一種麥蚜室內(nèi)生物測(cè)定的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及植物保護(hù)領(lǐng)域，具體地說，涉及一種麥蚜室內(nèi)生物測(cè)定的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 麥蚜是世界性的危害麥類作物的重要害蟲之一，在我國南北麥區(qū)均有發(fā)生，種類 主要包括麥長管蚜、麥二叉蚜、禾谷縊管蚜等。麥蚜不僅能直接刺吸植物營養(yǎng)，而且排泄的 大量蜜露也嚴(yán)重影響麥苗的呼吸和光合作用，同時(shí)也是傳播植物病毒的重要媒介，對(duì)農(nóng)業(yè) 生產(chǎn)造成重大的經(jīng)濟(jì)損失。目前，麥蚜主要依靠化學(xué)方法防治，但由于麥蚜生活周期短，繁 殖量大而快，防治次數(shù)多，用藥量大及單劑的不合理使用，致使麥蚜對(duì)一些常用藥劑產(chǎn)生了 不同程度抗藥性。
[0003] 害蟲抗藥性監(jiān)測(cè)是害蟲抗性有效治理的重要基礎(chǔ)。生物測(cè)定作為害蟲抗藥性監(jiān)測(cè) 的重要技術(shù)手段，它不僅能反映害蟲對(duì)哪些殺蟲藥劑產(chǎn)生了抗性，而且能準(zhǔn)確給出抗性程 度，對(duì)于及時(shí)調(diào)整抗性治理策略具有重要的實(shí)踐意義。
[0004] 關(guān)于麥蚜生物測(cè)定技術(shù)主要有點(diǎn)滴法，帶蟲浸葉法，玻璃管藥膜法，葉片藥膜法 等。其中點(diǎn)滴法因?yàn)樾枰_的點(diǎn)滴器，同時(shí)要求操作人員有較高的技術(shù)，因此應(yīng)用不多。 帶蟲浸葉法，由于蚜蟲易落和個(gè)體較小等原因致使供試?yán)ハx損傷大和對(duì)照組死亡率較高， 影響生測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。玻璃管藥膜法，雖然操作簡便，但只能測(cè)定觸殺毒性，不能測(cè)定胃 毒抗性。葉片藥膜法則因?yàn)槠洳僮骱啽阋子趯?shí)施，且對(duì)觸殺性和胃毒性藥劑都適用，因而在 蚜蟲的生物測(cè)定中得到廣泛應(yīng)用，然而由于麥蚜個(gè)體小，寄主主要為禾本科植物，葉片容易 水分丟失等原因?qū)е履壳安捎玫娜~片藥膜法都不太理想，如常使用的培養(yǎng)皿作為容器的葉 片藥膜法，其空間密閉，蚜蟲容易逃逸，且占用空間大以及濕度難控制等問題影響了生物測(cè) 定結(jié)果的準(zhǔn)確性。
[0005]

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 為了解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的問題，本發(fā)明的目的是提供一種麥蚜室內(nèi)生物測(cè)定的 方法。
[0007] 為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的，本發(fā)明的技術(shù)方案如下：
[0008] -種麥蚜室內(nèi)生物測(cè)定的方法，所述方法利用塑料滴管（塑料刻度吸管）作為生 測(cè)器皿。
[0009] 進(jìn)一步地，所述方法包括如下步驟：
[0010] 1)將塑料滴管扎出3~6個(gè)小孔，孔直徑小于2mm ;
[0011] 作為優(yōu)選，在塑料滴管底部扎孔；
[0012] 2)將麥苗浸入待測(cè)殺蟲劑10~20秒，取出置陰涼通風(fēng)處晾干，放入塑料滴管中；
[0013] 3)以7~8頭/mL的密度接入無翅成年麥姐，并用透氣性材質(zhì)（如棉花，紗布等） 將塑料滴管封口；
[0014] 4)將塑料滴管置于恒溫室內(nèi)，48h后檢查死亡率，計(jì)算毒力測(cè)定結(jié)果。
[0015] 進(jìn)一步地，所述塑料滴管的容量大于等于3mL。
[0016] 作為優(yōu)選，所述塑料滴管的容量為3mL。
