一種從荷葉中提取荷葉堿的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種從荷葉中提取荷葉堿的方法，包括以下步驟：步驟1：將荷葉粉碎后，過篩；步驟2：稱取0.5重量份羅漢果粉，與0.5重量份硅藻土混合均勻待用；步驟3：將步驟2中的混合物移入預(yù)先放好過濾膜的萃取池中，加入適量的硅藻土至達(dá)到萃取池的池口；蓋上萃取池的蓋子進(jìn)行靜態(tài)萃取；萃取結(jié)束后得到萃取液；萃取條件為：萃取溶劑為甲醇；萃取溫度90℃；靜態(tài)萃取時(shí)間5min；沖洗體積100％；靜態(tài)循環(huán)次數(shù)2次。本發(fā)明提供了一種從荷葉中提取荷葉堿的方法，該方法操作簡(jiǎn)單，分離提純的精度高，用時(shí)短，樣品用量少。
【專利說明】
一種從荷葉中提取荷葉堿的方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)領(lǐng)域，特別是一種從荷葉中提取荷葉堿的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 2015年藥典記錄了荷葉中的荷葉堿的提取方法:取本品粗粉約0.5g，精密稱定，置 具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，加熱回流2.5小時(shí)，放冷，再稱定重量，用甲醇 補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液5ml，置10ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，即得。
[0003] 液相色譜檢測(cè)條件為：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈一水一三乙胺 冰醋酸(27:70.6:1.6:0.78)為流動(dòng)相;檢測(cè)波長(zhǎng)為270nm。理論板數(shù)按荷葉堿峰計(jì)算應(yīng)不低 于2000。
[0004] 藥典的方法操作過程復(fù)雜，對(duì)操作人員的操作技能要求高。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是提供一種從荷葉中提取荷葉堿的方法，該方法操作簡(jiǎn)單，分離提 純的精度高，用時(shí)短，樣品用量少。
[0006] 本發(fā)明提供的技術(shù)方案為:一種從荷葉中提取荷葉堿的方法，包括以下步驟：
[0007] 步驟1:將荷葉粉碎后，過篩；
[0008] 步驟2:稱取0.5重量份羅漢果粉，與0.5重量份硅藻土混合均勻待用；
[0009] 步驟3:將步驟2中的混合物移入預(yù)先放好過濾膜的萃取池中，加入適量的硅藻土 至達(dá)到萃取池的池口；蓋上萃取池的蓋子進(jìn)行靜態(tài)萃取;萃取結(jié)束后得到萃取液；
[0010] 萃取條件為：萃取溶劑為甲醇；萃取溫度90°c ;靜態(tài)萃取時(shí)間5min ;沖洗體積 100%;靜態(tài)循環(huán)次數(shù)2次。
[0011] 在上述的從荷葉中提取荷葉喊的方法中，所述的萃取池的體積為10ml。
[0012] 在上述的從荷葉中提取荷葉堿的方法中，所述的靜態(tài)萃取的壓力為1500psi。
[0013] 在上述的從荷葉中提取荷葉喊的方法中，所述的靜態(tài)萃取的吹掃時(shí)間為60s。
[0014] 在上述的從荷葉中提取荷葉堿的方法中，所述的步驟3結(jié)束后還包括步驟4,其具 體為:將萃取液用甲醇稀釋后在15000r/min下離心5min，取上清液。
[0015] 在上述的從荷葉中提取荷葉堿的方法中，所述的ASE萃取法所采用的儀器為 ASE350快速溶劑萃取儀。
[0016] 本發(fā)明在采用上述技術(shù)方案后，其具有的有益效果為：
[0017] 本發(fā)明的檢測(cè)方法操作簡(jiǎn)單，萃取效果與藥典方法的精度一致，重復(fù)性好，樣品用 量少，提取時(shí)間短。
【附圖說明】
[0018] 圖1為本發(fā)明的色譜分析荷葉堿有效性驗(yàn)證的直角坐標(biāo)圖；
[0019] 圖2為本發(fā)明的色譜圖。
【具體實(shí)施方式】
[0020] 下面結(jié)合【具體實(shí)施方式】，對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步的詳細(xì)說明，但不構(gòu)成對(duì) 本發(fā)明的任何限制。
[0021] 實(shí)施例1:
[0022] 將荷葉經(jīng)粉碎機(jī)粉碎，過三號(hào)篩，約0.5g，精密稱定，與0.5g硅藻土混合均勻，待 用，移入到預(yù)先放好過濾膜的ASE?10ml萃取池中再加入適量硅藻土，輕輕振搖使之與池 口在同一水平線上，擰緊萃取池上蓋。萃取結(jié)束后，把萃取液轉(zhuǎn)移于25ml容量瓶中，用甲醇 稀釋至刻度，在15000r/min下離心5min，取上清液，進(jìn)入LC測(cè)定。
[0023]萃取條件(見表1)為：
[0024]表 1
[0026] 分析方法為L(zhǎng)C液相色譜法，液相色譜分析條件：
[0027] a)儀器:Thermo 雙三元液相(U-3000)
[0028] b)色譜柱Eclipse XDB(Cis 5_ 4.6X150mm，即碳 18色譜柱，直徑4.6mm，長(zhǎng)度 150mm，粒徑 5ym)
