利用離子迀移譜分析系統(tǒng)采集待測(cè)樣品離子迀移圖譜信息；
[0010]譜圖分析并判斷結(jié)果:通過(guò)比較橄欖油標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣品的離子迀移圖譜，判斷待測(cè)樣品是否為純正橄欖油。
[0011]進(jìn)一步，所述前處理待測(cè)樣品為量取50 μ L樣品于50mL試管中，加入5mL正己烷溶液，繼續(xù)加入lmol/L氫氧化鉀甲醇溶液2mL，渦旋混勻；水浴加熱，自然冷卻至室溫；加入ImL去離子水至試管中，渦旋混勻；離心，取上層清夜至1mL試管中，氮吹至干；2mL甲醇復(fù)溶，過(guò)0.22 μ m濾膜，待上機(jī)；所述lmol/L氫氧化鉀甲醇為將Imol氫氧化鉀溶于IL甲醇中；
[0012]優(yōu)選的，所述水浴為40°C水浴30min ;所述離心為5000r/min離心3min。
[0013]進(jìn)一步，所述采集待測(cè)樣品離子迀移圖譜信息步驟中，離子迀移譜分析系統(tǒng)所用的工作參數(shù)為源電壓:2600V ;漂移管電壓8000V ;進(jìn)氣口溫度180°C ;漂移管溫度180°C ;柵電壓45V ;門脈沖寬度90 μ s ;檢測(cè)時(shí)間26ms ;載氣流量400mL/min。
[0014]進(jìn)一步，所述離子迀移譜分析系統(tǒng)為離子迀移譜儀，Excellims公司的GA 2100離子迀移譜儀。
[0015]進(jìn)一步，所述數(shù)據(jù)分析為，分析待測(cè)樣品的離子迀移譜圖，根據(jù)特征峰出峰位置，觀察待測(cè)樣品的離子迀移譜圖中是否出現(xiàn)所有橄欖油特征峰:若出現(xiàn)所有橄欖油特征峰，表明樣品為純正橄欖油；若橄欖油特征峰沒(méi)有出現(xiàn)或者沒(méi)有完全出現(xiàn)，表明樣品為非純正橄欖油;所述橄欖油的特征峰為(10.480±0.030)ms、(12.860±0.030)ms、(13.390±0.030)ms、(14.150±0.030)ms、(16.090±0.030)ms。
[0016]進(jìn)一步，所述橄欖油標(biāo)準(zhǔn)品的離子迀移圖譜獲得方法為，
[0017]前處理:量取橄欖油標(biāo)準(zhǔn)品于50mL試管中，加入正己烷溶液，氫氧化鉀甲醇溶液進(jìn)行甲酯化，渦旋混勻；水浴加熱，離心，氮吹，復(fù)溶，過(guò)膜，待上機(jī)；
[0018]采集待測(cè)樣品離子迀移圖譜信息:設(shè)置技術(shù)參數(shù)，利用離子迀移譜分析系統(tǒng)采集待測(cè)樣品離子迀移圖譜信息。
[0019]進(jìn)一步，所述前處理為量取50 μ L橄欖油標(biāo)準(zhǔn)品于50mL試管中，加入5mL正己烷溶液，繼續(xù)加入lmol/L氫氧化鉀甲醇溶液2mL，渦旋混勻；水浴加熱，自然冷卻至室溫；加入ImL去離子水至試管中，渦旋混勻；離心，取上層清夜至1mL試管中，氮吹至干；2mL甲醇復(fù)溶，過(guò)0.22 μ m濾膜，待上機(jī)；
[0020]優(yōu)選的，所述水浴為40°C水浴30min ;所述離心為5000r/min離心3min。
[0021]進(jìn)一步，所述采集待測(cè)樣品離子迀移圖譜信息步驟中，離子迀移譜分析系統(tǒng)所用的工作參數(shù)為源電壓:2600V ;漂移管電壓8000V ;進(jìn)氣口溫度180°C ;漂移管溫度180°C ;柵電壓45V ;門脈沖寬度90 μ s ;檢測(cè)時(shí)間26ms ;載氣流量400mL/min。
[0022]另一方面，本發(fā)明還提供所述方法得到的橄欖油標(biāo)準(zhǔn)品離子迀移譜圖。
[0023]本發(fā)明還提供所述得到的橄欖油標(biāo)準(zhǔn)品離子迀移譜圖用作鑒定橄欖油真?zhèn)蔚臉?biāo)準(zhǔn)圖譜。
