一種同時檢測黃芩中黃芩苷和黃芩素的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種同時檢測黃芩中黃芩苷和黃芩素的方法，包括以下步驟：步驟1：將黃芩粉碎后采用ASE萃取法得到萃取液；其中，步驟1具體包括：S11：將0.3重量份黃芩粉碎后與1重量份石英砂混合均勻；S12：將混合物加入到鋪設(shè)有濾膜的萃取池中，然后繼續(xù)加入石英砂直至達(dá)到萃取池池口，蓋上萃取池的蓋子，采用ASE萃取法進(jìn)行萃??；步驟2：將萃取液離心，對離心后的液體取上清液；步驟3：將濾液采用液相色譜法分析。本發(fā)明提供了一種同時檢測黃芩中黃芩苷和黃芩素的方法，該方法檢測精度高，萃取和檢測效果速度快，用時短。
【專利說明】
一種同時檢測黃芩中黃芩苷和黃芩素的方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及實驗室檢測領(lǐng)域，特別是一種同時檢測黃芩中黃芩苷和黃芩素的方 法。
【背景技術(shù)】
[0002] 2010年藥典記載了黃芩中黃芩苷的提取和檢測方法:取本品中粉約0.3g，精密稱 定，加70%乙醇40ml，加熱回流3小時，放冷，濾過，濾液置100ml量瓶中，用少量70%乙醇分 次洗滌容器和殘渣，洗液濾人同一量瓶中，加70 %乙醇至刻度，搖勻。精密量取lml，置10ml 量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。。
[0003] 液相色譜法分離條件為：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水-磷酸 (47:53:0.2)為流動相;檢測波長為280nm。理論板數(shù)按黃芩苷峰計算應(yīng)不低于2500。
[0004] 藥典未記載如何高效的同時提取和檢測黃芩苷和黃芩素的方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是提供一種同時檢測黃芩中黃芩苷和黃芩素的方法，該方法檢測精 度高，萃取和檢測效果速度快，用時短。
[0006] 本發(fā)明提供的技術(shù)方案為：一種同時檢測黃芩中黃芩苷和黃芩素的方法，其特征 在于，包括以下步驟：
[0007] 步驟1:將黃芩粉碎后采用ASE萃取法得到萃取液；
[0008] 其中，步驟1具體包括：
[0009] S11:將0.3重量份黃芩粉碎后與1重量份石英砂混合均勻；
[0010] S12:將混合物加入到鋪設(shè)有濾膜的萃取池中，然后繼續(xù)加入石英砂直至達(dá)到萃取 池池口，蓋上萃取池的蓋子，采用ASE萃取法進(jìn)行萃??；
[0011] 萃取條件為:萃取溶劑為體積比為7:3的乙醇和甲醇的混合物，萃取溫度120°C;靜 態(tài)萃取時間5min;沖洗體積100 %;靜態(tài)循環(huán)次數(shù)3次;靜態(tài)萃取的壓力為1500psi;吹掃時間 為 100s;
[0012] 步驟2:將萃取液離心，對離心后的液體取上清液；
[0013] 步驟3:將濾液采用液相色譜法分析；
[0014] 液相色譜分析條件為：
[0015] a)儀器:雙三元液相色譜儀
[0016] b)色譜柱:碳 18 色譜柱，100X3mm3wii
[0017] c)柱溫:40°C
[0018] d)流速:0.5mL/min
[0019] e)流動相：甲醇-0.1 %磷酸；甲醇和質(zhì)量百分?jǐn)?shù)0. lwt %的磷酸的體積比為47:53;
[0020] f)檢測波長：280nm。
[0021] 在上述的同時檢測黃芩中黃芩苷和黃芩素的方法中，所述的萃取池的體積為 10ml 〇
[0022]在上述的同時檢測黃芩中黃芩苷和黃芩素的方法中，所述的步驟2具體為將萃取 液用甲醇和乙醇的混合溶液稀釋后，以15000r/min的速度離心3min;取上清液。
[0023]在上述的同時檢測黃芩中黃芩苷和黃芩素的方法中，所述的雙三元液相色譜儀為 Thermo U3000UHPLC液相色譜儀，所述的色譜柱為Thermo Syncronis C18色譜柱，所述的 ASE萃取法采用的是ASE350快速溶劑萃取儀。
[0024] 本發(fā)明在采用上述技術(shù)方案后，其具有的有益效果為：
[0025] 本發(fā)明的檢測方法能夠同時檢測黃芩苷和黃芩素，并且兩者能夠非常準(zhǔn)確的檢 測，檢測精度高，萃取簡單，用時短。
【具體實施方式】
[0026] 下面結(jié)合【具體實施方式】，對本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步的詳細(xì)說明，但不構(gòu)成對 本發(fā)明的任何限制。
[0027] 實施例1:
[0028]樣品經(jīng)粉碎機(jī)粉碎，過三號篩，約0.3g，精密稱定，與lg石英砂混合均勻，待用，移 入到預(yù)先放好過濾膜的ASE? 10ml萃取池中再加入適量石英砂，輕輕振搖使之與池口在同 一水平線上，擰緊萃取池上蓋。萃取結(jié)束后，把萃取液轉(zhuǎn)移于50ml容量瓶中，用體積比為7:3 的乙醇和甲醇混合溶液稀釋至刻度，在15000r/min下離心3min，取上清液，進(jìn)入LC測定。 [0029]萃取條件(見表1)為：
