一種測(cè)定水產(chǎn)品接觸材料中鄰苯二甲酸酯的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種測(cè)定水產(chǎn)品接觸材料中鄰苯二甲酸酯的方法，水產(chǎn)品接觸材料洗凈，曬干后稱重，在浸泡液中浸泡，備用；在浸泡液中加入萃取劑，萃取完成后收取萃取層蒸發(fā)，置于樣品瓶?jī)?nèi)備用；樣品用加壓毛細(xì)管電色譜儀進(jìn)行檢測(cè)，并計(jì)算結(jié)果。本發(fā)明使用的毛細(xì)管電色譜分離度更好，DAP和DCHP能很好的分離開來，且需要的樣品量很少，具有良好的線性關(guān)系，回收率和靈敏度較高，穩(wěn)定性和重現(xiàn)性較好，方法快速、準(zhǔn)確，操作方便，能滿足水產(chǎn)品接觸材料中鄰苯二甲酸酯的遷移量日常檢測(cè)需要，七種PAEs的回收率在81.8%–115.1%之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）在2.9%–9.7%之間。
【專利說明】
-種測(cè)定水產(chǎn)品接觸材料中鄰苯二甲酸醋的方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明設(shè)及水產(chǎn)品中有害化學(xué)成分分析測(cè)定技術(shù)領(lǐng)域，具體設(shè)及一種高效、快捷、 精確測(cè)定水產(chǎn)品接觸材料中鄰苯二甲酸醋的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 浙江省對(duì)于海洋水產(chǎn)品的需求量很大，傳統(tǒng)的海洋風(fēng)味水產(chǎn)品（如香酥帶魚、烤 島曼、烤銳魚絲等)多采用蒸煮袋真空包裝加高溫高壓殺菌技術(shù)來達(dá)到長(zhǎng)貨架期的目的，海洋 水產(chǎn)食品直接接觸的包裝材料所含的有害物質(zhì)已成為水產(chǎn)食品污染的重要來源。近幾年， 美國(guó)和歐盟等發(fā)達(dá)國(guó)家與組織對(duì)食品接觸材料的安全性越發(fā)重視，并且制定了相關(guān)法律和 標(biāo)準(zhǔn)來限定接觸材料中有害物質(zhì)的遷移量。歐盟定期發(fā)布預(yù)警通報(bào)，并采取了一些強(qiáng)制措 施(如拒絕進(jìn)口等），對(duì)我國(guó)出口貿(mào)易形象和企業(yè)的經(jīng)濟(jì)貿(mào)易造成了巨大損失。在眾多通報(bào) 中關(guān)于食品接觸材料中偶氮染料(芳香胺)和"塑化劑"（鄰苯二甲酸醋）的遷移量是被通報(bào) 最為頻繁的對(duì)象之一。
[0003] 鄰苯二甲酸醋(phthalic acid ester，PAE)，通常W液態(tài)存在，揮發(fā)性很低，有特 殊氣味，溶于大多有機(jī)溶液，有毒。鄰苯二甲酸醋類物質(zhì)，主要添加到聚氯乙締塑料中，令塑 膠由硬變軟，起到增塑劑的作用，在日常生活中應(yīng)用十分廣泛，容易與消費(fèi)者接觸。鄰苯二 甲酸醋是一種類環(huán)境激素，其作用相當(dāng)于雌性激素，當(dāng)人類攝入一定量，就能干擾內(nèi)分泌， 對(duì)人類的影響主要在于使其精子數(shù)量和精液量減少，精子的形態(tài)異常且運(yùn)動(dòng)能力低下，嚴(yán) 重時(shí)造成不孕不育。塑料制品中鄰苯二甲酸醋容易在特定條件下往與之接觸的食品中遷 移，從而危害人們的健康。遷移是指在特定條件下，有毒有害物質(zhì)從水產(chǎn)品接觸材料中溶 出，污染與之接觸的水產(chǎn)品，危害食用者的健康。現(xiàn)在，許許多多的材料用于食品包裝，運(yùn)些 材料中的有害物質(zhì)(例如鄰苯二甲酸醋)是否會(huì)發(fā)生遷移而危害健康，已經(jīng)受到社會(huì)各界的 密切關(guān)注。
