一種利巴韋林分子印跡電位型傳感器的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于材料技術(shù)領(lǐng)域，設(shè)及一種電位型傳感器的制備方法，具體設(shè)及利己韋 林分子印跡電位型傳感器的制備方法，可應(yīng)用于食品、藥品、環(huán)境樣品中利己韋林的分析。
【背景技術(shù)】 陽00引利己韋林化ibavirin)是一種廣譜抗病毒的藥物，可W抑制多種DNA或RNA病毒的生長(zhǎng)，臨床上被廣泛應(yīng)用于治療慢性丙型肝炎、甲型或乙型流感病毒、 帶狀瘤疹、病毒引起的鼻炎、咽炎、急性上呼吸道感染等巧eddyKRJournalof Hepatology, 2009, 50:402 - 411 ;余文英，亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2010,6(11) : 175-177 ;梁益輝等， 中醫(yī)臨床研究，2012, 4(20) : 46-47)。由于利己韋林是人用藥，用于動(dòng)物病毒性疾病缺乏科 學(xué)、有效的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，因此中國(guó)在2005年禁止將利己韋林應(yīng)用于動(dòng)物上（余文英，亞太傳 統(tǒng)醫(yī)藥，2010, 6 (11) : 175-177)。在2012年，我國(guó)發(fā)生了 "速生雞"事件，有些養(yǎng)殖戶為了提 高自身利益，違規(guī)將利己韋林作為獸藥使用或者添加到飼料中給白羽雞喂食，使它能快速 生長(zhǎng)。不幸的是利己韋林會(huì)在動(dòng)物體內(nèi)殘留，人類食用運(yùn)些雞肉會(huì)間接攝入利己韋林，易在 人體內(nèi)產(chǎn)生耐藥性，還可能會(huì)產(chǎn)生溶血性貧血、致崎、生殖毒性等不良反應(yīng)，對(duì)人體健康造 成損害。因此，開發(fā)一種簡(jiǎn)便快速、經(jīng)濟(jì)、可靠的方法用于日常監(jiān)控利己韋林藥物制劑和飼 料質(zhì)量、藥物檢測(cè)對(duì)實(shí)驗(yàn)室有重要的意義。 W03]目前，有關(guān)利己韋林的檢測(cè)方法主要有紫外分光光度計(jì)（林紅等，兒 科藥學(xué)雜志，2003,9 (5): 21-22)、毛細(xì)管電泳法（MichaelC，Electrophores is, 2004, 25:1615-1622)、高效液相色譜法-串聯(lián)質(zhì)譜法（MargaritaM，Journal of曲armaceuticalandBiomedicalAnalysis, 2009, 49:1233 - 1240)、液相色 譜-串聯(lián)質(zhì)譜法值arlingtonD,ClinicaQiimicaActa, 2011, 12:2332-233f5)、 高效液相色譜法（AntonioDA,Journalof化armaceuticalandBiomedical Analysis, 2012,66:376-380)、膠束液相色譜法（MohieSED,JournalofLiquid Qiromatography&RelatedTechnologies, 2014, 37:1785-1804)等。但運(yùn)些方法的分析時(shí)間 長(zhǎng)，需要復(fù)雜的前處理，且所用儀器昂貴，選擇性不高。
[0004] 電位傳感器由一臺(tái)電位計(jì)和一對(duì)電極（指示電極和參比電極）組成，是一種 儀器設(shè)備最簡(jiǎn)單的檢測(cè)技術(shù)之一。電位傳感器具有操作簡(jiǎn)單，易于微型化，所使用儀器 價(jià)格低廉，具有選擇性高、線性范圍寬、分析時(shí)間短、可用于實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)的優(yōu)點(diǎn)，且樣品不 需要復(fù)雜的前處理。目前用于電位傳感器測(cè)試的選擇性指示電極主要有氣離子選擇性 電極、氯離子電位傳感器、鉛離子電位傳感器等。由于商品可用的指示電極多為無機(jī)陰 陽離子，種類少，嚴(yán)重限制了其在生產(chǎn)實(shí)際中的應(yīng)用。為解決運(yùn)一問題，人們開發(fā)了分 子印跡電化學(xué)傳感器，如諾氣沙星分子印跡電位傳感器（Felis分鐘aTC,Mic;rochim Acta, 2011, 172:15-23)、沒食子酸分子印跡電化學(xué)傳感器（YanM,Biosensorsand Bioelectronics, 2011，28:291-297)、克倫特羅分子印跡電位傳感器化iangRN,ChinJ Anal化em，2012, 40 (3) ,354-358)、茶堿分子印跡膜電化學(xué)傳感器（譚學(xué)才等，化學(xué)學(xué)報(bào)， 2012, 70巧）：1088-1094)等，但文獻(xiàn)報(bào)道多為分子印跡伏安傳感器，分子印跡電位傳感器 很少，主要原因是分子印跡電位傳感器存在響應(yīng)不夠快，檢出限相對(duì)高。