一種大黃中總蒽醌的提取方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種大黃中總蒽醌的提取方法，包括以下步驟：步驟1：將大黃粉碎后，過篩；步驟2：稱取0.15重量份大黃粉，與適量硅藻土混合均勻待用；步驟3：在預(yù)先放好過濾膜的萃取池中先加入少量石英砂，混合均勻后加入適量的硅藻土至達(dá)到萃取池的池口；蓋上萃取池的蓋子進(jìn)行靜態(tài)萃??；萃取結(jié)束后得到萃取液；萃取條件為：萃取溶劑為1％乙酸甲醇；萃取溫度100℃；靜態(tài)萃取時(shí)間5min；沖洗體積100％；靜態(tài)循環(huán)次數(shù)3次。本發(fā)明提供了一種大黃中總蒽醌的提取方法，該提取方法操作簡單，用時(shí)短，有效的降低了對(duì)技術(shù)人員的操作技能的要求。
【專利說明】
一種大黃中總蒽醌的提取方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及實(shí)驗(yàn)室檢測領(lǐng)域，特別是一種大黃中總蒽醌的提取方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 2010年藥典記錄了提取大黃中總蒽醌的方法:取本品粉末(過四號(hào)篩）約0.15g，精 密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，稱定重量，加熱回流1小時(shí)，放冷，再稱定重 量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過。精密量取續(xù)濾液5ml，置燒瓶中，揮去溶劑，加8%鹽 酸溶液l〇ml，超聲處理2分鐘，再加三氯甲烷10ml，加熱回流1小時(shí)，放冷，置分液漏斗中，用 少量三氯甲烷洗滌容器，并入分液漏斗中，分取三氯甲烷層，酸液再用三氯甲烷提取3次，每 次10ml，合并三氯甲烷液，減壓回收溶劑至于，殘?jiān)蛹状际谷芙猓D(zhuǎn)移至10ml量瓶中，加甲 醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。測定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10 yl，注入液相色譜儀，測定，即得。本品按干燥品計(jì)算，含總蒽醌以蘆薈大黃素(C15H1005)、 大黃酸(C15H806)、大黃素(C15H1005)、大黃酚(C15H1004)和大黃素甲醚(C16H1205)的總量 計(jì)，不得少于1.5%。色譜條件為:色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為 填充劑；以甲醇〇. 1%磷酸溶液(85:15)為流動(dòng)相;檢測波長為254.nm。理論板數(shù)按大黃素峰 計(jì)算應(yīng)不低于3000。
[0003] 藥典的方法操作過程復(fù)雜，對(duì)操作人員的操作技能要求高

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的是提供一種大黃中總蒽醌的提取方法，該方法操作簡單，提取效率 尚。
[0005] 本發(fā)明提供的技術(shù)方案為:一種大黃中總蒽醌的提取方法，包括以下步驟：
[0006] 步驟1:將大黃粉碎后，過篩；
[0007] 步驟2:稱取0.15重量份大黃粉，與適量硅藻土混合均勻待用；
[0008] 步驟3:在預(yù)先放好過濾膜的萃取池中先加入少量石英砂，混合均勻后加入適量的 硅藻土至達(dá)到萃取池的池口；蓋上萃取池的蓋子進(jìn)行靜態(tài)萃取;萃取結(jié)束后得到萃取液；
[0009] 萃取條件為：萃取溶劑為1 %乙酸和甲醇水溶液；萃取溫度100 °C ;靜態(tài)萃取時(shí)間 5min;沖洗體積100% ;靜態(tài)循環(huán)次數(shù)3次;其中，乙酸和甲醇水溶液為99單位體積水、0.5單 位體積的乙酸和〇. 5單位體積的甲醇混合物。
[0010] 在上述的大黃中總蒽醌的提取方法中，所述的萃取池的體積為l〇ml。
[0011] 在上述的大黃中總蒽醌的提取方法中，所述的靜態(tài)萃取的壓力為1500psi。
