一種高性能的人尿液免疫球蛋白g檢測試劑盒的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種高性能的人尿液免疫球蛋白G檢測試劑盒。本發(fā)明的試劑盒，包括試劑2，所述試劑2為標記有兔抗人免疫球蛋白G多克隆抗體的膠乳顆粒溶液；其中，所述膠乳顆粒粒徑范圍為130nm～300nm，每升試劑2中抗體的用量為10ml～20ml。本發(fā)明可替代進口試劑，節(jié)約病患開支；同時能夠提高檢測效率。
【專利說明】
一種高性能的人尿液免疫球蛋白G檢測試劑盒
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及的是生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及的是一種高性能的人尿液免疫球蛋白G 檢測試劑盒。
【背景技術(shù)】
[0002] IgG分子由兩條輕鏈（k或A)和兩條y重鏈組成。大約80%的血清免疫球蛋白為 IgG;其主要作用是防御微生物、直接中和毒素以及誘導補體結(jié)合。IgG是唯一能夠穿越胎盤 屏障，為胎兒和新生兒提供被動免疫保護的免疫球蛋白。這種母體保護逐漸減少，直到嬰兒 自身的免疫系統(tǒng)開始發(fā)育(在大約6個月時）。在18個月時血清/血漿中的免疫系統(tǒng)接近成人 水平。
[0003] IgG是血液中主要的免疫球蛋白，多數(shù)以單體形式存在。主要由脾臟和淋巴結(jié)合 成，不經(jīng)腎小球濾過，故正常人尿中含量極低。尿中IgG升高，與腎小球破壞程度正相關(guān)。貧 血、高血壓、糖尿病、甲亢和妊娠后期等，腎血流量增加使小球內(nèi)濾過壓梯度增高，IgG等在 壓力增高的驅(qū)動下克服濾過膜阻力濾出增加。感染、腎中毒、血管病變和免疫損傷均可使濾 過膜孔徑增大。單純的孔徑增大時，以NAG、I gG濾出增多為主，ALb、TRY排出率增加不明顯， si值升高，形成非選擇性蛋白尿。當濾過膜損IgG排出率梯度增加，尿中其含量變化可作為 濾過膜損傷程度的標志蛋白。測定尿液中的IgG以及尿白蛋白，可區(qū)分選擇性和非選擇性腎 小管蛋白尿，因為IgG僅在非選擇性腎小球蛋白尿（IgG/白蛋白>0.03mg/mg)時顯著增加。此 外，尿液中IgG的測量可用于監(jiān)測和評估腎小球蛋白尿、特發(fā)性膜性腎病、小兒紫癜性腎炎 (HSPN)、糖尿病、高血壓、狼瘡性腎炎和小兒急性腎小球腎炎。故而急需開發(fā)一種能夠檢測 人尿液免疫球蛋白G檢測試劑盒。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 為了改善上述存在問題，本發(fā)明提供了一種高性能的人尿液免疫球蛋白G檢測試 劑盒。
[0005] 為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：
[0006] -種高性能的人尿液免疫球蛋白G檢測試劑盒，包括試劑2,所述試劑2為標記有兔 抗人免疫球蛋白G多克隆抗體的膠乳顆粒溶液。其中，試劑1選用常規(guī)的磷酸鹽緩沖液、 Good's緩沖液或甘氨酸緩沖液即可。
[0007] 值得說明的是，本發(fā)明是針對試劑盒中的試劑2進行改進，然而試劑1選用市面上 的常用試劑均可。
[0008] 本發(fā)明的膠乳顆粒粒徑范圍為130nm~300nm，每升試劑2中抗體的用量為10ml~ 20ml 〇
[0009] 具體地，本發(fā)明是采用化學偶聯(lián)方法將兔抗人免疫球蛋白G多克隆抗體標記在膠 乳顆粒上。
[0010] 作為一種優(yōu)選，所述試劑盒對樣本進行檢測時，樣本與抗體的體積比為1:1.6~1: 8〇
[0011] 所述試劑盒是基于膠乳免疫比濁法檢測人尿液免疫球蛋白G，其線性范圍為1.00 mg/L~80.00mg/L，抗原過剩范圍達到13000mg/L。
