Hplc測定穿心蓮片中穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法【專利摘要】本發(fā)明提供了一種HPLC測定穿心蓮片中穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法，旨在提供一種檢測靈敏度高，操作簡單，重復(fù)性好的HPLC測定穿心蓮片中穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法；該方法是取樣品粉末1g，置于10mL萃取池中，用甲醇對樣品在溫度60℃，靜態(tài)提取5min，重復(fù)提取2次，提取完成后將提取液用甲醇定容至20mL，吸取1mL于離心管中，漩渦2min，10000r/min離心3min，收集上清液，混勻過0.22微米的濾膜，取濾液注入高效液相色譜儀進(jìn)行檢測；屬于化學(xué)檢測
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?！緦＠f明】HPLC測定穿心蓮片中穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法
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[0001]本發(fā)明提供一種測定穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法，具體地說，是一種HPLC測定穿心蓮片中穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法;屬于化學(xué)檢測
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】[0002]穿心蓮片收載于《中國藥典》2005年版一部，其檢查項為片劑制劑通則中規(guī)定的內(nèi)容。中藥口服固體制劑多以藥物粉末或提取物為材料，有效成分必須通過崩解及溶出的過程釋放，吸收進(jìn)入血液而起到治療作用。[0003]照高效液相色譜法(2010年版藥典一部附錄VID)測定方法如下。[0004]1、色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗[0005]以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇一水(60:40)為流動相；檢測波長為254nm。理論板數(shù)按脫水穿心蓮內(nèi)酯峰計算應(yīng)不低于2000。[0006]2、對照品溶液的制備[0007]取脫水穿心蓮內(nèi)酯對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每Iml含0.1mg的溶液，即得。[0008]3、供試品溶液的制備[0009]取本品20片(小片)或10片(大片)，除去包衣，精密稱定，研細(xì)，取0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，稱定重量，浸泡I小時，超聲處理(功率250W，頻率33kHz)30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液1ml(剩余的續(xù)濾液備用)，加在中性氧化鋁柱(200?300目，5g，內(nèi)徑為1.5cm)上，用甲醇20ml洗脫，收集洗脫液，置50ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。[0010]4、測定[0011]分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各?ομ?，注入液相色譜儀，測定，即得。[0012]本品每片含脫水穿心蓮內(nèi)酯(C20H2804)，小片不得少于4.0mg，大片不得少于8.0mg【
發(fā)明內(nèi)容】[0013]針對上述不足，本發(fā)明的目的是提供一種檢測靈敏度高，操作簡單，重復(fù)性好的HPLC測定穿心蓮片中穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法。[0014]為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供的技術(shù)方案如下:[0015]一種HPLC測定穿心蓮片中穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法，該方法依次包括下述步驟:取樣品粉末lg，置于1mL萃取池中，用甲醇對樣品在溫度60°C，靜態(tài)提取5min，重復(fù)提取2次，提取完成后將提取液用甲醇定容至20mL，吸取ImL于離心管中，漩渦2min，10000r/min離心3min，收集上清液，混勻過0.22微米的濾膜，取濾液注入高效液相色譜儀進(jìn)行檢測。[0016]進(jìn)一步的，上述的HPLC測定穿心蓮片中穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法，所述的高效液相色譜儀為安捷倫Agilent-1200。[0017]進(jìn)一步的，上述的HPLC測定穿心蓮片中穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法，所述的色譜條件如下:[0018]色譜柱:StableBondSB-苯基柱；[0019]流動相:乙腈A-0.3%甲酸水溶液B;[0020]流動相A為乙腈，流動相B為0.5%甲酸;梯度洗脫程序:O?Imin，80%A、20%B;I?12min，85%?15%A、15%?85%B;12?15min，50%A、50%B;在50%A、50%B下平衡3min。[0021]流速lmL/min;[0022]波長:273nm，287nm;[0023]柱溫:35Γ。[0024]進(jìn)樣量:5μ1。[0025]進(jìn)一步的，上述的的HPLC測定穿心蓮片中穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法，所述色譜柱規(guī)格:250mmX4.6mm，5μηι。