[0029] c)柱溫:40°C
[0030] d)流速:0.5mL/min
[0031] e)流動(dòng)相：乙腈-水-三乙胺-冰醋酸(體積比27:70.6:1.6:0.78)
[0032] f)檢測(cè)波長(zhǎng)：270nm
[0033] 色譜分析有效性驗(yàn)證：
[0034]取荷葉堿對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每lml含16iig的溶液，即得。
[0035] 取荷葉堿對(duì)照品溶液(濃度:0.1587mg/ml)，分別精密吸取該溶液lyl、2yl、4yl、5y 1、10yl進(jìn)入LC測(cè)定，并依照上述方法測(cè)定，結(jié)果詳見表2。以絕對(duì)進(jìn)樣量(yg)-平均峰面積進(jìn) 行線性回歸，求得回歸方程:7 = 5.7934義-0.0315，1?2 = 0.9997。荷葉堿在0.1587~0.9122噸 范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，該線性關(guān)系的直角坐標(biāo)圖見圖1。荷葉堿對(duì)照品的采用上述的液 相色譜法分析得到的色譜圖，詳見圖2中的標(biāo)號(hào)為S-1所對(duì)應(yīng)的圖譜。
[0036] 表2荷葉堿線性關(guān)系
[0038]實(shí)施例1的萃取方法的重現(xiàn)性驗(yàn)證：
[0039]取相同批號(hào)的樣品（批號(hào)：150820)0.5g，共6份，精密稱定，按ASE提取方法提取供 試品溶液，進(jìn)樣量為如1，以上述的色譜條件平行試驗(yàn)，測(cè)得樣品中荷葉堿的含量見表2，RSD 為3.5 %，試驗(yàn)表明ASE提取方法重復(fù)性良好，結(jié)果詳見表3。
[0040]表 3
[0042] 實(shí)施例1的萃取方法的精確度測(cè)試
[0043] 采用實(shí)施例1的ASE萃取方法和藥典的萃取方法對(duì)荷葉進(jìn)行萃取，荷葉為4批，批號(hào) 分別為 1512008,20150501,150820,1508144;
[0044]實(shí)施例1的ASE萃取方法對(duì)同一批次的荷葉采用相同型號(hào)規(guī)格但是不同的機(jī)器進(jìn) 行平行測(cè)試兩次，分別為ASE1和ASE2表示。
[0045] 圖2中標(biāo)號(hào)114-2-1所對(duì)應(yīng)的圖譜為樣品1508144按照藥典所記載的方法得到的色 譜圖；
[0046] 圖2中標(biāo)號(hào)為正交8-1所對(duì)應(yīng)的圖譜為樣品1508144按照實(shí)施例1所記載的方法得 到的色譜圖。
[0047] 具體測(cè)試結(jié)果見下表4;
[0048] 表 4
[0050]以上所述的僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，凡在本發(fā)明的精神和原則范圍內(nèi)所作的任 何修改、等同替換和改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種從荷葉中提取荷葉堿的方法，其特征在于，包括以下步驟： 步驟1:將荷葉粉碎后，過篩； 步驟2:稱取0.5重量份羅漢果粉，與0.5重量份硅藻土混合均勻待用； 步驟3:將步驟2中的混合物移入預(yù)先放好過濾膜的萃取池中，加入適量的硅藻土至達(dá) 到萃取池的池口；蓋上萃取池的蓋子進(jìn)行靜態(tài)萃取;萃取結(jié)束后得到萃取液； 萃取條件為:萃取溶劑為甲醇；萃取溫度90°C;靜態(tài)萃取時(shí)間5min;沖洗體積100%;靜 態(tài)循環(huán)次數(shù)2次。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的從荷葉中提取荷葉堿的方法，其特征在于，所述的萃取池的體 積為l〇ml。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的從荷葉中提取荷葉堿的方法，其特征在于，所述的靜態(tài)萃取的 壓力為1500psi。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的從荷葉中提取荷葉堿的方法，其特征在于，所述的靜態(tài)萃取的 吹掃時(shí)間為60s。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的從荷葉中提取荷葉堿的方法，其特征在于，所述的步驟3結(jié)束 后還包括步驟4，其具體為:將萃取液用甲醇稀釋后在15000r/min下離心5min，取上清液。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的從荷葉中提取荷葉堿的方法，其特征在于，所述的ASE萃取法 所采用的儀器為ASE350快速溶劑萃取儀。
【文檔編號(hào)】G01N30/02GK105929036SQ201610234682
【公開日】2016年9月7日
【申請(qǐng)日】2016年4月15日
【發(fā)明人】陳學(xué)松, 王麗麗, 韋濤, 梁美艷, 黃新惠
【申請(qǐng)人】廣西壯族自治區(qū)梧州食品藥品檢驗(yàn)所