一種石柑子的薄層色譜快速鑒別方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種石柑子的薄層色譜快速鑒別方法，基于薄層色譜技術(shù)的石柑子中阿魏酰酪胺成分的快速測定方法，屬于中藥質(zhì)量檢測領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]石柑子是天南星科石柑屬植物石柑子Pothos chinensis (Raf.)Merr.的干燥全草，別名葫蘆鉆、柚子楓、石蜈蚣、爬崖香等，是瑤族地區(qū)治療跌打損傷、風(fēng)濕骨痛的常用藥之一。然而由于瑤族無自身文字，瑤族醫(yī)藥知識的繼承和傳播完全靠耳口相傳，導(dǎo)致瑤藥在使用過程中存在同名異物和同物異名的混亂狀況，臨床用藥的安全性和有效性難以得到保證，同時也給瑤藥進一步的開發(fā)利用和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定帶來了巨大的困難。目前，石柑子僅收載于《全國中草藥匯編》和各地方植物志。
[0003]石柑子作為瑤族常用中藥，目前僅以性狀鑒別作為鑒別依據(jù)，缺乏量化指標(biāo)和手段，方法十分粗淺，不僅缺乏專屬性，且也難以對藥材的真?zhèn)魏蛢?yōu)劣進行準(zhǔn)確的評價。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于利用薄層色譜技術(shù)對石柑子中阿魏酰酪胺成分進行鑒別，建立一種石柑子的快速鑒別方法，該方法滿足制藥過程中石柑子藥材快速質(zhì)量控制的要求。
[0005]本發(fā)明為實現(xiàn)上述目的所采用的技術(shù)方案是:
[0006]—種石柑子的薄層色譜快速鑒別方法，其特征在于，該方法包括以下步驟和條件:
[0007](I)取石柑子粉末(過四號篩)3g，加甲醇50mL，超聲提取30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水20ml使溶解，加石油醚(60?90°C )振搖提取2次，每次30mL，棄去石油醚液，水層加三氯甲烷振搖提取2次，每次30ml，合并三氯甲烷液，蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液；
[0008](2)取阿魏酰酪胺對照品適量，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對照品溶液；
[0009](3)照薄層色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液和對照品溶液各10 μ 1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇(10: I)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(254nm)下檢視；
[0010](4)供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。
[0011](5)對步驟(I)?(4)進行耐用性考察，分別考察不同溫度(26°C，4°C)、不同濕度(35%,88% )及不同廠家的薄層板(自制、Merck)對該方法的影響。
[0012]本發(fā)明的優(yōu)點在于方法簡單、準(zhǔn)確，靈敏度高，精密度、穩(wěn)定性好，可用于制藥過程中石柑子藥材快速質(zhì)量控制。
[0013]下面結(jié)合附圖與【具體實施方式】，對本發(fā)明進一步詳細說明。
【附圖說明】
[0014]圖1，12份石柑子薄層色譜圖；
[0015]圖2，石柑子薄層色譜圖2 ;
[0016]圖3，石柑子薄層色譜圖3 ;
[0017]圖4，石柑子薄層色譜圖4 ;
[0018]圖5，石柑子薄層色譜圖5 ;
[0019]圖6，石柑子薄層色譜圖6 ;
[0020]圖7，石柑子薄層色譜圖7 ;
[0021]圖8，石柑子薄層色譜圖8 ;
[0022]圖9，石柑子薄層色譜圖9。
【具體實施方式】
[0023]實施例，參見圖2?3，本實施例提供石柑子的薄層色譜快速鑒別方法，圖2中，I?2.阿魏酰酪胺對照品(5 μ L、10 μ L)，3?4.供試品(5 μ L、10 μ L);圖3中，1.阿魏酰酪胺對照品，2?4.供試品；石柑子的薄層色譜快速鑒別方法包括以下步驟和條件:
[0024](I)取石柑子粉末(過四號篩)3g，加甲醇50mL，超聲提取30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水20ml使溶解，加石油醚(60?90°C )振搖提取2次，每次30mL，棄去石油醚液，水層加三氯甲烷振搖提取2次，每次30ml，合并三氯甲烷液，蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液；
[0025](2)取阿魏酰酪胺對照品適量，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對照品溶液；
[0026](3)照薄層色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液和對照品溶液各10 μ 1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇(10: I)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(254nm)下檢視；
[0027](4)供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。
