一種控制替格瑞洛異構(gòu)體的高效液相色譜檢測分析方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種檢測方法，更具體地說，涉及一種控制替格瑞洛異構(gòu)體的高效液 相色譜檢測分析方法。屬于藥物化學(xué)分析技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 替格瑞洛是英國阿斯利康公司研發(fā)的一種新型的、具有選擇性的小分子抗凝血 藥。替格瑞洛的結(jié)構(gòu)式I :
其化學(xué)名稱為：（13,25,31?，55)-3-[7-{[(11?，25)-2-(3,4-二氟苯）環(huán)丙基]氨 基}-5_(丙基硫氧嘧啶）-3Η-[1，2,3]_三唑磷[4,5-d]嘧啶-3-基]-5-(2-羥乙基）環(huán)戊 烷-1，2-二醇。分子式：C23H28F2N604S，分子量：522. 57。
[0003] 其光學(xué)異構(gòu)體 II 的化學(xué)式為：（IS, 2S，3R，5S) -3-[7- {[ (IS, 2S) -2- (3, 4-二氟苯） 環(huán)丙基]氨基}-5-(丙基硫氧嘧啶）_3!1-[1，2,3]-三唑磷[4,5-(1]嘧啶-3-基]-5-(2-羥 乙基）環(huán)戊烷-1，2-二醇 替格瑞洛分子結(jié)構(gòu)中含有6個手性碳原子，其是一種手性藥物，所以在實際合成過程 中，除合成替格瑞洛的有效成份式I外，其它的手性結(jié)構(gòu)的替格瑞洛則相應(yīng)的生成光學(xué)異 構(gòu)體雜質(zhì)。
[0004] 然而，現(xiàn)有技術(shù)中對替格瑞洛的檢測方法的報道較少見，對于替格瑞洛的光學(xué)異 構(gòu)體雜質(zhì)，在藥物合成過程當(dāng)中是需要進(jìn)行質(zhì)量控制的。對于含手性碳原子的異構(gòu)體的分 離一直是手性藥物合成和制劑過程中質(zhì)量控制的難點(diǎn)，因此實現(xiàn)替格瑞洛與其異構(gòu)體進(jìn)行 分離具有現(xiàn)實意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明針對以上現(xiàn)有技術(shù)中所存在的缺陷，提出一種控制替格瑞洛異構(gòu)體的高效 液相色譜檢測分析方法，該方法分離度大，使得到的替格瑞洛產(chǎn)品的手性純度高，產(chǎn)品穩(wěn) 定。
[0006] 本發(fā)明的上述目的是通過以下技術(shù)方案得以實現(xiàn)的：一種控制替格瑞洛異構(gòu)體的 高效液相色譜檢測分析方法，其特征在于采用以纖維素類為填充劑的手性色譜柱，以低級 烷烴-低級醇為流動相。
[0007] 上述所述的控制替格瑞洛異構(gòu)體的高效液相色譜檢測分析方法，其中所 述的手性色譜柱為0J-H。采用OJ-H手性色譜柱，能夠有效的分離出替格瑞洛的光學(xué)異 構(gòu)體II，達(dá)到控制產(chǎn)品手性純度的要求。
[0008] 所述的控制替格瑞洛異構(gòu)體的高效液相色譜檢測分析方法，其中所述的低級烷烴 為正庚烷、正己烷、正丁烷或正戊烷中的一種或幾種，作為優(yōu)選，所述的低級烷烴為正庚烷、 正己烷中的一種或兩種。
[0009] 所述的控制替格瑞洛異構(gòu)體的高效液相色譜檢測分析方法，其中所述低級醇為甲 醇、乙醇、丙醇、異丙醇中的一種或幾種，作為優(yōu)選，所述低級醇為甲醇、乙醇中的一種或兩 種。
[0010] 所述的控制替格瑞洛異構(gòu)體的高效液相色譜檢測分析方法，其中所述的低級烷烴 與低級醇的體積比為80-90:20-10。
[0011] 所述的控制替格瑞洛異構(gòu)體的高效液相色譜檢測分析方法，還包括以下方法： 設(shè)定柱溫為20°C~30°C，流速為0. 4~I. 2ml/min，檢測波長為200~270nm。
[0012] 在上述的柱溫條件下，能夠提高出峰的對稱性。其中的流速條件下進(jìn)行檢測分析， 結(jié)合其他條件（如色譜柱的要求），能夠使替格瑞洛與其異構(gòu)體II達(dá)到有效的分離， 得到的分離度大。
[0013] 綜上所述，本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)： 1、利用本發(fā)明控制替格瑞洛異構(gòu)體的高效液相色譜檢測分析方法，能夠?qū)崿F(xiàn)替格瑞洛 異構(gòu)體的有效分離，分離度大。
[0014] 2、利用本發(fā)明控制替格瑞洛異構(gòu)體的高效液相色譜檢測分析方法，得到的替格瑞 洛產(chǎn)品的手性純度高，產(chǎn)品穩(wěn)定。
【具體實施方式】
[0015] 下面通過具體實施例，對本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步具體的說明；但是本發(fā)明并 不限于這些實施例。
[0016] 實施例1 儀器與條件 高效液相色譜儀：島津：LC-10ATvp，SfiD-MIOAvp ; 色譜柱：〇J-H(DACEL4. 6mmX 250mm, 5Mm); 流動相：正已烷-甲醇=80 : 20 ; 流速：1. OmL/min ; 柱溫：室溫； 進(jìn)樣體積：10 μ L ; 檢測波長：225nm ; 實驗步驟 分別稱取替格瑞洛及其異構(gòu)體II各5mg，置于25mL容量瓶中，加無水乙醇 溶解并稀釋置刻度，搖勻，作為混合樣品溶液。并分別稱取替格瑞洛其對映異構(gòu)體II 各5mg，分別置于2個25mL容量瓶中，加無水乙醇溶解并稀釋置刻度，搖勻，作為定性對照 溶液。