[0004] 鄰苯二甲酸醋是一種環(huán)境內(nèi)分泌干擾物。美國(guó)環(huán)境保護(hù)署化nvironlnental Protect ion Agen 巧，EPA)將 DMP，DEP，DBP，DN0P，DEHP 和 BBP 6 種鄰苯二甲酸醋類化合物列 為重點(diǎn)污染物。歐盟頒布法令規(guī)定，進(jìn)口至其市場(chǎng)的食品接觸材料中DEHP，DBP，BBP，DINP， DIDP和DN0P等6種鄰苯二甲酸醋含量不得超出其限量(0.1%)。同時(shí)歐盟規(guī)定，鄰苯二甲酸 醋每人每天的全部耐受量為〇.3mg/kg體重每天。英國(guó)農(nóng)漁食品部則規(guī)定DEHP，DBP和DEP的 每日耐受量分別為0.05mg/kg，0.05mg/kg和0.2mg/kg體重每天。而世界衛(wèi)生組織（the World Health 0巧anization，簡(jiǎn)稱W冊(cè))規(guī)定DEHP在飲用水中的最高濃度為0.008mg/L。
[0005] 我國(guó)食品添加劑相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)GB 9685-2008中規(guī)定，DEHP、DINP、DBP可W按生產(chǎn)需要 使用量用在塑料?！?、？？、？5、45、485、?4、?61\?0、？￥〇、涂料、橡膠、黏合劑生產(chǎn)中，但運(yùn)些材 料不得接觸油脂性食品與嬰幼兒食品，且特定遷移量/最大殘留量(SML)分別為1.5mg/kg、 9. Omg/kg、0.3mg/kg，DIBP在PVC中最大使用量為10 %。鄰苯二甲酸醋檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)GB/T 21911 - 2008規(guī)定：鄰苯二甲酸醋在油性食品中的檢出限為1.5mg/kg，非油性食品中的檢出限為 0.05mg/kg。
[0006] 目前我國(guó)的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)中，對(duì)于人們?nèi)粘Ｉ钪谐＝佑|到的食品中相關(guān)增塑劑含量 的限量不明確，例如塑料桶裝食用油，塑料包裝的油炸食品等。解決增塑劑的污染問題對(duì)于 食品安全有重大禪益。
[0007] 較早的檢測(cè)鄰苯二甲酸醋的方法有滴定法、薄層色譜法和分光光度法等，后來出 現(xiàn)的氣相色譜、液相色譜和色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)一直廣泛被使用，近年來又出現(xiàn)了如超臨界 流體色譜(SFC)和毛細(xì)管電泳(CE)等新技術(shù)。但是使用較多的還是氣相色譜、液相色譜W及 色譜質(zhì)譜聯(lián)用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 本發(fā)明的目的在于為了解決現(xiàn)有檢測(cè)鄰苯二甲酸醋的方法過程繁瑣、不易進(jìn)行， 分離時(shí)間長(zhǎng)，適用性窄，精度不高的缺陷而提供一種高效、快捷、精確測(cè)定水產(chǎn)品接觸材料 中鄰苯二甲酸醋的方法。
