一種密蒙花中蒙花苷的測(cè)定方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種密蒙花中蒙花苷的測(cè)定方法，包括以下步驟：步驟1：將密蒙花粉碎后采用ASE萃取法萃取得到萃取液；步驟2：將萃取液離心分離后，得到上清液；步驟3：將上清液采用液相色譜法進(jìn)行分析；其中，液相色譜法的分析條件為：a)儀器：雙三元液相色譜儀b)色譜柱規(guī)格：碳18色譜柱，3*100mm 3umc)柱溫：40℃d)流速：0.5mL/mine)流動(dòng)相：甲醇?0.1％醋酸溶液，具體來(lái)說(shuō)，甲醇和質(zhì)量百分比為0.1％醋酸溶液體積比48：52，該體積比為20℃條件下的體積比；f)檢測(cè)波長(zhǎng)：326nm。本發(fā)明提供了一種密蒙花中蒙花苷的測(cè)定方法，該方法操作簡(jiǎn)單，檢測(cè)精度高。
【專利說(shuō)明】
-種密蒙花中蒙花昔的測(cè)定方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明設(shè)及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)領(lǐng)域，特別是一種密蒙花中蒙花巧的測(cè)定方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 2015年藥典記錄了提取密蒙花中蒙花巧的方法:取本品粗粉約0.5g，精密稱定，置 索氏提取器中，加石油酸(60~90°C)100ml，加熱回流2小時(shí)，棄去石油酸，藥渣揮干，再加甲 醇100mL繼續(xù)加熱回流4小時(shí)，提取液置蒸發(fā)皿中，濃縮至適量，轉(zhuǎn)移至50ml量瓶中，殘?jiān)?容器用少量甲醇洗涂，洗液并入同一量瓶中.加甲醇至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。在 1 SOOOr/min下離屯、3min，取上清液，進(jìn)入LC測(cè)定。
[0003] 其液相色譜的參數(shù)為：W十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；W甲醇-0.1 %冰醋酸 (48:52)為流動(dòng)相;檢測(cè)波長(zhǎng)為326nm。
[0004] 藥典的方法操作過(guò)程復(fù)雜，對(duì)操作人員的操作技能要求高。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是提供一種密蒙花中蒙花巧的測(cè)定方法，該方法操作簡(jiǎn)單，檢測(cè)精 度高。
[0006] 本發(fā)明提供的技術(shù)方案為:一種密蒙花中蒙花巧的測(cè)定方法，包括W下步驟：
[0007] 步驟1:將密蒙花粉碎后采用ASE萃取法萃取得到萃取液；
[000引步驟2:將萃取液離屯、分離后，得到上清液；
[0009] 步驟3:將上清液采用液相色譜法進(jìn)行分析；
[0010] 其中，液相色譜法的分析條件為：
[0011] a)儀器:雙=元液相色譜儀
[001^ b)色譜柱規(guī)格:碳18色譜柱，3*100mm 3um [OOU] c)柱溫：4(TC
[0014] d)流速:0.5mL/min
[0015] e)流動(dòng)相：甲醇-0.1%醋酸溶液，具體來(lái)說(shuō)，甲醇和質(zhì)量百分比為0.1%醋酸溶液 體積比48:52，該體積比為2(TC條件下的體積比；
[0016] f)檢測(cè)波長(zhǎng):326nm。
[0017] 在上述的密蒙花中蒙花巧的測(cè)定方法中，所述的步驟1具體為：
[0018] Sl 1:將密蒙花粉碎后，過(guò)篩；
[0019] S12:稱取0.5重量份密蒙花粉，與0.5重量份娃藻±混合均勻待用；
[0020] S13:在預(yù)先放好過(guò)濾膜的萃取池中，加入適量的娃藻±至達(dá)到萃取池的池口；蓋 上萃取池的蓋子；
[0021] S14:對(duì)萃取池內(nèi)的混合物進(jìn)行去醋；
[0022] 去醋條件為：萃取溶劑為正己燒；萃取溫度80°C;靜態(tài)萃取時(shí)間7min;沖洗體積 100%;靜態(tài)循環(huán)次數(shù)1次。
[0023] S15: S14結(jié)束后，對(duì)萃取池內(nèi)的混合物進(jìn)行提取;提取結(jié)束后得到萃取液；
[0024] 提取條件為：萃取溶劑為甲醇；萃取溫度100°C;靜態(tài)萃取時(shí)間5min;沖洗體積 60%;靜態(tài)循環(huán)次數(shù)2次。
[0025] 在上述的密蒙花中蒙花巧的測(cè)定方法中，所述的萃取池的體積為10ml。
[0026] 在上述的密蒙花中蒙花巧的測(cè)定方法中，所述的S14和S15的靜態(tài)萃取的壓力均為 ISOOpsio
[0027] 在上述的密蒙花中蒙花巧的測(cè)定方法中，所述的S14的吹掃時(shí)間為200s，S15的吹 掃時(shí)間為60s。
[00%]在上述的密蒙花中蒙花巧的測(cè)定方法中，步驟2具體為:將萃取液在1500化/min的 條件下離屯、3min，取上清液。