[0028]本實施例中，選用CAMAG Automatic TLC Sampler 4型薄層自動點樣儀(瑞士)；CAMAG Reprostar 3型薄層成像系統(tǒng)(瑞士)；Mettler Toledo XS205DU型電子分析天平(瑞士)；KQ5200DE型數(shù)控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)；HH-8型數(shù)顯恒溫水浴鍋(金壇市科析儀器有限公司)。
[0029]選用阿魏酰酪胺(自制，純度彡99.5%);提取用水為廣東省第二中醫(yī)院制劑室自制純化水；三氯甲烷、甲醇、乙酸乙酯等試劑均為分析純；娃膠GF254薄層層析板(浙江省臺州市路橋四甲生化塑料廠)。
[0030]本實施例中，還包括以下步驟:(5)對步驟⑴?(4)進行耐用性考察，分別考察不同溫度(26°C，4°C )、不同濕度(35%，88% )及不同廠家的薄層板(自制、Merck)對該方法的影響。見圖4?9，圖4中，1.阿魏酰酪胺對照品，2?4.供試品，溫度T:26°C，濕度RH:35% ;圖5中，1.阿魏酰酪胺對照品，2?4.供試品，T:4°C，RH:35% ;圖6中，1.阿魏酰酪胺對照品，2?4.供試品，T:26°C，RH:88% ;圖7中，1.阿魏酰酪胺對照品，2?4.供試品，T:4°C，RH:88 %;圖8中，1.阿魏酰酪胺對照品，2?4.供試品，Merck硅膠G預(yù)制板；圖9中，1.阿魏酰酪胺對照品，2?4.供試品，浙江臺州硅膠G預(yù)制板。
[0031]結(jié)果表明，該方法對不同的溫度和濕度適應(yīng)性良好，不同廠家的薄層板均能達到較好的分離效果，可以作為石柑子中阿魏酰酪胺的薄層快速鑒別方法。
[0032]按照上述步驟(I)?(4)對12批石柑子樣品進行薄層鑒別，結(jié)果見圖1，12份石柑子薄層色譜圖。圖1中，I?6、石柑子藥材SI?S6，7、阿魏酰酪胺對照品，8?13、石柑子樣品S7?S12。
[0033]實施例2，本實施例為對實施例1的方法進行摸索，取石柑子粉末(過四號篩)3g，加甲醇超聲提取后，加三氯甲烷振搖提取2次，合并有機相，蒸干，殘渣加甲醇ImL使溶解，作為供試品溶液。取阿魏酰酪胺對照品適量，加甲醇制成每ImL含Img的溶液，作為對照品溶液。將上述兩種溶液分別點樣于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇(9: I)為展開劑，展開晾干后置于紫外光燈(254nm)下檢視。結(jié)果顯示供試品溶液背景較深，無法清晰鑒別。
[0034]因此，在步驟(I)中，對供試品進行純化。樣品加甲醇提取后先用石油醚振搖提取2次，棄去醚液，再用三氯甲烷振搖提取，步驟(2)?(4)不變。結(jié)果顯示斑點清晰，對應(yīng)良好。故確定實施例1為最佳實施例。
[0035]已經(jīng)根據(jù)上述優(yōu)選實施例對本發(fā)明作出的描述。應(yīng)當(dāng)理解的是前面的描述和實施例僅為了舉例說明本發(fā)明。在不偏離本發(fā)明的精神和范圍的前提下，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以設(shè)計出本發(fā)明的多種替換方案和改進方案，其均應(yīng)被理解為在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項】
1.一種石柑子的薄層色譜快速鑒別方法，其特征在于，該方法包括以下步驟和條件: (1)取石柑子粉末3g，加甲醇50mL，超聲提取30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水20ml使溶解，加石油醚振搖提取2次，石油醚溫度為60?90°C，每次30mL，棄去石油醚液，水層加三氯甲烷振搖提取2次，每次30ml，合并三氯甲烷液，蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液； (2)取阿魏酰酪胺對照品適量，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對照品溶液； (3)照薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液和對照品溶液各10μ 1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇10: I為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈下檢視； (4)供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的石柑子的薄層色譜快速鑒別方法，其特征在于，其還包括以下步驟:(5)對步驟(I)?(4)進行耐用性考察，分別考察溫度、濕度及薄層板對該方法的影響，溫度為26°C或4°C，濕度為35 %或88 %，薄層板為自制或Merck生產(chǎn)的薄層板。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種石柑子的薄層色譜快速鑒別方法，基于薄層色譜技術(shù)鑒別石柑子中阿魏酰酪胺成分。該方法屬于快速測定方法，方法簡單、準(zhǔn)確，靈敏度高，精密度、穩(wěn)定性好，非常有利于在制藥過程中石柑子藥材快速質(zhì)量控制中的應(yīng)用。
【IPC分類】G01N30/90
【公開號】CN105092771
【申請?zhí)枴緾N201510127362
【發(fā)明人】孫冬梅, 羅文匯, 劉布鳴, 鐘鳴, 畢曉黎, 邱宏聰, 陳昭, 賴茂祥, 胥愛麗, 江潔怡
【申請人】廣東省第二中醫(yī)院（廣東省中醫(yī)藥工程技術(shù)研究院）, 廣西壯族自治區(qū)中醫(yī)藥研究院
【公開日】2015年11月25日
【申請日】2015年3月23日