[0009] 為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用W下技術(shù)方案： 一種測(cè)定水產(chǎn)品接觸材料中鄰苯二甲酸醋的方法，包括W下步驟： 1) 水產(chǎn)品接觸材料洗凈，曬干后稱重，根據(jù)接觸材料重量，將接觸材料按照Ig接觸材 料/240-260mL浸泡液的比例在浸泡液中浸泡，密封后放入92-98°C水浴中，時(shí)間2-4h，冷卻 備用； 2) 取步驟1)得到的浸泡液，加入萃取劑，放置于多管滿旋振蕩器內(nèi)進(jìn)行震蕩萃取，轉(zhuǎn)速 800-2000巧m，萃取時(shí)間10-25min，萃取完成后收取萃取層蒸發(fā)，定容至2血，過0.22μπι濾膜， 置于樣品瓶?jī)?nèi)備用； 3) 取步驟2)得到的樣品用加壓毛細(xì)管電色譜儀進(jìn)行檢測(cè)，并計(jì)算結(jié)果。在本技術(shù)方案 中，毛細(xì)管電色譜理論知識(shí)、色譜柱與儀器應(yīng)用在近些年來得到了長(zhǎng)遠(yuǎn)的發(fā)展，在國(guó)內(nèi)也越 來越多的課題開始用毛細(xì)管電色譜進(jìn)行分離檢測(cè)，是未來檢測(cè)技術(shù)的一個(gè)趨勢(shì)，毛細(xì)管電 色譜分離度更好，ΜΡ和DCHP能很好的分離開來，且需要的樣品量很少。該方法具有良好的 線性關(guān)系，回收率和靈敏度較高，穩(wěn)定性和重現(xiàn)性較好，方法快速、準(zhǔn)確，操作方便，能滿足 水產(chǎn)品接觸材料中鄰苯二甲酸醋的遷移量日常檢測(cè)需要。
[0010] 作為優(yōu)選，步驟1)中浸泡液為含質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.3-0.5 %的巧樣酸水溶液。
[0011] 作為優(yōu)選，步驟2)中萃取劑為四氨巧喃、正己燒與甲基叔下基酸的混合液，其中， 四氨巧喃、正己燒與甲基叔下基酸體積比為1:3: 2。
[0012] 作為優(yōu)選，加壓毛細(xì)管電色譜儀的色譜柱的型號(hào)為ΕΡ-100-20/45-3-打8。
[0013] 作為優(yōu)選，加壓毛細(xì)管電色譜儀的設(shè)置條件為流動(dòng)相:異丙醇:緩沖液為9:1;檢測(cè) 器:紫外檢測(cè)器;波長(zhǎng):270-290醒;流速:0.02-0.05mL/min;柱溫:室溫;外加電壓:-lOkV。
[0014] 作為優(yōu)選，流速為0.04mL/min。
[0015] 作為優(yōu)選，波長(zhǎng)為285nm。
[0016] 作為優(yōu)選，萃取劑的加入量為45-65mL。
[0017] 作為優(yōu)選，緩沖液的加入量為50mmol/L，緩沖液為憐酸氨二鐘-憐酸二氨鋼緩沖溶 液，抑=7.1。
[0018] 本發(fā)明的有益效果:本發(fā)明使用的毛細(xì)管電色譜分離度更好，DAP和DCHP能很好的 分離開來，且需要的樣品量很少，具有良好的線性關(guān)系，回收率和靈敏度較高，穩(wěn)定性和重 現(xiàn)性較好，方法快速、準(zhǔn)確，操作方便，能滿足水產(chǎn)品接觸材料中鄰苯二甲酸醋的遷移量日 常檢測(cè)需要，屯種PAEs的回收率在81.8 % -115.1 %之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD)在2.9 % - 9.7%之間。
【附圖說明】
[0019]圖1是實(shí)施例3測(cè)得的pCE姻。
[0020] 圖中，1為DHP的峰。
【具體實(shí)施方式】
[0021 ]下面通過【具體實(shí)施方式】對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的描述。
[0022] 在本發(fā)明中，若非特指，所有設(shè)備和原料均可從市場(chǎng)購得或是本行業(yè)常用的，下述 實(shí)施例中的方法，如無特別說明，均為本領(lǐng)域常規(guī)方法。