[0012] 具體地，所述兔抗人免疫球蛋白G多克隆抗體為Dako公司生產(chǎn)的兔抗人免疫球蛋 白G多克隆抗體。
[0013] 另外，所述試劑盒適用于具有自動樣本稀釋功能的全自動分析儀器，如迪瑞、邁 瑞、Roche、Hitachi、01ympus等多種全自動生化分析儀。
[0014] 本發(fā)明具有以下優(yōu)點及有益效果：
[0015] 1、使用本發(fā)明的試劑盒對人尿液中的免疫球蛋白G進行測定，因線性范圍較進口 試劑提高33%，使用時大幅度減少了需要人工稀釋復測的樣本數(shù)量，大幅度節(jié)約了人力和 試劑，極大地提高了檢測效率，并節(jié)約了成本。
[0016] 2、本發(fā)明的試劑盒抗原過剩范圍廣，有效避免了臨床結(jié)果被低估甚至假陰性結(jié)果 的出現(xiàn)，測定結(jié)果可靠性相比進口試劑更高。
[0017] 3、本發(fā)明采用成熟的化學偶聯(lián)膠乳標記方法，能夠規(guī)?；a(chǎn)，且能夠配套市面 上絕大多數(shù)自動化分析儀器使用，便于推廣使用。
[0018] 4、采用本發(fā)明的試劑盒進行檢測，可替代進口試劑，節(jié)約病患開支。
【附圖說明】
[0019] 圖1為本發(fā)明-實施例1的線性稀釋圖。
[0020] 圖2為本發(fā)明-實施例2的線性稀釋圖。
[0021]圖3為本發(fā)明-實施例3的線性稀釋圖。
[0022]圖4為本發(fā)明-實施例4的線性稀釋圖。
[0023]圖5為本發(fā)明-實施例5的線性稀釋圖。
[0024]圖6為本發(fā)明-實施例6的線性稀釋圖。
[0025]圖7為本發(fā)明-實施例7的線性稀釋圖。
[0026]圖8為本發(fā)明-實施例8的線性稀釋圖。
[0027]圖9為本發(fā)明-實施例9的線性稀釋圖。
[0028] 圖10為本發(fā)明-實施例10的線性稀釋圖。
[0029] 圖11為本發(fā)明-實施例11的線性稀釋圖。
【具體實施方式】
[0030] 下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步說明，但本發(fā)明的實施方式不限于下列實施 例。
[0031] 實施例1
[0032]本實施例的膠乳顆粒粒徑為200nm，每升試劑2標記16ml Dako公司生產(chǎn)的兔抗人 免疫球蛋白G多克隆抗體，使用膠乳免疫比濁中最常規(guī)的磷酸鹽緩沖液作為試劑1，采用自 動分析儀最常見參數(shù)試劑1:試劑2比例240iil :80iil，樣本預先稀釋15倍后加入8iU稀釋過的 樣本到反應體系中（即樣本與抗體比例為1:2.4)。
[0033]使用Hitachi7170全自動生化分析儀，波長為600nm單波長，兩點終點法18-34讀點 計算，數(shù)據(jù)如下：
[0034]表1校準數(shù)據(jù)
[0036] 表2線性稀釋
[0038]具體如圖1所示，圖中方程為線性回歸方程，R2為線性系數(shù)，估計值根據(jù)稀釋比例 帶入回歸方程計算，R>0.99，估計值和實測值0~8之間的絕對偏差<0.5，8~80之間的相 對偏差<10%，則說明線性合格。
[0039] 表3檢測下限
[0042] 表4抗原過剩驗證

[0044] 從表1~4可以看出，本實施例的UIgG試劑，在1.00mg/L~80.00mg/L內(nèi)滿足線性稀 釋實測值與估計值偏差<10%，且檢測下限也能達到l.〇〇mg/L(精密度CV<20%)，符合國 家相關(guān)法規(guī)要求，證明線性范圍達到1 ? 〇〇mg/L~80 ? OOmg/L;另外，從抗原過剩驗證可以看 出，實際抗原過剩范圍高于13000mg/L，滿足抗原過剩范圍達到13000mg/L的要求。
[0045] 實施例2
