氯雷他定的氣相色譜分析方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及化學(xué)藥品質(zhì)量檢測領(lǐng)域，具體涉及一種化學(xué)藥品氯雷他定的氣相色譜 分析方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 氯雷他定(4-(8-氯-5,6-二氫-11H-苯并[5,6]-環(huán)庚并[l，2-b]吡啶-ll-烯基)-1-哌啶羧酸乙酯），分子式為C 22H23ClN202，為一種抗組胺藥品，用于過敏性鼻炎、急性或慢性蕁 麻疹、過敏性結(jié)膜炎、花粉癥及其他過敏性皮膚病。
[0003] 該品種中華人民共和國2015版藥典規(guī)定的檢測方法有高氯酸滴定法、液相色譜 法，尚無采用氣相色譜法進(jìn)行測定。然而，高氯酸滴定法操作繁瑣，需要空白校正，滴定條件 要求較高;液相色譜法，需要配置緩沖鹽，調(diào)節(jié)PH值，理論板數(shù)低且檢測沒有氣相色譜法檢 測靈敏度高。
[0004] 鑒于氣相色譜檢測具有高分離性能、高檢測性能、分析時(shí)間相對(duì)較快，而且現(xiàn)有電 子捕獲檢測器(electron capture detector)，簡稱ECD，是一種離子化檢測器，它是一個(gè)有 選擇性的高靈敏度的檢測器，它只對(duì)具有電負(fù)性的物質(zhì)，如含鹵素、硫、磷、氮的物質(zhì)有信 號(hào)，物質(zhì)的電負(fù)性越強(qiáng)，也就是電子吸收系數(shù)越大，檢測器的靈敏度越高，而對(duì)電中性(無電 負(fù)性)的物質(zhì)，如烷烴等則無信號(hào)。因此，有必要研究開發(fā)一種GC-ECD氣相色譜檢測方法，從 而更全面的控制氯雷他定制劑的質(zhì)量。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 為解決上述技術(shù)問題，從而更全面的控制氯雷他定的質(zhì)量。本發(fā)明提供了一種氯 雷他定的氣相色譜分析方法，利用GC-ECD測定氯雷他定含量，具體操作步驟如下：
[0006] (1)對(duì)照品溶液的配制
[0007] 精密稱取10mg的氯雷他定對(duì)照品，置100ml容量瓶中，加入無水乙醇溶液，稀釋至 刻度，得對(duì)照品溶液，備用。
[0008] (2)供試品溶液的配制
[0009] 取樣品細(xì)粉適量(約相當(dāng)于氯雷他定10mg)，精密稱定，置100ml容量瓶中，加入無 水乙醇溶液，稀釋至刻度，搖勻，濾過，得供試品溶液，備用。
[0010] ⑶色譜條件
[0011] 色譜柱:DB_5毛細(xì)管色譜柱；
[0012] 載氣:氮?dú)猓?br>[0013]進(jìn)樣 口溫度:280 ~300°C;
[0014] 柱溫箱溫度：250~29(TC;
[0015] 檢測器溫度:300 °C;
[0016] 載氣流速:0 · 5~1 · 5ml/min，隔墊吹掃量:3ml/min，尾吹：35ml/min，分流比：30~ 99:1的色譜條件；
[0017] 進(jìn)樣量：1μ1;
[0018] 檢測器:μΕ⑶檢測器。
[0019] (4)測定:分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各?μL，注入氣相色譜儀，測定， 記錄20min的色譜圖，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。
[0020] 外標(biāo)法公式:含量(Cx)=CrXAx+Ar
[0021] CR為對(duì)照品的濃度;Αχ為供試品的峰面積;Ar為對(duì)照品的峰面積。
[0022] 作為本發(fā)明的優(yōu)選，步驟(3)色譜條件：毛細(xì)管色譜柱為Agilentl23-503230mX 320μπι X 0.25μπι;流動(dòng)相：氮?dú)猓惠d氣流速1.5ml/min;進(jìn)樣口溫度：300 °C ;柱溫箱溫度：280 °C ;檢測器溫度:300°C ;分流比：50:1的色譜條件。
[0023]本發(fā)明優(yōu)點(diǎn)和積極效果:本發(fā)明建立了一種氣相色譜測定氯雷他定含量的方法。 該方法與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有操作簡單、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性和穩(wěn)定性好、精密度好、檢測靈敏度高 的特點(diǎn)，可進(jìn)行定性、定量、痕量分析氯雷他定(C22H23CIN2O)，可全面、更有效地控制該藥的 質(zhì)量。
【附圖說明】
[0024]圖1無水乙醇?xì)庀嗌V圖。
[0025]圖2氯雷他定對(duì)照品氣相色譜圖。
[0026]圖3氯雷他定片樣品氣相色譜圖。
[0027]圖4氯雷他定膠囊樣品氣相色譜圖。
[0028]圖5氯雷他定標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。
[0029]圖6氯雷他定檢出限氣相色譜圖。
【具體實(shí)施方式】