[0023] TriSep?-21〇〇加壓毛細(xì)管電色譜儀(上海通微分析技術(shù)有限公司）；毛細(xì)管電色譜 柱EP-100-20/45-3-C18:內(nèi)徑100μL?，有效柱長(zhǎng)20cm，填料粒徑3皿0DS;D2F6020型真空干燥 箱(寧波江南儀器廠），超聲波清洗器，EYELA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（日本東京理化器械株式公社）。甲 醇為高效液相色譜級(jí)，購置于美國(guó)Tedia公司；鄰苯二甲酸醋標(biāo)準(zhǔn)品（DMP、DEP、DPP、DAP、 DCHP、DHP、D0P)純度>97.5 %，購置于德國(guó)Dr. Ehrenstorfer Gm地公司；實(shí)驗(yàn)用水均為去離 子水。
[0024] 實(shí)施例1 一種測(cè)定水產(chǎn)品接觸材料中鄰苯二甲酸醋的方法，包括W下步驟： 1)水產(chǎn)品接觸材料洗凈，曬干后稱重，根據(jù)接觸材料重量，將接觸材料按照ig接觸材 料/240mL浸泡液的比例在浸泡液中浸泡，密封后放入92°C水浴中，時(shí)間化，冷卻備用;其中， 浸泡液為含質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.3%的巧樣酸水溶液。
[0025] 2)取步驟1)得到的浸泡液，加入萃取劑，放置于多管滿旋振蕩器內(nèi)進(jìn)行震蕩萃取， 轉(zhuǎn)速80化pm，萃取時(shí)間lOmin，萃取完成后收取萃取層蒸發(fā)，定容至2mL，過0.22皿濾膜，置于 樣品瓶?jī)?nèi)備用；其中，萃取劑為四氨巧喃、正己燒與甲基叔下基酸的混合液，其中，四氨巧 喃、正己燒與甲基叔下基酸體積比為1:3:2;萃取劑的加入量為45ιΛ; 3)取步驟2)得到的樣品用加壓毛細(xì)管電色譜儀進(jìn)行檢測(cè)，并計(jì)算結(jié)果;加壓毛細(xì)管電 色譜儀的色譜柱的型號(hào)為EP-100-20/45-3-C18。
[0026] 加壓毛細(xì)管電色譜儀的設(shè)置條件為流動(dòng)相:異丙醇:緩沖液為9:1;檢測(cè)器:紫外檢 測(cè)器；波長(zhǎng)：270nm;流速：0.02mL/min;柱溫：室溫；外加電壓：-10kV;緩沖液的加入量為 50mmol/L，緩沖液為憐酸氨二鐘-憐酸二氨鋼緩沖溶液，抑=7.1。
[0027] 實(shí)施例2 一種測(cè)定水產(chǎn)品接觸材料中鄰苯二甲酸醋的方法，包括W下步驟： 1)水產(chǎn)品接觸材料洗凈，曬干后稱重，根據(jù)接觸材料重量，將接觸材料按照Ig接觸材 料/250mL浸泡液的比例在浸泡液中浸泡，密封后放入95°C水浴中，時(shí)間化，冷卻備用;其中， 浸泡液為含質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.4%的巧樣酸水溶液。
[0028] 2)取步驟1)得到的浸泡液，加入萃取劑，放置于多管滿旋振蕩器內(nèi)進(jìn)行震蕩萃取， 轉(zhuǎn)速2000rpm，萃取時(shí)間25min，萃取完成后收取萃取層蒸發(fā)，定容至2mL，過0.22WI1濾膜，置 于樣品瓶?jī)?nèi)備用;其中，萃取劑為四氨巧喃、正己燒與甲基叔下基酸的混合液，其中，四氨巧 喃、正己燒與甲基叔下基酸體積比為1:3:2;萃取劑的加入量為65ιΛ; 3)取步驟2)得到的樣品用加壓毛細(xì)管電色譜儀進(jìn)行檢測(cè)，并計(jì)算結(jié)果;加壓毛細(xì)管電 色譜儀的色譜柱的型號(hào)為EP-100-20/45-3-C18。
[0029] 加壓毛細(xì)管電色譜儀的設(shè)置條件為流動(dòng)相:異丙醇:緩沖液為9:1;檢測(cè)器:紫外檢 測(cè)器；波長(zhǎng)：290nm;流速：0.05mL/min;柱溫：室溫；外加電壓：-10kV;緩沖液的加入量為 50mmol/L，緩沖液為憐酸氨二鐘-憐酸二氨鋼緩沖溶液，抑=7.1。