[0017] 分別取各對照溶液和混合樣品溶液，按上述條件進(jìn)行高效液相色譜分析，記錄色 譜圖，可以看出在該條件下替格瑞洛異構(gòu)體完全分離開來，且替格瑞洛的主峰在9min 左右。
[0018] 實施例2 儀器與條件 高效液相色譜儀：島津：LC-10ATvp，SfiD-MIOAvp ; 色譜柱：〇J-H(DACEL4. 6mmX 250mm, 5Mm); 流動相：正已烷-甲醇=85 : 15 ; 流速：1. OmL/min ; 柱溫：室溫； 進(jìn)樣體積：10 μ L ; 檢測波長：225nm ; 實驗步驟 分別稱取替格瑞洛及其異構(gòu)體II各5mg，置于25mL容量瓶中，加無水乙醇 溶解并稀釋置刻度，搖勻，作為混合樣品溶液。并分別稱取替格瑞洛其對映異構(gòu)體II 各5mg，分別置于2個25mL容量瓶中，加無水乙醇溶解并稀釋置刻度，搖勻，作為定性對照 溶液。
[0019] 分別取各對照溶液和混合樣品溶液，按上述條件進(jìn)行高效液相色譜分析，記錄色 譜圖，可以看出在該條件下替格瑞洛異構(gòu)體完全分離開來，且替格瑞洛的主峰在Ilmin 左右。
[0020] 實施例3 儀器與條件 高效液相色譜儀：島津：LC-IOATvp，SfiD-MIOAvp ; 色譜柱：〇J-H(DACEL4. 6mmX 250mm, 5Mm); 流動相：正已烷-乙醇=90 : 10 ; 流速：1. OmL/min ; 柱溫：室溫； 進(jìn)樣體積：10 μ L ; 檢測波長：225nm ; 實驗步驟 分別稱取替格瑞洛及其異構(gòu)體II各5mg，置于25mL容量瓶中，加無水乙醇 溶解并稀釋置刻度，搖勻，作為混合樣品溶液。并分別稱取替格瑞洛其對映異構(gòu)體II 各5mg，分別置于2個25mL容量瓶中，加無水乙醇溶解并稀釋置刻度，搖勻，作為定性對照 溶液。
[0021] 分別取各對照溶液和混合樣品溶液，按上述條件進(jìn)行高效液相色譜分析，記錄色 譜圖，可以看出在該條件下替格瑞洛異構(gòu)體完全分離開來，且替格瑞洛的主峰在15min 左右。
[0022] 對比實施例1 儀器與條件 高效液相色譜儀：島津：LC-10ATvp，SfiD-MIOAvp ; 色譜柱：〇J-H(DACEL4. 6mmX 250mm, 5Mm); 流動相：正已烷-乙醇=70 : 30 ; 流速：1. OmL/min ; 柱溫：室溫； 進(jìn)樣體積：10 μ L ; 檢測波長：225nm ; 實驗步驟 分別稱取替格瑞洛及其異構(gòu)體II各5mg，置于25mL容量瓶中，加無水乙醇 溶解并稀釋置刻度，搖勻，作為混合樣品溶液。并分別稱取替格瑞洛其對映異構(gòu)體II 各5mg，分別置于2個25mL容量瓶中，加無水乙醇溶解并稀釋置刻度，搖勻，作為定性對照 溶液。
[0023] 分別取各對照溶液和混合樣品溶液，按上述條件進(jìn)行高效液相色譜分析，記錄色 譜圖，可以看出在該條件下替格瑞洛及其替格瑞洛異構(gòu)體II的色譜峰有重疊，不能達(dá) 到完全分離的效果。
【主權(quán)項】
1. 一種控制替格瑞洛異構(gòu)體的高效液相色譜檢測分析方法，其特征在于采用以纖維素 類為填充劑的手性色譜柱，以低級烷烴-低級醇為流動相。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種控制替格瑞洛異構(gòu)體的高效液相色譜檢測分析方法，其 特征在于：所述的手性色譜柱為OJ-H。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種控制替格瑞洛異構(gòu)體的高效液相色譜檢測分析方法，其 特征在于：所述的低級烷烴與低級醇的體積比為80~90:20~10。4. 根據(jù)權(quán)利要求1至3任一項所述的一種控制替格瑞洛異構(gòu)體的高效液相色譜檢測 分析方法，其特征在于：所述的低級烷烴為正庚烷、正己烷、正丁烷或正戊烷中的一種或幾 種。5. 根據(jù)權(quán)利要求1至3任一項所述的一種控制替格瑞洛異構(gòu)體的高效液相色譜檢測 分析方法，其特征在于：低級醇為甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇中的一種或幾種。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：流動相的流速為0. 4-1. 2mL/min。7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：柱溫為20-30°C。8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：檢測波長為200~270nm。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種控制替格瑞洛異構(gòu)體的高效液相色譜檢測分析方法，采用以纖維素類為填充劑的手性色譜柱，以低級烷烴-低級醇為流動相，該方法可以快速的分離替格瑞洛的異構(gòu)體雜質(zhì)。
【IPC分類】G01N30/02
【公開號】CN105092721
【申請?zhí)枴緾N201410214785
【發(fā)明人】嚴(yán)潔, 李軒
【申請人】天津市漢康醫(yī)藥生物技術(shù)有限公司
【公開日】2015年11月25日
【申請日】2014年5月21日