[0046]本實施例的膠乳顆粒粒徑為130nm，每升試劑2標記10ml Dako公司生產(chǎn)的兔抗人 免疫球蛋白G多克隆抗體，使用膠乳免疫比濁中最常規(guī)的磷酸鹽緩沖液作為試劑1，采用自 動分析儀最常見參數(shù)試劑1:試劑2比例240iil :80iil，樣本預先稀釋20倍后加入lOiil稀釋過 的樣本到反應體系中（即樣本與抗體比例為1:1.6)。
[0047]使用Hitachi7170全自動生化分析儀，波長為600nm單波長，兩點終點法18-34讀點 計算，數(shù)據(jù)如下。
[0048] 表5校準數(shù)據(jù)
[0050] 表6線性稀釋
[0052]具體如圖2所示，圖中方程為線性回歸方程，R2為線性系數(shù)，估計值根據(jù)稀釋比例 帶入回歸方程計算，R>0.99，估計值和實測值0~8之間的絕對偏差<0.5，8~80之間的相 對偏差<10%，則說明線性合格。
[0053] 表7檢測下限
[0058] 從表5~8可以看出，實施例2的UIgG試劑，在l.OOmg/L~80.00mg/L內(nèi)滿足線性稀 釋實測值與估計值偏差<10%，且檢測下限也能達到l.〇〇mg/L(精密度CV<20%)，符合國 家相關(guān)法規(guī)要求，證明線性范圍達到1 ? 〇〇mg/L~80 ? OOmg/L;另外，從抗原過剩驗證可以看 出，實際抗原過剩范圍高于13000mg/L，滿足抗原過剩范圍達到13000mg/L的要求。但抗原過 剩已處于邊緣狀態(tài)，靈敏度也已經(jīng)處于邊緣狀態(tài)。再降低抗體使用量或膠乳粒徑，難以保證 試劑性能滿足要求。
[0059] 實施例3
[0060]本實施例的膠乳顆粒粒徑為200nm，每升試劑2標記10ml Dako公司生產(chǎn)的兔抗人 免疫球蛋白G多克隆抗體，使用膠乳免疫比濁中最常規(guī)的磷酸鹽緩沖液作為試劑1，采用自 動分析儀最常見參數(shù)試劑1:試劑2比例240iil :80iil，樣本預先稀釋20倍后加入lOiil稀釋過 的樣本到反應體系中（即樣本與抗體比例為1:1.6)。
[00611使用Hitachi7170全自動生化分析儀，波長為600nm單波長，兩點終點法18-34讀點 計算，數(shù)據(jù)如下。
[0062]表9校準數(shù)據(jù)
[0066]具體如圖3所示，圖中方程為線性回歸方程，R2為線性系數(shù)，估計值和實測值0~8 之間的絕對偏差<0.5，8~80之間的相對偏差< 10 %，則說明線性合格。
[0067] 表11檢測下限
[0071]
[0072] 從表9~12可以看出，實施例3的UIgG試劑，在1 ? OOmg/L~80 ? OOmg/L內(nèi)滿足線性稀 釋實測值與估計值偏差<10%，且檢測下限也能達到l.〇〇mg/L(精密度CV<20%)，符合國 家相關(guān)法規(guī)要求，證明線性范圍達到1 ? 〇〇mg/L~80 ? OOmg/L;另外，從抗原過剩驗證可以看 出，實際抗原過剩范圍高于13000mg/L，滿足抗原過剩范圍達到13000mg/L的要求。但抗原過 剩已處于邊緣狀態(tài)，靈敏度也已經(jīng)處于邊緣狀態(tài)。再降低抗體使用量，難以保證試劑性能滿 足要求。
[0073] 實施例4
[0074]本實施例的膠乳顆粒粒徑為300nm，每升試劑2標記10ml Dako公司生產(chǎn)的兔抗人 免疫球蛋白G多克隆抗體，使用膠乳免疫比濁中最常規(guī)的磷酸鹽緩沖液作為試劑1，采用自 動分析儀最常見參數(shù)試劑1:試劑2比例240iil :80iil，樣本預先稀釋20倍后加入lOiil稀釋過 的樣本到反應體系中（即樣本與抗體比例為1:1.6)。
[0075]使用Hitachi7170全自動生化分析儀，波長為600nm單波長，兩點終點法18-34讀點 計算，數(shù)據(jù)如下。