[0024]根據(jù)多個(gè)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)總結(jié)，本發(fā)明方法即前處理待測(cè)樣品:量取樣品試管中，加入正己烷溶液，氫氧化鉀甲醇溶液進(jìn)行甲酯化，渦旋混勻。水浴加熱，離心，氮吹，復(fù)溶，過(guò)膜。設(shè)置技術(shù)參數(shù)，利用離子迀移譜分析系統(tǒng)采集待測(cè)樣品離子迀移圖譜信息。通過(guò)比較橄欖油和待測(cè)樣品的離子迀移圖譜，判斷待測(cè)樣品為純正橄欖油是否摻假。若出現(xiàn)所有橄欖油特征峰，表明樣品為純正橄欖油；若橄欖油特征峰沒(méi)有全部出現(xiàn)，表明樣品為非純正橄欖油；所述橄欖油的特征峰為(10.480±0.030)ms、(12.860±0.030)ms、(13.390±0.030)ms、(14.150±0.030)ms、(16.090±0.030)ms。
[0025]所述lmol/L氫氧化鉀甲醇溶液為將lmol KOH溶于IL甲醇中。
[0026]本發(fā)明的技術(shù)方案，其主要的技術(shù)困難在于樣品前處理方案的確定。本發(fā)明通過(guò)對(duì)樣品進(jìn)行甲醇，正己烷，乙腈，異丙醇等不同溶劑及其不同混合比的提取，繼而嘗試采用石油醚，乙醚萃取，嘗試不同類型的固相萃取小柱的選擇性過(guò)濾，均未實(shí)現(xiàn)采集到具有橄欖油特性的穩(wěn)定的離子迀移譜數(shù)據(jù)。最終，將樣品進(jìn)行堿甲酯化后獲得了穩(wěn)定的橄欖油特征離子迀移譜圖。因?yàn)閷悠芳柞セ螅柞セ闹舅嵩陔x子迀移譜信號(hào)更加明顯，譜圖更具有代表性。結(jié)果表明，基于離子迀移譜進(jìn)行橄欖油真?zhèn)舞b別的方法，其前處理為:量取50 μ L樣品于50mL試管中，加入5mL正己烷溶液，繼續(xù)加入lmol/L氫氧化鉀甲醇溶液2mL，渦旋混勻。40°C水浴加熱30min，冷卻至室溫。加入ImL去離子水至試管中，渦旋混勻。5000r/min離心3min，取上層清夜至1mL試管中，氮吹至干。2mL甲醇復(fù)溶，過(guò)0.22 μπι濾膜，待上機(jī)。
[0027]本發(fā)明的有益效果:
[0028]本發(fā)明應(yīng)用離子迀移譜技術(shù)快速鑒別橄欖油真?zhèn)?，其分析速度快，前處理?jiǎn)單。樣品所需量小、靈敏度較高、準(zhǔn)確度高。與其他橄欖油鑒定方法對(duì)比，其優(yōu)點(diǎn)為準(zhǔn)確率高，結(jié)果易于分析。本發(fā)明的發(fā)明人經(jīng)過(guò)大量的試驗(yàn)驗(yàn)證，再經(jīng)過(guò)大量艱苦卓絕的分析總結(jié)，得出:若離子迀移譜圖中出現(xiàn)所有橄欖油特征峰，表明樣品為純正橄欖油；若橄欖油特征峰沒(méi)有出現(xiàn)或者沒(méi)有完全出現(xiàn)，表明樣品為非純正橄欖油；所述橄欖油的特征峰為(10.480±0.030)ms、(12.860±0.030)ms、(13.390±0.030)ms、(14.150±0.030)ms、(16.090 ± 0.030) ms。據(jù)此，用本發(fā)明的方法就能簡(jiǎn)單、方便、準(zhǔn)確的判斷結(jié)果，靈敏度高。適合大批量樣品的測(cè)定，是快速鑒定橄欖油真?zhèn)蔚男路椒ā?br>【附圖說(shuō)明】
[0029]圖1馬賽羅特級(jí)初榨橄欖油的離子迀移譜圖；
[0030]圖2博格特級(jí)初榨橄欖油的離子迀移譜圖；
[0031]圖3尤恩奧麗特級(jí)初榨橄欖油的離子迀移譜圖；
[0032]圖4歐麗薇蘭特級(jí)初榨橄欖油的離子迀移譜圖；
[0033]圖5特雷諾特級(jí)初榨橄欖油的離子迀移譜圖；
[0034]圖6貝蒂斯特級(jí)初榨橄欖油的離子迀移譜圖；
[0035]圖7歐仕特級(jí)初榨橄欖油的離子迀移譜圖；
[0036]圖8大豆油的離子迀移譜圖；
[0037]圖9玉米胚芽油的離子迀移譜圖；
[0038]圖10花生油的離子迀移譜圖；
[0039]圖11芝麻油的離子迀移譜圖；
[0040]圖12芥花籽油的離子迀移譜圖；
[0041]圖13山茶油的離子迀移譜圖；
[0042]圖14調(diào)和油的離子迀移譜圖。
【具體實(shí)施方式】
[0043]下面詳細(xì)描述本發(fā)明的實(shí)施例，所述實(shí)施例的示例在附圖中示出，其中自始至