[0017] 在本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】中，使用的塑料滴管為購自江蘇康健華醫(yī)療用品有限公 司的3mL塑料滴管，商品名稱為：吸管（采樣容器）。
[0018] 進(jìn)一步地，塑料滴管中麥苗的數(shù)量為2~3根/mL。
[0019] 進(jìn)一步地，所述麥苗選擇長勢(shì)良好并處于幼嫩階段的麥苗，優(yōu)選培育10天的麥 苗，從基部剪下。
[0020] 進(jìn)一步地，所述麥蚜為田間麥蚜種群在室內(nèi)培育多代得到的麥蚜。
[0021] 進(jìn)一步地，檢查死亡率的標(biāo)準(zhǔn)為：輕觸蚜蟲，只有一條腿動(dòng)或者完全不動(dòng)的記為死 亡。
[0022] 進(jìn)一步地，計(jì)算毒力測(cè)定結(jié)果為：用POLO軟件計(jì)算獲得LC5q (Lethal Concentration of 50% )〇
[0023] 本發(fā)明的有益效果在于：
[0024] 本發(fā)明提供的麥蚜室內(nèi)生物測(cè)定的新方法，為采用塑料滴管作為生物測(cè)定工具的 麥苗藥膜法，并采用棉花封口，操作簡便，節(jié)省空間，且減少生物測(cè)定過程中操作對(duì)供試蚜 蟲產(chǎn)生的損傷及誤差。另外在塑料滴管中放置麥苗，能夠較理想的保持麥苗的濕度，有效保 證生物測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性。本發(fā)明提供的麥蚜藥膜法室內(nèi)生物測(cè)定新方法，能夠了解麥蚜 田間種群對(duì)不同作用機(jī)理藥劑的抗性水平及其分布，進(jìn)而更科學(xué)地指導(dǎo)田間用藥。
[0025] 本發(fā)明提供的技術(shù)方案，既保持了麥苗正常狀態(tài)，又保證了麥苗新鮮度，同時(shí)又在 封閉的環(huán)境中保持了透氣性，且免除了開放外界環(huán)境不確定因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，符合 生物實(shí)驗(yàn)保持單一變量的原則。
【附圖說明】
[0026] 圖1為本發(fā)明生物測(cè)定所使用的塑料滴管。
[0027] 圖2為本發(fā)明生物測(cè)定時(shí)棉花封口的塑料滴管。
[0028] 圖3為十二孔細(xì)胞培養(yǎng)板葉片藥膜法的生物測(cè)定示意圖。
[0029] 圖4為使用十二孔細(xì)胞培養(yǎng)板葉片藥膜法實(shí)驗(yàn)時(shí)麥蚜的逃逸情況。
[0030] 圖5為使用十二孔細(xì)胞培養(yǎng)板葉片藥膜法實(shí)驗(yàn)時(shí)實(shí)驗(yàn)麥苗的干枯情況。
【具體實(shí)施方式】
[0031] 以下實(shí)施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。
[0032] 實(shí)施例1氟啶蟲胺氰對(duì)禾谷縊管蚜的敏感毒力基線的建立
[0033] 1、研究對(duì)象
[0034] 實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)多年不接觸任何藥劑的禾谷縊管蚜種群。
[0035] 2、方法
[0036] 供試藥劑為濃度大于95%的氟啶蟲胺腈原藥，采用塑料滴管葉片藥膜法，進(jìn)行室 內(nèi)毒力測(cè)定。
[0037] 2. 1原藥母液的配制及稀釋
[0038] 將原藥溶解于丙酮，定容后存放于藥劑瓶中，封口膜封口，4°C冰箱保存。毒力測(cè)定 前，用含0. 01 % (v/v) TritonX-IOO的蒸餾水稀釋至各濃度，備用。
[0039] 2. 2生物測(cè)定葉片的選擇及使用
[0040] 選用室內(nèi)水培法培育10天左右的新鮮麥苗，麥苗用干凈剪刀從基部剪下，長度 約為IOcm左右，每個(gè)吸管準(zhǔn)備8個(gè)麥苗。將麥苗浸入各藥劑稀釋濃度15s，取出后置陰涼 通風(fēng)處晾干后，置于底部用尖頭鑷子扎過4個(gè)小孔的塑料滴管中，其中對(duì)照組麥苗單獨(dú)用 0· 01% TritonX-IOO的蒸餾水處理