[0030] 以下結(jié)合附圖和【具體實(shí)施方式】對(duì)本發(fā)明作以進(jìn)一步的闡述，以便本領(lǐng)域的技術(shù)人 員更了解本發(fā)明，但并不以此限制本發(fā)明。
[0031] 儀器與試藥
[0032] 儀器：安捷倫7890B氣相色譜儀;Agilentl23-503230mX 320μπιX 0 · 25μπι毛細(xì)管色 譜柱；電子天平BT125D型萬分之一分析天平（上海精密科學(xué)儀器有限公司天平儀器廠制 造)。
[0033] 試藥:氯雷他定對(duì)照品（批號(hào)100615-201103;來源：中國食品藥品檢定研究院）；氯 雷他定膠囊（四川奧邦藥業(yè)有限公司；批號(hào)：140906,規(guī)格10mg);氯雷他定片（西安楊森制藥 有限公司；批號(hào)：150630444,規(guī)格10mg);氯雷他定片（海南新世通制藥有限公司；批號(hào)： 150704,規(guī)格10mg);無水乙醇(色譜純，天津市康科德科技有限公司，批號(hào)為080508)。
【具體實(shí)施方式】
[0034]
[0035] 實(shí)施例1
[0036] (1)對(duì)照品溶液的配制：精密稱取氯雷他定對(duì)照品10.0 Omg，置100ml量瓶中，加入 無水乙醇稀釋至刻度，制成每lml含100yg的對(duì)照品溶液，備用。
[0037] (2)氯雷他定片供試品溶液的配制:取本品20片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取總重量 二十分之一的樣品細(xì)粉（約相當(dāng)于氯雷他定l〇mg)，置100ml量瓶中，加無水乙醇適量，振搖 使氯雷他定溶解，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，用〇. 45μπι濾膜濾過，取濾液作為供試品溶 液，備用。
[0038] (3)氯雷他定膠囊供試品溶液的制備:取本品20粒，精密稱定，傾出內(nèi)容物，精密稱 定囊殼的重量，求出平均裝量，將內(nèi)容物混合均勻，稱取細(xì)粉108.14mg(約相當(dāng)于氯雷他定 10mg)，置100ml量瓶中，加無水乙醇適量，振搖使氯雷他定溶解，加無水乙醇稀釋至刻度，搖 勻，用0.45μηι濾膜濾過，取濾液作為供試品溶液，備用。
[0039] (4)色譜條件:進(jìn)樣口溫度設(shè)定為300°C，柱溫箱溫度設(shè)定為280°C，檢測器溫度設(shè) 定為300°C，載氣流速為1.5ml/min，隔墊吹掃量為3ml/min，尾吹35ml/min，分流比50:1的色 譜條件，進(jìn)樣量為1μ1，μΕ⑶檢測器，時(shí)間設(shè)定20min。
[0040]結(jié)果：由圖1-4可知，樣品中氯雷他定色譜峰，峰形對(duì)稱，溶劑色譜圖無干擾。
[0041 ]方法學(xué)考查
[0042] (1)線性關(guān)系:分別精密吸取氯雷他定對(duì)照品溶液濃度為100μg/ml溶液，0.1、1、3、 5、8、10mL，置10ml量瓶中，加無水乙醇稀釋至刻度。注入氣相相色譜儀，按照上述色譜條件 對(duì)樣品進(jìn)行測定，以峰面積為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，峰面積對(duì)濃度作線性方程。得線性方 程結(jié)果見表1。
[0043] 表1線性關(guān)系方程 「00441
[0045]上述結(jié)果表明，氯雷他定在1~lOOyg/mL范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系。見附圖5。 [0046]精密度實(shí)驗(yàn):精密吸取氯雷他定對(duì)照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，測定其峰面積，RSD分 另IJ為0.32 % (η = 6)，結(jié)果見表2.結(jié)果表明儀器精密度良好。
[0047] 表2精密度試驗(yàn)結(jié)果
[0048]
[0049] 穩(wěn)定性試驗(yàn):取同一樣品溶液，按照上述色譜條件分別做0、3、6、9和12h的色譜圖， 測定其穩(wěn)定性，氯雷他定的峰面積的RSD分別為0.74%，由實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)說明樣品溶液在12h內(nèi) 基本穩(wěn)定，該方法穩(wěn)定性良好，結(jié)果見表3。
[0050] 表3穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果
[0051]
[0052] 重復(fù)性實(shí)驗(yàn):取同一批號(hào)的樣品6份，按照供試品溶液的制備方法制備溶液并依照 上述色譜條件測定，結(jié)果氯雷他定含量的RSD分別為0.83%，理論板數(shù)均大于30000，表明方 法重復(fù)性良好。表明方法重復(fù)性良好，結(jié)果見表4。
[0053]表4重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果
