一種檢測阿普斯特原料中雜質(zhì)含量的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種檢測阿普斯特原料中雜質(zhì)含量的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 乙氧基-4-甲氧基苯基）-2-甲基磺?；野返腘-乙酰基-L-亮氨酸鹽 (如式I所示），是一種重要的藥物原料，目前主要用于制備治療銀肩病性關(guān)節(jié)炎的口服藥 物:阿普斯特(其化學(xué)名稱為(S)-2-[l-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺?；一鵠-4-乙 酰基氨基異吲噪啉 _1，3-二酮，分子式為C22H24N2O7S，分子量為460.5);以式I所不化合物為 原料制備阿普斯特的合成路線如下（參見：陳建超.阿普斯特(apremilast).中國藥物化學(xué) 雜志.2014年10月，第24卷，第5期，總121期）：
[0003]
[0004]由于受到操作水平和控制水平的限制，現(xiàn)有式I所示化合物的產(chǎn)品中往往會存在 少量的對映異構(gòu)體雜質(zhì)：（R)-1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基）-2-甲基磺酰基乙胺的N-乙酰 基-L-亮氨酸鹽，該雜質(zhì)會在阿普斯特的制備過程中，生成阿普斯特的R型對映異構(gòu)體雜質(zhì)： (R)-2-[l-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺酰基乙基]-4-乙?；被愡胚徇?1,3-二 酮，該對映異構(gòu)體是已報道的雜質(zhì)（參見：中國專利CN 104792913 A說明書的第[0002]段）， 它直接影響著阿普斯特的產(chǎn)品質(zhì)量和患者的用藥安全。
[0005] 為了進(jìn)一步保證阿普斯特的產(chǎn)品質(zhì)量和患者的用藥安全，有必要對式I所示化合 物的產(chǎn)品質(zhì)量進(jìn)行監(jiān)控，特別是，需要發(fā)明一種新方法，對式I所示化合物的產(chǎn)品中對映異 構(gòu)體含量進(jìn)行檢測。而且，根據(jù)目前的檢索情況來看，現(xiàn)有技術(shù)中也未見有對式I所示化合 物的產(chǎn)品中對映異構(gòu)體含量進(jìn)行檢測的相關(guān)報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的在于提供一種檢測式I所示化合物的產(chǎn)品中對映異構(gòu)體含量的方 法。
[0007] 本發(fā)明提供的一種檢測式I所示化合物的產(chǎn)品中對映異構(gòu)體含量的方法，包括以 下步驟：
[0008]
式I
[0009] a、取式I所示化合物的對映異構(gòu)體，制備對照品溶液，用正相高效液相色譜方法進(jìn) 行檢測，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線；
[0010] b、取式I所示化合物的產(chǎn)品，制備供試品溶液，用正相高效液相色譜方法進(jìn)行檢 測；
[0011] c、計算式I所示化合物的產(chǎn)品中對映異構(gòu)體的含量；
[0012]步驟a和b所用正相高效液相色譜方法的色譜條件為：
[0013]色譜柱:用直鏈淀粉-三(3-氯-4甲基苯基氨基甲酸酯)鍵合的硅膠為填充劑；
[0014] 流動相:〇5~〇7正烷烴-&~(：3醇，〇5~〇7正烷烴與(： 1~(：3醇的體積比為70:30~90: 10;
[0015] 檢測波長為230nm~240nm。
[0016] 進(jìn)一步的，步驟a中，制備對照品溶液的溶劑為流動相，對照品溶液的濃度為0.5~ 1 lμg/ml;步驟b中，制備供試品溶液的溶劑為流動相，供試品溶液的濃度為0.4~0.6mg/ml。 [0017]進(jìn)一步的，所述的色譜條件中，色譜柱的內(nèi)徑為4.6mm，長度為250mm，填充劑粒徑 為 5μηι〇
[0018] 進(jìn)一步的，色譜柱為CHIRALPAK IF。
[0019] 進(jìn)一步的，所述的色譜條件中，色譜柱的柱溫為30°C~40°C;優(yōu)選的，色譜柱的柱 溫為30°C~35°C。
[0020] 進(jìn)一步的，所述的色譜條件中，C6~C7正烷烴選自正己烷或正庚烷，醇選自 甲醇、乙醇或異丙醇。
[0021] 進(jìn)一步的，所述的色譜條件中，C6~C7正烷烴與心~(：3醇的體積比為70:30~85: 15;優(yōu)選的，C 6~C7正烷烴與醇的體積比為70:30~80:20;更優(yōu)選的，C6~C7正烷烴與 &~(： 3醇的體積比為75:25。
[0022]進(jìn)一步的，所述的色譜條件中，流動相的流速為0.8ml/min~1.2ml/min;優(yōu)選的， 流動相的流速為〇.8ml/min~1 .Oml/min。
[0023]進(jìn)一步的，所述的色譜條件中，檢測波長為232±2nm。