[0076]表13校準數(shù)據(jù)
[0078] 表14線性稀釋
[0081]具體如圖4所示，圖中方程為線性回歸方程，R2為線性系數(shù)，估計值根據(jù)稀釋比例 帶入回歸方程計算，R>0.99，估計值和實測值0~8之間的絕對偏差<0.5，8~80間的相對 偏差<10%，則說明線性合格。
[0082] 表15檢測下限
[0086] 從表13~16可以看出，實施例4的UIgG試劑，在1.00mg/L~80.00mg/L內(nèi)滿足線性 稀釋實測值與估計值偏差<10%，且檢測下限也能達到l.〇〇mg/L(精密度CV<20%)，符合 國家相關(guān)法規(guī)要求，證明線性范圍達到1 ? 〇〇mg/L~80 ? 00mg/L;另外，從抗原過剩驗證可以 看出，實際抗原過剩范圍高于13000mg/L，滿足抗原過剩范圍達到13000mg/L的要求。但抗原 過剩已處于邊緣狀態(tài)，靈敏度也已經(jīng)處于邊緣狀態(tài)。再降低抗體使用量，難以保證試劑性能 滿足要求。
[0087] 實施例5
[0088] 本實施例的膠乳顆粒粒徑為130nm，每升試劑2標記20ml Dako公司生產(chǎn)的兔抗人 免疫球蛋白G多克隆抗體，使用膠乳免疫比濁中最常規(guī)的磷酸鹽緩沖液作為試劑1，采用自 動分析儀最常見參數(shù)試劑1:試劑2比例240iil :80iil，樣本預先稀釋10倍后加入lOiil稀釋過 的樣本到反應體系中（即樣本與抗體比例為1:1.6)。
[0089] 使用Hitachi7170全自動生化分析儀，波長為600nm單波長，兩點終點法18-34讀點 計算，數(shù)據(jù)如下。
[0090]表17校準數(shù)據(jù)
[0095] 具體如圖5所示，圖中方程為線性回歸方程，R2為線性系數(shù)，估計值根據(jù)稀釋比例 帶入回歸方程計算，R>0.99，估計值和實測值0~8之間的絕對偏差<0.5，8~80間的相對 偏差<10%，則說明線性合格。
[0096] 表19檢測下限

[0100] 從表17~20可以看出，實施例5的UIgG試劑，在1.00mg/L~80.00mg/L內(nèi)滿足線性 稀釋實測值與估計值偏差<10%，且檢測下限也能達到l.〇〇mg/L(精密度CV<20%)，符合 國家相關(guān)法規(guī)要求，證明線性范圍達到1 ? 〇〇mg/L~80 ? 00mg/L;另外，從抗原過剩驗證可以 看出，實際抗原過剩范圍高于13000mg/L，滿足抗原過剩范圍達到13000mg/L的要求。但抗體 用量太大，處于標記工藝的極限水平，且成本過高。
[0101] 實施例6
[0102]本實施例的膠乳顆粒粒徑為300nm，每升試劑2標記20ml Dako公司生產(chǎn)的兔抗人 免疫球蛋白G多克隆抗體，使用膠乳免疫比濁中最常規(guī)的磷酸鹽緩沖液作為試劑1，采用自 動分析儀最常見參數(shù)試劑1:試劑2比例240iil :80iil，樣本預先稀釋10倍后加入lOiil稀釋過 的樣本到反應體系中（即樣本與抗體比例為1:1.6)。
[0103]使用Hitachi7170全自動生化分析儀，波長為600nm單波長，兩點終點法18-34讀點 計算，數(shù)據(jù)如下。
[0104]表21校準數(shù)據(jù)
[0106] 表22線性稀釋
L0109」具體如圖6所示，圖中方程為線性回歸方程，Rz為線性系數(shù)，估計值根據(jù)稀釋比例 帶入回歸方程計算，R>0.99，估計值和實測值0~8之間的絕對偏差<0.5，8~80間的相對 偏差<10%，則說明線性合格。
[0110] 表23檢測下限