[0012] 在上述的大黃中總蒽醌的提取方法中，所述的靜態(tài)萃取的吹掃時(shí)間為100s。
[0013] 在上述的大黃中總蒽醌的提取方法中，步驟2具體為:將萃取液在15000r/min的條 件下離心3min，取上清液。
[0014]在上述的大黃中總蒽醌的提取方法中，所述的ASE萃取法所采用的儀器為ASE350 快速溶劑萃取儀
[0015] 本發(fā)明在采用上述技術(shù)方案后，其具有的有益效果為：
[0016] 本發(fā)明的提取方法操作簡單，用時(shí)短，有效的降低了對(duì)技術(shù)人員的操作技能的要 求。
【附圖說明】
[0017] 圖1為本發(fā)明中蘆薈大黃素色譜分析有效性驗(yàn)證的直角坐標(biāo)圖；
[0018] 圖2為本發(fā)明中大黃酸色譜分析有效性驗(yàn)證的直角坐標(biāo)圖；
[0019]圖3為本發(fā)明中大黃素色譜分析有效性驗(yàn)證的直角坐標(biāo)圖；
[0020]圖4為本發(fā)明中大黃酚色譜分析有效性驗(yàn)證的直角坐標(biāo)圖；
[0021]圖5為本發(fā)明中大黃素甲醚色譜分析有效性驗(yàn)證的直角坐標(biāo)圖；
【具體實(shí)施方式】
[0022]下面結(jié)合【具體實(shí)施方式】，對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步的詳細(xì)說明，但不構(gòu)成對(duì) 本發(fā)明的任何限制。
[0023] 實(shí)施例1:
[0024]將大黃經(jīng)粉碎機(jī)粉碎，過四號(hào)篩，約0.15g，精密稱定，與適量硅藻土混合均勻，待 用，先在萃取池加入少量石英砂，再把樣品移入到預(yù)先放好過濾膜的ASEK10ml萃取池中 再加入適量硅藻土，輕輕振搖使之與池口在同一水平線上，擰緊萃取池上蓋。萃取結(jié)束后， 把萃取液轉(zhuǎn)移于50ml容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，在15000r/min下離心3min，取上清液， 進(jìn)入LC測定。
[0025] 萃取條件(見表1)為：
[0026] 表 1
[0029]乙酸和甲醇水溶液為99單位體積水、0.5單位體積的乙酸和0.5單位體積的甲醇混 合物
[0030] 分析方法為LC液相色譜法，液相色譜分析條件：
[0031] a)儀器:agilentl260超高效液相色譜儀
[0032] b)色譜柱規(guī)格:Agilent ZORBAX Extend_C18 1 ? 8tim 4 ? 6 X 100mm，即碳 18色譜柱， 直徑4.6mm，長度100mm，粒徑1.8微米；
[0033] c)柱溫：4(TC
[0034] d)流速：0.5mL/min
[0035] e)流動(dòng)相:0_6min:0.1%磷酸-甲醇(體積比40:60)
[0036] 6min: 0.1 %磷酸-甲醇（體積比10 :90)，即第6分鐘前流動(dòng)相為體積比為40 :60的 0.1 %磷酸-甲醇的混合物，在第6分鐘時(shí)，流動(dòng)相為體積比為10 :90的0.1 %磷酸-甲醇的混 合物。
[0037] f)檢測波長：254nm [0038] 色譜分析有效性驗(yàn)證：
[0039] 取蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚、對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每lml 含16ug的溶液，大黃素甲醚8ug。即得。
[0040] 取蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚對(duì)照品適量，精密稱定，置棕 色量瓶中，加甲醇制成蘆薈大黃素〇. 〇 1295mg/ml、大黃酸0.01422mg/ml、大黃素0.0102lmg/ ml、大黃酚〇. 〇1215mg/ml、大黃素甲醚0.005385mg/ml的溶液，然后分別精密吸取該溶液0.5 yl、0.8yl、lyl、1.5yl、2ul 進(jìn)入 LC 測定，結(jié)果詳見表 2-1、表 2-2、表 2-3、表 2-4、表 2-5;附圖 1、 附圖2、附圖3、附圖4、附圖5分別與表2-1、表2-2、表2-3、表2-4、表2-5對(duì)應(yīng)，附圖1、附圖2、附 圖3、附圖4、附圖5的橫坐標(biāo)表示濃度，縱坐標(biāo)表示峰面積。