[0024] 進(jìn)一步的，所述的色譜條件中，進(jìn)樣量為20μ1。
[0025] 本發(fā)明中，式I所示化合物的對映異構(gòu)體，其名稱為(R)-l_(3-乙氧基-4-甲氧基苯 基)-2-甲基磺酰基乙胺的N-乙?；?L-亮氨酸鹽，其結(jié)構(gòu)如式Π 所示：
[0026]
[0027] 本發(fā)明中，Acetyl表示乙?；?，Leucine表示亮氨酸;C6~C7正烷烴表示含有6個或7 個碳原子的正烷烴，即正己烷和正庚烷;&~C3醇表示含有1個~3個碳原子的低級醇，即甲 醇、乙醇和丙醇。
[0028] 本發(fā)明中，標(biāo)準(zhǔn)曲線是對照品色譜峰的峰面積與對照品濃度之間的線性關(guān)系方 程。
[0029] 本發(fā)明提供了一種檢測式I所示化合物的產(chǎn)品中對映異構(gòu)體含量的方法，式I所示 化合物色譜峰與對映異構(gòu)體色譜峰之間的分離度高；而且，操作簡便，容易控制，檢測成本 低，并具有良好的線性關(guān)系、專屬性、精密度、穩(wěn)定性、靈敏度和重復(fù)性，檢測結(jié)果準(zhǔn)確、可 靠，為監(jiān)控式I所示化合物的產(chǎn)品質(zhì)量提供了一種行之有效的檢測方法，并進(jìn)一步保證了阿 普斯特的產(chǎn)品質(zhì)量和患者的用藥安全。
[0030] 顯然，根據(jù)本發(fā)明的上述內(nèi)容，按照本領(lǐng)域的普通技術(shù)知識和慣用手段，在不脫離 本發(fā)明上述基本技術(shù)思想前提下，還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。
[0031]以下通過實施例形式的【具體實施方式】，對本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進(jìn)一步的詳細(xì)說 明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容 所實現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。
【附圖說明】
[0032] 圖1為實施例1中本發(fā)明方法進(jìn)行系統(tǒng)適用性試驗的檢測結(jié)果。
[0033] 圖2為實施例1中對比試驗方法對混合溶液的檢測結(jié)果。
[0034]圖3為試驗例3的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。
[0035]圖4為試驗例4中供試品溶液的檢測結(jié)果。
[0036] 圖5為試驗例4中對照品溶液的檢測結(jié)果。
[0037] 圖6為試驗例4中流動相空白溶液的檢測結(jié)果。
【具體實施方式】
[0038] 本發(fā)明【具體實施方式】中使用的原料、設(shè)備均為已知產(chǎn)品，通過購買市售產(chǎn)品獲得。 [0039] 高效液相色譜儀(型號:LC_20AT二元栗，生產(chǎn)廠家：日本島津公司）。
[0040] 電子天平(型號:AUW220D，生產(chǎn)廠家：日本島津公司）。
[0041]式I所示化合物的產(chǎn)品：通過購買蘇州卡普維爾醫(yī)藥科技有限公司的市售產(chǎn)品獲 得，產(chǎn)品批號為20140428。
[0042]
式I
[0043] 式I所示化合物的對映異構(gòu)體(如式Π 所示），作為對照品:通過購買蘇州卡普維爾 醫(yī)藥科技有限公司的市售產(chǎn)品獲得，產(chǎn)品批號為20140428。
[0044]
[0045] 實施例1
[0046] 1、確定檢測波長
[0047]精密稱取式I所示化合物的產(chǎn)品適量，用流動相（正己烷-甲醇= 75: 25)配制成濃 度為20μg/ml的溶液，作為供試品溶液。
[0048]精密稱取對照品（對映異構(gòu)體)適量，用流動相(正己烷-甲醇= 75:25)配制成濃度 為20μg/ml的溶液，作為對照品溶液。
[0049]取上述的供試品溶液、對照品溶液，在200nm~400nm波長范圍內(nèi)進(jìn)行掃描，試驗結(jié) 果見表1。
[0050]表1、本發(fā)明的紫外掃描結(jié)果
L〇〇52J 試驗結(jié)果表明，檢測波長在230nm~240nm范圍內(nèi)，均適合本發(fā)明的高效液相色譜 檢測方法;優(yōu)選的，檢測波長為232 ± 2nm。
[0053] 2、高效液相色譜檢測方法
[0054]采用正相高效液相色譜進(jìn)行檢測：
[0055] 色譜柱：用直鏈淀粉-三(3-氯-4甲基苯基氨基甲酸酯)鍵合的硅膠為填充劑的色 譜柱;如:色譜柱的型號為CHIRAL PAK IF，規(guī)格為：內(nèi)徑為4.6mm，長度為250mm，填充劑粒徑 為 5μηι;
[0056] 流動相:正己烷-甲醇(體積比為75:25);
[0057] 柱溫:35°C;
[0058] 流速：1 .Oml/min;
[0059] 檢測波長：232nm;
[0060] 進(jìn)樣量：20μ1。
[0061] 系統(tǒng)