[0114] 從表21~24可以看出，實施例6的UIgG試劑，在1.00mg/L~80.00mg/L內(nèi)滿足線性 稀釋實測值與估計值偏差<10%，且檢測下限也能達到l.〇〇mg/L(精密度CV<20%)，符合 國家相關(guān)法規(guī)要求，證明線性范圍達到1 ? 〇〇mg/L~80 ? 00mg/L;另外，從抗原過剩驗證可以 看出，實際抗原過剩范圍高于13000mg/L，滿足抗原過剩范圍達到13000mg/L的要求。但抗體 用量太大，處于標記工藝的極限水平，且成本過高。
[0115] 實施例7
[0116]本實施例的膠乳顆粒粒徑為300nm，每升試劑2標記20ml Dako公司生產(chǎn)的兔抗人 免疫球蛋白G多克隆抗體，使用膠乳免疫比濁中最常規(guī)的磷酸鹽緩沖液作為試劑1，采用自 動分析儀最常見參數(shù)試劑1:試劑2比例240yl :80iU，樣本預先稀釋25倍后加入5yl稀釋過的 樣本到反應體系中（即樣本與抗體比例為1:8)。
[0117] 使用Hitachi7170全自動生化分析儀，波長為600nm單波長，兩點終點法18-34讀點 計算，數(shù)據(jù)如下。
[0118] 表25校準數(shù)據(jù)
[0122] 具體如圖7所示，圖中方程為線性回歸方程，R2為線性系數(shù)，估計值根據(jù)稀釋比例 帶入回歸方程計算，R>0.99，估計值和實測值0~8之間的絕對偏差<0.5，8~80間的相對 偏差<10%，則說明線性合格。
[0123] 表27檢測下限

[0127] 從表24~28可以看出，實施例7的UIgG試劑，在1.00mg/L~80.00mg/L內(nèi)滿足線性 稀釋實測值與估計值偏差<10%，且檢測下限也能達到l.〇〇mg/L(精密度CV<20%)，符合 國家相關(guān)法規(guī)要求，證明線性范圍達到1 ? 〇〇mg/L~80 ? 00mg/L;另外，從抗原過剩驗證可以 看出，實際抗原過剩范圍高于13000mg/L，滿足抗原過剩范圍達到13000mg/L的要求。但抗體 用量太大，處于標記工藝的極限水平，且成本過高。
[0128] 實施例8
[0129]本實施例的膠乳顆粒粒徑為300nm，每升試劑2標記20ml Dako公司生產(chǎn)的兔抗人 免疫球蛋白G多克隆抗體，使用膠乳免疫比濁中最常規(guī)的磷酸鹽緩沖液作為試劑1，采用自 動分析儀最常見參數(shù)試劑1:試劑2比例240iil :80iil，樣本預先稀釋20倍后加入8iU稀釋過的 樣本到反應體系中（即樣本與抗體比例為1:1.6)。
[0130]使用Hitachi7170全自動生化分析儀，波長為600nm單波長，兩點終點法18-34讀點 計算，數(shù)據(jù)如下。
[0131]表29校準數(shù)據(jù)
[0133] 表30線性稀釋
[0135] 具體如圖8所示，圖中方程為線性回歸方程，R2為線性系數(shù)，估計值根據(jù)稀釋比例 帶入回歸方程計算，R>0.99，估計值和實測值0~8之間的絕對偏差<0.5，8~80間的相對 偏差<10%，則說明線性合格。
[0136] 表31檢測下限
[0139] 表32抗原過剩驗證
[0141] 從表29~32可以看出，實施例8的UIgG試劑，在1.00mg/L~80.00mg/L內(nèi)滿足線性 稀釋實測值與估計值偏差<10%，且檢測下限也能達到l.〇〇mg/L(精密度CV<20%)，符合 國家相關(guān)法規(guī)要求，證明線性范圍達到1 ? 〇〇mg/L~80 ? 00mg/L;另外，從抗原過剩驗證可以 看出，實際抗原過剩范圍高于13000mg/L，滿足抗原過剩范圍達到13000mg/L的要求。但抗體 用量太大，處于標記工藝的極限水平，且成本過高。
[0142] 通過實施例2~4對比可以看出，在抗體用量和抗原抗體比例一定的情況下，提高 膠乳顆粒粒徑有利于試劑靈敏度，但因為膠乳試劑穩(wěn)定性限制，不能無限制提高膠乳粒徑， 優(yōu)選的膠乳粒徑范圍為130nm~300nm〇