[0030] 實(shí)施例3 一種測(cè)定水產(chǎn)品接觸材料中鄰苯二甲酸醋的方法，包括W下步驟： 1)市場(chǎng)買回來的聚氯乙締食品接觸材料洗凈，曬干后稱重，根據(jù)接觸材料重量，將接觸 材料按照Ig接觸材料/260mL浸泡液的比例在浸泡液中浸泡，密封后放入98°C水浴中，時(shí)間 4h，冷卻備用;其中，浸泡液為含質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.5%的巧樣酸水溶液。
[0031] 2)取步驟1)得到的浸泡液，加入萃取劑，放置于多管滿旋振蕩器內(nèi)進(jìn)行震蕩萃取， 轉(zhuǎn)速ISOOrpm，萃取時(shí)間20min，萃取完成后收取萃取層蒸發(fā)，定容至2mL，過0.22WI1濾膜，置 于樣品瓶?jī)?nèi)備用;其中，萃取劑為四氨巧喃、正己燒與甲基叔下基酸的混合液，其中，四氨巧 喃、正己燒與甲基叔下基酸體積比為1:3:2;萃取劑的加入量為50ιΛ; 3)取步驟2)得到的樣品用加壓毛細(xì)管電色譜儀進(jìn)行檢測(cè)，并計(jì)算結(jié)果;加壓毛細(xì)管電 色譜儀的色譜柱的型號(hào)為EP-100-20/45-3-C18。
[0032] 加壓毛細(xì)管電色譜儀的設(shè)置條件為流動(dòng)相:異丙醇:緩沖液為9:1;檢測(cè)器:紫外檢 測(cè)器；波長(zhǎng)：285nm;流速：0.0化/min ;柱溫：室溫；外加電壓：-lOkV;緩沖液的加入量為 50mmol/L，緩沖液為憐酸氨二鐘-憐酸二氨鋼緩沖溶液，抑=7.1。見圖1。
[0033] 本發(fā)明對(duì)不同濃度的DMP，DEP，DPP，DAP，DCHP，DHP和D0P的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行檢測(cè)，其 線性關(guān)系和檢出限如表1所示。
[0034] 表1屯種鄰苯二甲酸醋的線性和定量限(L0Q)
本發(fā)明進(jìn)行空白加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)和精密度(RSD)試驗(yàn)。即在空白樣品中添加 Ξ個(gè)不同濃 度的PAEs混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，做回收率實(shí)驗(yàn)，同時(shí)每個(gè)添加濃度平行重復(fù)3次，計(jì)算回收率和相 對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，結(jié)果見表2。屯種PAEs的回收率在81.8 % -115.1 %之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)在 2.9 % -9.7 %之間。說明本發(fā)明精密度和準(zhǔn)確度較好，符合分析要求，可W用于此巧中PAEs的 檢測(cè)分析。
[0035]表2屯種鄰苯二甲酸醋的加標(biāo)回收率和精密度
本發(fā)明對(duì)從市場(chǎng)上買回來的幾個(gè)聚氯乙締水產(chǎn)品接觸材料的PAEs遷移量進(jìn)行研究，可 W利用加壓毛細(xì)管電色譜法從其中一種接觸材料中檢測(cè)到畑P，說明畑P可W從水產(chǎn)品接觸 材料遷移至浸泡液中。W畑P為例研究聚氯乙締接觸材料中PAEs的遷移規(guī)律。在不同的溫度 與浸泡條件下，用本發(fā)明檢測(cè)方法對(duì)其遷移量進(jìn)行測(cè)定，可W得到浸泡時(shí)間與遷移量的關(guān) 系曲線圖。在3組不同溫度條件下的模擬遷移結(jié)果如下所示：