[0030]表 1
[0033] 分析方法為LC液相色譜法，液相色譜分析條件：
[0034] a)儀器：Thermo 雙三元液相（U-3000)
[0035] b)色譜柱:Thermo Syncronis C18 3um 100X3mm，即碳 18色譜柱的直徑3mm，長度 100mm，粒徑 3ym;
[0036] 幻柱溫：仙?。?br>[0037] d)流速:0.5mL/min
[0038] e)流動相：甲醇-0.1 %磷酸；甲醇和質(zhì)量百分?jǐn)?shù)0. lwt %的磷酸在20°C的條件下的 體積比為47:53;
[0039] f)檢測波長：280nm
[0040] 對比例1
[0041 ]步驟1:取黃苳中粉約0. lg，精密稱定，與lg娃藻土混合均勾，待用；
[0042] 步驟2:萃取池底部墊3~6張（商品化濾紙1張）自制圓形濾紙(直徑27mm)，加入約 lg硅藻土后加入步驟1所得到的混合均勻的樣品、再加入適量硅藻土，輕輕振搖使之與池口 在同一水平線上，擰緊萃取池上蓋。
[0043] 步驟3: ASE萃取，萃取參數(shù)如下表2
[0044] 表1ASE萃取參數(shù)
[0046] 步驟4:萃取結(jié)束后，把萃取液置于100ml容量瓶中，用70%乙醇稀釋至刻度，搖勻， 精密量取lml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，取2mL在15000r/min下離心3min，取上清 液，待上機(jī)測定。本實施例中乙醇的濃度單位均為體積分?jǐn)?shù)。
[0047]采用U-3000液相色譜儀進(jìn)行檢測，檢測參數(shù)為：
[0048] 色譜柱：Kinetex 2.6yXB-C18 100A 100X4.60mm、柱溫：4(TC、流速：0.8mL/min、 流動相：甲醇-0.5%醋酸(25:75)、檢測波長:28〇11111、進(jìn)樣量1(^1。
[0049] 實施例1的萃取方法的精確度測試
[0050] 采用實施例1、對比例的ASE萃取方法和藥典的萃取和檢測方法對黃芩中黃芩苷和 黃芩素進(jìn)行萃取和檢測，黃芩為3批，批號分別為1510077(云南），151002(江西），20150601 (內(nèi)蒙）；
[0051]具體測試結(jié)果見下表3;
[0052]表 3
[0054]以上所述的僅為本發(fā)明的較佳實施例，凡在本發(fā)明的精神和原則范圍內(nèi)所作的任 何修改、等同替換和改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項】
1. 一種同時檢測黃芩中黃芩苷和黃芩素的方法，其特征在于，包括以下步驟： 步驟1:將黃零粉碎后米用ASE萃取法得到萃取液； 其中，步驟1具體包括： SI 1:將0.3重量份黃芩粉碎后與1重量份石英砂混合均勻； S12:將混合物加入到鋪設(shè)有濾膜的萃取池中，然后繼續(xù)加入石英砂直至達(dá)到萃取池池 口，蓋上萃取池的蓋子，米用ASE萃取法進(jìn)彳丁萃??； 萃取條件為:萃取溶劑為體積比為7:3的乙醇和甲醇的混合物，萃取溫度120°C;靜態(tài)萃 取時間5min;沖洗體積100% ;靜態(tài)循環(huán)次數(shù)3次;靜態(tài)萃取的壓力為1500psi ;吹掃時間為 100s； 步驟2:將萃取液離心，對離心后的液體取上清液； 步驟3:將濾液采用液相色譜法分析； 液相色譜分析條件為： a) 儀器:雙三元液相色譜儀 b) 色譜柱:碳18色譜柱，100 X3mm3ym (：)柱溫:40°〇 d) 流速:0 · 5mL/min e) 流動相：甲醇-0.1 %磷酸；甲醇和質(zhì)量百分?jǐn)?shù)0.1 wt %的磷酸的體積比為47:53; f) 檢測波長：280nm〇2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的同時檢測黃芩中黃芩苷和黃芩素的方法，其特征在于，所述的 萃取池的體積為I Om 1。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的同時檢測黃芩中黃芩苷和黃芩素的方法，其特征在于，所述的 步驟2具體為將萃取液用甲醇和乙醇的混合溶液稀釋后，以15000r/min的速度離心3min;取 上清液。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的同時檢測黃芩中黃芩苷和黃芩素的方法，其特征在于，所述的 雙三元液相色譜儀為Thermo U3000UHPLC液相色譜儀，所述的色譜柱為Thermo Syncronis C18色譜柱，所述的ASE萃取法采用的是ASE350快速溶劑萃取儀。
【文檔編號】G01N30/02GK105929073SQ201610268639
【公開日】2016年9月7日
【申請日】2016年4月27日
【發(fā)明人】陳學(xué)松, 廖強(qiáng), 韋日偉, 陳佳麗, 王 華, 姚泳成
【申請人】廣西壯族自治區(qū)梧州食品藥品檢驗所