[0143] 通過實施例2對比實施例5,實施例4對比實施例6可以看出，在膠乳顆粒粒徑和抗 原抗體比例一定的情況下，提高抗體用量，有利于提高靈敏度，但受到標記工藝以及成本限 制，不能無限制提高抗體量，優(yōu)選抗體使用體積范圍為1 〇m 1~20m 1 /L試劑2。
[0144] 通過對比實施例7和實施例8,在膠乳粒徑和抗體使用量一定的情況下，可以看出 抗原與抗體比例在增加時，靈敏度提高，但抗原過剩范圍下降，反之靈敏度下降，抗原過剩 范圍提高，故而，將抗原抗體比例控制在一定范圍內(nèi)能夠有效的確保試劑線性和抗原過剩， 作為一種優(yōu)選，抗原抗體比例范圍為1:1.6~1:8。
[0145] 實施例9
[0146] 本實施例的膠乳顆粒粒徑為200nm，每升試劑2標記16ml Dako公司生產(chǎn)的兔抗人 免疫球蛋白G多克隆抗體，使用膠乳免疫比濁中最常規(guī)的Good's緩沖液作為試劑1，采用自 動分析儀最常見參數(shù)試劑1:試劑2比例240iil:80iil，樣本預先稀釋15倍后加入8iU稀釋過的 樣本到反應體系中（即樣本與抗體比例為1:2.4)。
[0147] 使用Hitachi7170全自動生化分析儀，波長為600nm單波長，兩點終點法18-34讀點 計算，數(shù)據(jù)如下。
[0148] 表33校準數(shù)據(jù)
[0150] 表34線性稀釋
[0153] 具體如圖9所示，圖中方程為線性回歸方程，R2為線性系數(shù)，估計值根據(jù)稀釋比例 帶入回歸方程計算，R>0.99，估計值和實測值0~8之間的絕對偏差<0.5，8~80間的相對 偏差<10%，則說明線性合格。
[0154] 表35檢測下限

[0158] 從表33~36可以看出，實施例9的UIgG試劑，在l.OOmg/L~80.00mg/L內(nèi)滿足線性 稀釋實測值與估計值偏差<10%，且檢測下限也能達到l.〇〇mg/L(精密度CV<20%)，符合 國家相關(guān)法規(guī)要求，證明線性范圍達到1 ? 〇〇mg/L~80 ? 00mg/L;另外，從抗原過剩驗證可以 看出，實際抗原過剩范圍高于13000mg/L，滿足抗原過剩范圍達到13000mg/L的要求。
[0159] 實施 10
[0160]本實施例的膠乳顆粒粒徑為200nm，每升試劑2標記16ml Dako公司生產(chǎn)的兔抗人 免疫球蛋白G多克隆抗體，使用膠乳免疫比濁中最常規(guī)的甘氨酸緩沖液作為試劑1，采用自 動分析儀最常見參數(shù)試劑1:試劑2比例240iil :80iil，樣本預先稀釋15倍后加入8iU稀釋過的 樣本到反應體系中（即樣本與抗體比例為1:2.4)。
[0161] 使用Hitachi7170全自動生化分析儀，波長為600nm單波長，兩點終點法18-34讀點 計算，數(shù)據(jù)如下。
[0162] 表37校準數(shù)據(jù)
[0164] 表38線性稀釋
[0167] 具體如圖10所示，圖中方程為線性回歸方程，R2為線性系數(shù)，估計值根據(jù)稀釋比例 帶入回歸方程計算，R>0.99，估計值和實測值0~8之間的絕對偏差<0.5，8~80間的相對 偏差<10%，則說明線性合格。
[0168] 表39檢測下限
[0172] 從表37~40可以看出，實施例10的UIgG試劑，在1.00mg/L~80.00mg/L內(nèi)滿足線性 稀釋實測值與估計值偏差<10%，且檢測下限也能達到l.〇〇mg/L(精密度CV<20%)，符合 國家相關(guān)法規(guī)要求，證明線性范圍達到1 ? OOmg/L~80 ? OOmg/L;另外，從抗原過剩驗證可以 看出，實際抗原過剩范圍高于13000mg/L，滿足抗原過剩范圍達到13000mg/L的要求。
[0173]實施 11