實(shí)施例3從市場(chǎng)買回來的聚氯乙締食品接觸材料中有一種檢測(cè)出有畑P的遷移，檢出濃 度為3.590mg/L，浸泡液為200血，濃縮100倍，聚氯乙締接觸材料重1.47g，按照W上公式得 到其遷移量為4.88mg/kg。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種測(cè)定水產(chǎn)品接觸材料中鄰苯二甲酸酯的方法，其特征在于，包括以下步驟： 1) 水產(chǎn)品接觸材料洗凈，曬干后稱重，根據(jù)接觸材料重量，將接觸材料按照lg接觸材 料/240-260mL浸泡液的比例在浸泡液中浸泡，密封后放入92-98°C水浴中，時(shí)間2-4h，冷卻 備用； 2) 取步驟1)得到的浸泡液，加入萃取劑，放置于多管渦旋振蕩器內(nèi)進(jìn)行震蕩萃取，轉(zhuǎn)速 800_2000rpm，萃取時(shí)間10_25min，萃取完成后收取萃取層蒸發(fā)，定容至2mL，過0.22μηι濾膜， 置于樣品瓶?jī)?nèi)備用； 3) 取步驟2)得到的樣品用加壓毛細(xì)管電色譜儀進(jìn)行檢測(cè)，并計(jì)算結(jié)果。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種測(cè)定水產(chǎn)品接觸材料中鄰苯二甲酸酯的方法，其特征在 于，步驟1)中浸泡液為含質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.3-0.5%的檸檬酸水溶液。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種測(cè)定水產(chǎn)品接觸材料中鄰苯二甲酸酯的方法，其特征在 于，步驟2)中萃取劑為四氫呋喃、正己烷與甲基叔丁基醚的混合液，其中，四氫呋喃、正己烷 與甲基叔丁基醚體積比為1:3:2。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種測(cè)定水產(chǎn)品接觸材料中鄰苯二甲酸酯的方法，其特征在 于，加壓毛細(xì)管電色譜儀的色譜柱的型號(hào)為EP-100-20/45-3-C 18。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種測(cè)定水產(chǎn)品接觸材料中鄰苯二甲酸酯的方法，其特征在 于，加壓毛細(xì)管電色譜儀的設(shè)置條件為流動(dòng)相:異丙醇:緩沖液為9:1;檢測(cè)器:紫外檢測(cè)器； 波長(zhǎng):270-290nm;流速:0 · 02-0 · 05mL/min;柱溫:室溫;外加電壓:-10kV。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種測(cè)定水產(chǎn)品接觸材料中鄰苯二甲酸酯的方法，其特征在 于，流速為0.04mL/min。7. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種測(cè)定水產(chǎn)品接觸材料中鄰苯二甲酸酯的方法，其特征在 于，波長(zhǎng)為285nm〇8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種測(cè)定水產(chǎn)品接觸材料中鄰苯二甲酸酯的方法，其特征在 于，萃取劑的加入量為45-65mL。9. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種測(cè)定水產(chǎn)品接觸材料中鄰苯二甲酸酯的方法，其特征在 于，緩沖液的加入量為50mmol/L，緩沖液為磷酸氫二鉀-磷酸二氫鈉緩沖溶液，pH=7.1。
【文檔編號(hào)】G01N30/02GK105823831SQ201510938605
【公開日】2016年8月3日
【申請(qǐng)日】2015年12月15日
【發(fā)明人】楊立業(yè), 歐陽小琨, 王艷飛, 王陽光, 羅雨陽
【申請(qǐng)人】浙江海洋學(xué)院