為加快響應(yīng)時(shí)間， Basoz油al提出在制備分子印跡聚合物敏感膜時(shí)，加入陽離子或陰離子交換劑等措施降低 陰離子的干擾，提高膜的導(dǎo)電性和靈敏度，其線性范圍為1. 0X10 6~1. 0X10 2mol/l，斜 率29.OmV/decade，檢出限1. 12X10 6mol/L，響應(yīng)時(shí)間小于20秒，抑使用范圍為3~5， 使用壽命為10天，應(yīng)用于酒和魚樣品中組胺的檢測(cè)，加標(biāo)回收率在99. 3%~101. 7%之間 (BasozabalI,BiosensorsandBioelectronics, 2014, 58:138-144)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 為了解決電位傳感器存在響應(yīng)不夠快，檢出限相對(duì)高的問題，本發(fā)明的目的在于 提供一種利己韋林分子印跡電位型傳感器的制備方法，所制備的利己韋林分子印跡電位型 傳感器能應(yīng)用于飼料、利己韋林注射液、利己韋林片劑的檢測(cè)，建立一種簡(jiǎn)便快速、經(jīng)濟(jì)、可 靠的檢測(cè)飼料、利己韋林注射液、利己韋林片劑樣品中利己韋林的方法。
[0006] 本發(fā)明所述的一種利己韋林分子印跡電位型傳感器的制備方法，其包括W下步 驟：A.將利己韋林、甲基丙締酸溶于N，N-二甲基甲酯胺中，調(diào)抑值，超聲10分鐘，通氮?dú)?10分鐘，密封，于20-25°C進(jìn)行自組裝8小時(shí)；B.將乙二醇二甲基丙締酸醋、偶氮二異下臘 加入上述混合物中，超聲10分鐘，通氮?dú)?0分鐘，密封，水浴下攬拌反應(yīng)，得到利己韋林分 子印跡聚合物；C.將聚合物用體積比為6:2:2的甲醇：乙酸：水混合液洗脫，然后用乙醇、 水洗至中性，干燥；D.取聚氯乙締、癸二酸二辛醋和氧化石墨締，溶于四氨巧喃，超聲分散 石墨締，再加入利己韋林分子印跡聚合物，攬拌混合均勻，倒入燒杯中揮發(fā)，得到利己韋林 分子印跡聚合物敏感膜化將敏感膜切成直徑為8mm的圓形切片，用導(dǎo)電膠將敏感膜粘在 聚氯乙締管頂端，得到利己韋林分子印跡電位型傳感器；電極的內(nèi)充液為含化C1的緩沖溶 液和利己韋林標(biāo)準(zhǔn)溶液。
[0007] 根據(jù)本發(fā)明所述的利己韋林分子印跡電位型傳感器的制備方法的進(jìn)一步特征在 于，所述步驟A中，利己韋林的量為0. 1~0.2mmol，甲基丙締酸的量為利己韋林摩爾用量的 5倍，N，N-二甲基甲酯胺的量為18~22血，調(diào)抑值是用冰醋酸調(diào)至抑4~5。
[0008] 根據(jù)本發(fā)明所述的利己韋林分子印跡電位型傳感器的制備方法的進(jìn)一步特征在 于，所述步驟B中，乙二醇二甲基丙締酸醋加入量為利己韋林摩爾用量的18倍，偶氮二異下 臘加入量為20~25mg。
[0009] 根據(jù)本發(fā)明所述的利己韋林分子印跡電位型傳感器的制備方法的進(jìn)一步特征在 于，所述步驟B中，水浴溫度為50~55°C，攬拌反應(yīng)時(shí)間為20~30小時(shí)。
[0010] 根據(jù)本發(fā)明所述的利己韋林分子印跡電位型傳感器的制備方法的進(jìn)一步特征在 于，所述步驟C中，干燥是在40~45°C真空干燥箱中進(jìn)行，干燥時(shí)間為36小時(shí)。
[0011] 根據(jù)本發(fā)明所述的利己韋林分子印跡電位型傳感器的制備方法的進(jìn)一步特征在 于，所述步驟D中，聚氯乙締的量為380~450mg，癸二酸二辛醋的用量為聚氯乙締用量的2 倍，氧化石墨締的量為10~15mg。
[0012] 根據(jù)本發(fā)明所述的利己韋林分子印跡電位型傳感器的制備方法的進(jìn)一步特征在 于，所述步驟D中，四氨巧喃的用量為17~25mU超聲時(shí)間為40~60分鐘。
[0013] 根據(jù)本發(fā)明所述的利己韋林分子印跡電位型傳感器的制備方法的進(jìn)一步特征在 于，所述步驟B中，加入利己韋林分子印跡聚合物的量為80~lOOmg。
[0014] 根據(jù)本發(fā)明所述的利己韋林分子印跡電位型傳感器的制備方法的進(jìn)一步特征在 于，所述步驟D中，攬拌采用磁力攬拌方式，攬拌速度為3(K)r/min，攬拌時(shí)間為30~40分 鐘；倒入燒杯為平均倒在4個(gè)lOmL燒杯中；敏感膜的厚度為0. 3~0. 4mm。
[0015] 根據(jù)本發(fā)明所述的利己韋林分子印跡電位型傳感器的制備方法的進(jìn)一步特征在 于，所述步驟E中，電極內(nèi)充化C1溶液