[0026]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明提供的技術(shù)方案建立了HPLC測定穿心蓮片中穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法，該方法操作簡便、準(zhǔn)確可靠，可用于穿心蓮片的質(zhì)量控制。【具體實施方式】[0027]下面結(jié)合【具體實施方式】，對本發(fā)明的權(quán)利要求做進(jìn)一步的詳細(xì)說明，但不構(gòu)成對本發(fā)明的任何限制，任何在本發(fā)明權(quán)利要求保護(hù)范圍所做的有限次的修改，仍在本發(fā)明的權(quán)利要求保護(hù)范圍之內(nèi)。[0028]本發(fā)明所涉及的到百分含量濃度，除特殊說明外，溶質(zhì)為液體的均為體積濃度，溶質(zhì)為固體的均為質(zhì)量濃度。[0029]實施例1[0030]—種HPLC測定穿心蓮片中穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法，該方法依次包括下述步驟:取樣品粉末lg，置于1mL萃取池中，用甲醇對樣品在溫度60°C，靜態(tài)提取5min，重復(fù)提取2次，提取完成后將提取液用甲醇定容至20mL，吸取ImL于離心管中，漩渦2min，10000r/min離心3min，收集上清液，混勾過0.22微米的濾膜，取濾液注入安捷倫AgiIent-1200高效液相色譜儀進(jìn)行檢測。[0031]所述的色譜條件如下:[0032]色譜柱:StableBondSB-苯基柱(250mmX4.6mm，5ym);[0033]流動相:乙腈A-0.3%甲酸水溶液B;[0034]流動相A為乙腈，流動相B為0.5%甲酸;梯度洗脫程序:O?Imin，80%A、20%B;I?12min，85%?15%A、15%?85%B;12?15min，50%A、50%B;在50%A、50%B下平衡3min。[0035]流速lmL/min;[0036]波長:273nm，287nm;[0037]柱溫:35Γ。[0038]進(jìn)樣量:5μ1。[0039]取同一份樣品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，計算穿心蓮內(nèi)酯峰面積的RSD=0.5%，脫水穿心蓮內(nèi)酯的峰面積RSD=0.3%，表明該方法精密度良好[0040]取供試品溶液，于O，2，4，8，12，24h測定。結(jié)果24h內(nèi)穿心蓮內(nèi)酯的峰面積RSD=0.48%(n=6)，脫水穿心蓮內(nèi)酯的峰面積RSD=0.3%(n=6)，表明本品穩(wěn)定性良好。[0041]取同一批樣品粉末5份，按本申請?zhí)峁┑姆椒y定，測得脫水穿心蓮內(nèi)酯、穿心蓮內(nèi)酯的平均含量分別為49.6mg.g-1、23.3mg.g-1，RSD分別為1.5%、2.1%。[0042]對照品溶液:各取穿心蓮內(nèi)酯對照品、脫水穿心蓮內(nèi)酯對照品適量，加甲醇制成含穿心蓮內(nèi)酯16.6g.mL—1和脫水穿心蓮內(nèi)酯10.2g.mL—I的對照品混合溶液，即得[0043]取上述已知含量的樣品粉末約0.042g，精密稱定，精密加入穿心蓮內(nèi)酯對照品溶液(0.83mg.mL—1)ImL，脫水穿心蓮內(nèi)酯對照品2mL(1.02mg.mL—1)，同法處理，按上述色譜條件進(jìn)樣，分別于273nm，287nm處測定吸收度，穿心蓮內(nèi)酯平均回收率99.8%，RSDl.12%，脫水穿心蓮內(nèi)酯平均回收率99.6%，RSD1.2%。【主權(quán)項】1.一種HPLC測定穿心蓮片中穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法，其特征在于，該方法依次包括下述步驟:取樣品粉末lg，置于1mL萃取池中，用甲醇對樣品在溫度60°C，靜態(tài)提取5min，重復(fù)提取2次，提取完成后將提取液用甲醇定容至20mL，吸取ImL于離心管中，漩禍2min，10000r/min離心3min，收集上清液，混勾過0.22微米的濾膜，取濾液注入高效液相色譜儀進(jìn)行檢測。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的HPLC測定穿心蓮片中穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法，其特征在于，所述的高效液相色譜儀為安捷倫AgiIent-1200。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的HPLC測定穿心蓮片中穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法，其特征在于，所述的色譜條件如下:色譜柱:StabIeBondSB-苯基柱;流動相:乙腈A-0.3%甲酸水溶液B;流動相A為乙腈，流動相B為0.5%甲酸；梯度洗脫程序:O?Imiη，80%A、20%B;I?12min，85%?15%A、15%?85%B;12?15min，50%A、50%B;在50%A、50%B下平衡3miη；流速lmL/miη；波長:273nm，287nm;柱溫:35°C;進(jìn)樣量:5μ1。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的的HPLC測定穿心蓮片中穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的方法，其特征在于，所述的色譜柱規(guī)格:250mmX4.6mm，5μηι?！疚臋n編號】G01N30/02GK105929066SQ201610259545【公開日】2016年9月7日【申請日】2016年4月25日【發(fā)明人】陳學(xué)松,陳江濤,廖強(qiáng),梁慧敏,李亞,李澄【申請人】廣西壯族自治區(qū)梧州食品藥品檢驗所