[0041]表2-1蘆薈大黃素線性試驗(yàn)結(jié)果
[0044]表2-2大黃酸線性試驗(yàn)結(jié)果
[0046]表2-3大黃素線性試驗(yàn)結(jié)果
[0048]表2-4大黃酚線性試驗(yàn)結(jié)果
[0050]表2-5大黃酚線性試驗(yàn)結(jié)果
[0052] 1.1實(shí)施例1的萃取方法的重現(xiàn)性驗(yàn)證：
[0053]取相同批號(hào)的樣品（批號(hào)：20150701)0.15g，共5份，精密稱定，按ASE提取方法提取 供試品溶液，進(jìn)樣量為lyL，以上述的色譜條件平行試驗(yàn)，測得樣品中蘆薈大黃素、大黃酸、 大黃素、大黃酚、大黃素甲醚的含量見表三，RSD為1.02%，試驗(yàn)表明ASE提取方法重復(fù)性良 好，結(jié)果詳見表3
[0054]表 3
[0056] 1.2實(shí)施例1的萃取方法的精確度測試
[0057] 采用實(shí)施例1的ASE萃取方法和藥典的萃取方法對(duì)大黃進(jìn)行萃取，大黃為3批，批號(hào) 分別為 150912,1511012,20150701;
[0058] 實(shí)施例1的ASE萃取方法對(duì)同一批次的大黃采用兩套相同規(guī)格的設(shè)備平行測試兩 次，分別為ASE1和ASE2表示。
[0059]具體測試結(jié)果見下表4;
[0060]表 4
[0062]以上所述的僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，凡在本發(fā)明的精神和原則范圍內(nèi)所作的任 何修改、等同替換和改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種大黃中總蒽醌的提取方法，其特征在于，包括以下步驟： 步驟1:將大黃粉碎后，過篩； 步驟2:稱取0.15重量份大黃粉，與適量硅藻土混合均勻待用； 步驟3:在預(yù)先放好過濾膜的萃取池中先加入少量石英砂，混合均勻后加入適量的硅藻 土至達(dá)到萃取池的池口；蓋上萃取池的蓋子進(jìn)行靜態(tài)萃取;萃取結(jié)束后得到萃取液； 萃取條件為:萃取溶劑為體積比為1 %乙酸和甲醇水溶液;萃取溫度100°c;靜態(tài)萃取時(shí) 間5min;沖洗體積100 % ;靜態(tài)循環(huán)次數(shù)3次，其中，乙酸和甲醇水溶液為99單位體積水、0.5 單位體積的乙酸和〇. 5單位體積的甲醇混合物。2. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的大黃中總蒽醌的提取方法，其特征在于，所述的萃取池的體積 為10ml。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的大黃中總蒽醌的提取方法，其特征在于，所述的靜態(tài)萃取的壓 力為 1500psi。4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的大黃中總蒽醌的提取方法，其特征在于，所述的靜態(tài)萃取的吹 掃時(shí)間為100s。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的大黃中總蒽醌的提取方法，其特征在于，步驟2具體為:將萃取 液在15000r/min的條件下離心3min，取上清液。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的大黃中總蒽醌的提取方法，其特征在于，所述的ASE萃取法所 采用的儀器為ASE350快速溶劑萃取儀。
【文檔編號(hào)】G01N30/06GK105929086SQ201610234890
【公開日】2016年9月7日
【申請(qǐng)日】2016年4月15日
【發(fā)明人】陳學(xué)松, 廖強(qiáng), 韋日偉, 陳佳麗, 王 華, 姚泳成
【申請(qǐng)人】廣西壯族自治區(qū)梧州食品藥品檢驗(yàn)所