[0054]
[0055] 檢出限:精密稱取標(biāo)準(zhǔn)品5.32mg，置50ml量瓶中，加無水乙醇稀釋至刻度，溶解，搖 勻，精密量取〇. lml，置100ml量瓶中，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻。再精密量取lml，置30ml 量瓶中，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻。同供試品測定方法測定，分流比改為不分流，檢出限 濃度為:3.5ng/ml。結(jié)果見圖6。
[0056]回收率試驗(yàn):精密稱取已知含量的供試品6份(批號(hào)為150704)，按表2順序分別依 次精密加入用無水乙醇配置成濃度為0.53mg/ml氯雷他定對(duì)照品lml、lml、2ml、2ml、3ml、 3ml，按供試品制備方法制備，測定方法同供試品測定方法操作，計(jì)算其加標(biāo)回收率，結(jié)果見 表5〇
[0057]表5回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果 [0058]
[0059]氯雷他定的平均回收率為99.6%，結(jié)果表明該方法準(zhǔn)確率高。
[0060] 樣品含量測定:按上述色譜條件測定三批供試品溶液(標(biāo)示量均為10mg)，結(jié)果測 定樣品中含氯雷他定值見表6。
[0061] 表6樣品含量測定結(jié)果
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種氯雷他定的氣相色譜分析方法，所述方法其特征在于:包括以下步驟： (1) 對(duì)照品溶液的配制 取1 Omg的氯雷他定對(duì)照品，精密稱重，置100ml容量瓶中，加入無水乙醇溶液，稀釋至刻 度，得對(duì)照品溶液，備用； (2) 供試品溶液的配制 取相當(dāng)于氯雷他定1 Omg的樣品細(xì)粉，精密稱定，置100ml容量瓶中，加入無水乙醇溶液， 稀釋至刻度，搖勻，濾過，得供試品溶液，備用； (3) 色譜條件 色譜柱:DB-5毛細(xì)管色譜柱； 載氣:氮?dú)猓? 進(jìn)樣口溫度:280~300 °C; 柱溫箱溫度:250~290 °C; 檢測器溫度:300°C; 載氣流速:〇 · 5~1 · 5ml/min，隔墊吹掃量:3ml/min，尾吹：35ml/min，分流比：30~99:1 的色譜條件； 進(jìn)樣量：1μ1; 檢測器:此⑶檢測器； (4) 測定:分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各?μL，注入氣相色譜儀，測定，記錄 20min的色譜圖，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得； 外標(biāo)法公式:含量(Cx) =CrXAx+Ar Cr為對(duì)照品的濃度;Αχ為供試品的峰面積;Ar為對(duì)照品的峰面積。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種氯雷他定的氣相色譜分析方法，其特征在于：步驟(3)所 述色譜條件：色譜柱為Agilent 123-503230mX 320μπιX 0.25μπι;載氣流速：1.5mL/min;進(jìn)樣 口溫度:300°C ;柱溫箱溫度:280°C ;檢測器溫度:300°C ;分流比：50:1。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種氯雷他定的氣相色譜分析方法，所述方法包括以下步驟：（1）對(duì)照品溶液的配制；（2）供試品溶液的配制；（3）色譜條件：DB-5毛細(xì)管色譜柱；載氣：氮?dú)?；進(jìn)樣口溫度：280~300℃；柱溫箱溫度：250~290℃；檢測器溫度：300℃；載氣流速：0.5~1.5ml/min，隔墊吹掃量：3ml/min，尾吹：35ml/min，分流比：30~99:1的色譜條件；進(jìn)樣量：1μl；檢測器：μECD檢測器；（4）測定：分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各1μl，注入氣相色譜儀，測定，記錄20min的色譜圖，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。該方法與現(xiàn)有技術(shù)相比，操作簡單、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性和穩(wěn)定性好、精密度好、檢測靈敏度高，可全面、更有效地控制該藥的質(zhì)量。
【IPC分類】G01N30/02
【公開號(hào)】CN105675746
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201610023869
【發(fā)明人】孫艷濤, 趙磊, 姜大雨, 王良, 喬春玉
【申請(qǐng)人】吉林師范大學(xué)
【公開日】2016年6月15日
【申請(qǐng)日】2016年1月14日