[0174]本實施例的膠乳顆粒粒徑為200nm，每升試劑2標記16ml Dako公司生產(chǎn)的兔抗人 免疫球蛋白G多克隆抗體，使用膠乳免疫比濁中最常規(guī)的磷酸鹽緩沖液作為試劑1，采用自 動分析儀最常見參數(shù)試劑1:試劑2比例240iil :80iil，樣本預先稀釋15倍后加入8iU稀釋過的 樣本到反應體系中（即樣本與抗體比例為1:2.4)。
[0175]使用Hitachi7170全自動生化分析儀，波長為600nm單波長，兩點終點法18-34讀點 計算，數(shù)據(jù)如下。
[0176]表41校準數(shù)據(jù)
[0178] 表42線性稀釋
[0180] 具體如圖11所示，圖中方程為線性回歸方程，R2為線性系數(shù)，估計值根據(jù)稀釋比例 帶入回歸方程計算，R>0.99，估計值和實測值0~8之間的絕對偏差<0.5，8~80間的相對 偏差<10%，則說明線性合格。
[0181] 表43檢測下限
[0183] 表44抗原過剩驗證
[0185] 從表41~44可以看出，實施例11的UIgG試劑，在1. OOmg/L~80.0 Omg/L內(nèi)滿足線性 稀釋實測值與估計值偏差<10%，線性系數(shù)R>0.99,且檢測下限也能達到1.00mg/L(精密 度CV<20% )，符合國家相關(guān)法規(guī)要求，證明線性范圍達到1 ? OOmg/L~80 ? OOmg/L;另外，從 抗原過剩驗證可以看出，實際抗原過剩范圍高于13000mg/L，滿足抗原過剩范圍達到13000 mg/L的要求。
[0186] 按照上述實施例，便可很好地實現(xiàn)本發(fā)明。
【主權(quán)項】
1. 一種高性能的人尿液免疫球蛋白G檢測試劑盒，包括試劑2，其特征在于:所述試劑2 為標記有兔抗人免疫球蛋白G多克隆抗體的膠乳顆粒溶液； 其中，所述膠乳顆粒粒徑范圍為130nm~300nm，每升試劑2中抗體的用量為IOml~ 20ml 〇2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高性能的人尿液免疫球蛋白G檢測試劑盒，其特征在于， 所述試劑盒對樣本進行檢測時，樣本與抗體的體積比為1:1.6~1:8。3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種高性能的人尿液免疫球蛋白G檢測試劑盒，其特征在 于，采用化學偶聯(lián)方法將兔抗人免疫球蛋白G多克隆抗體標記在膠乳顆粒上。4. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種高性能的人尿液免疫球蛋白G檢測試劑盒，其特征在 于，所述試劑盒是基于膠乳免疫比濁法檢測人尿液免疫球蛋白G，其線性范圍為1.00mg/L~ 80.00mg/L，抗原過剩范圍達到13000mg/L。5. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種高性能的人尿液免疫球蛋白G檢測試劑盒，其特征在 于，所述兔抗人免疫球蛋白G多克隆抗體為Dako公司生產(chǎn)的兔抗人免疫球蛋白G多克隆抗 體。6. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種高性能的人尿液免疫球蛋白G檢測試劑盒，其特征在 于，所述試劑盒適用于具有自動樣本稀釋功能的全自動分析儀器。7. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種高性能的人尿液免疫球蛋白G檢測試劑盒，其特征在 于，還包括試劑1，所述試劑1為磷酸鹽緩沖液、Good's緩沖液或甘氨酸緩沖液。
【文檔編號】G01N33/68GK105929171SQ201610227897
【公開日】2016年9月7日
【申請日】2016年4月13日
【發(fā)明人】唐向珍, 王延輝, 段茂華
【申請人】柏榮診斷產(chǎn)品（上海）有限公司