[0029] 在上述的密蒙花中蒙花巧的測(cè)定方法中，所述的儀器為化ermo U3000 UHPLC液相 色譜儀。
[0030] 在上述的密蒙花中蒙花巧的測(cè)定方法中，所述的色譜柱為化ermo Syncronis C18。
[0031] 在上述的密蒙花中蒙花巧的測(cè)定方法中，所述的ASE萃取法所采用的儀器為 ASE350快速溶劑萃取儀。
[0032] 本發(fā)明在采用上述技術(shù)方案后，其具有的有益效果為：
[0033] 本發(fā)明的檢測(cè)方法操作簡(jiǎn)單，精度與藥典方法的精度一致，重復(fù)性好。
【附圖說(shuō)明】
[0034] 圖1為本發(fā)明的色譜分析有效性驗(yàn)證的直角坐標(biāo)圖。
【具體實(shí)施方式】
[0035] 下面結(jié)合【具體實(shí)施方式】，對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明，但不構(gòu)成對(duì) 本發(fā)明的任何限制。
[0036] 實(shí)施例1:
[0037] 將密蒙花經(jīng)粉碎機(jī)粉碎，過(guò)=號(hào)篩，約0.5g，精密稱定，與0.5g娃藻±混合均勻，待 用，移入到預(yù)先放好過(guò)濾膜的ASEWlO ml萃取池中再加入適量娃藻±，輕輕振搖使之與池 口在同一水平線上，梓緊萃取池上蓋。萃取結(jié)束后，把萃取液轉(zhuǎn)移于50ml容量瓶中，用甲醇 稀釋至刻度，在1500化/min下離屯、5min，取上清液，進(jìn)入LC測(cè)定。
[0038] 萃取條件(見(jiàn)表1)為：
[0039] 表 1
[0040]
[0041 ]分析方法為L(zhǎng)C液相色譜法，液相色譜分析條件：
[0042] a)儀器:Thermo雙S元液相化-3000);
[0043] b)色譜柱：Thermo Syncronis C18 3*100mm 3um，即碳 18色譜柱，直徑3mm，長(zhǎng)度 100mm，粒徑3微米；
[0044] 。)柱溫:40°(：;
[0045] d)流速:0.5mL/min;
[0046] e)流動(dòng)相：甲醇-0.1 %冰醋酸(體積比48:52);
[0047] f)檢測(cè)波長(zhǎng):326nm;
[004引色譜分析有效性驗(yàn)證：
[0049]取蒙花巧對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含0.1 mg的溶液，即得。
[(K)加]取蒙花巧對(duì)照品溶液(濃度:0.1321mg/ml)，分別精密吸取該溶液0.扣1、化1、化1、 4山、5山進(jìn)入LC測(cè)定，并依照上述方法測(cè)定，結(jié)果詳見(jiàn)表2;附圖1與表2對(duì)應(yīng)，附圖1橫坐標(biāo)表 示絕對(duì)進(jìn)樣量，縱坐標(biāo)表示峰面積。
[0051]表 2
[0化2]
[0053] 實(shí)施例1的萃取方法的精確度測(cè)試
[0054] 采用實(shí)施例1的ASE萃取方法和藥典的萃取方法對(duì)密蒙花進(jìn)行萃取，密蒙花為4批， 批號(hào)分別為 1508090,151118,20150701,141201;
[0055] 實(shí)施例1的ASE萃取方法對(duì)同一批次的密蒙花平行測(cè)試兩次，分別為ASEl和ASE2表 /J、- O
[0056] 具體測(cè)試結(jié)果見(jiàn)下表3;
[0化7] 表3 [0化引
[0059] W上所述的僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，凡在本發(fā)明的精神和原則范圍內(nèi)所作的任 何修改、等同替換和改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種密蒙花中蒙花苷的測(cè)定方法，其特征在于，包括以下步驟： 步驟1:將密蒙花粉碎后采用ASE萃取法萃取得到萃取液； 步驟2:將萃取液離心分離后，得到上清液； 步驟3:將上清液采用液相色譜法進(jìn)行分析； 其中，液相色譜法的分析條件為： a) 儀器:雙三元液相色譜儀 b) 色譜柱規(guī)格:碳18色譜柱，3*100mm 3um (：)柱溫:40°〇 d) 流速:O · 5mL/min e) 流動(dòng)相：甲醇-O. I %醋酸溶液，體積比48:52 f) 檢測(cè)波長(zhǎng)：326nm〇2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的密蒙花中蒙花苷的測(cè)定方法，其特征在于，所述的步驟1具體 為： Sl 1:將密蒙花粉碎后，過(guò)篩； S12:稱取0.5重量份密蒙花粉，與0.5重量份硅藻土混合均勻待用； S13:在預(yù)先放好過(guò)濾膜的萃取池中，加入適量的硅藻土至達(dá)到萃取池的池口；蓋上萃 取池的蓋子； S14:對(duì)萃取池內(nèi)的混合物進(jìn)行去酯； 去酯條件為：萃取溶劑為正己烷；萃取溫度80°C;靜態(tài)萃取時(shí)間7min;沖洗體積100%; 靜態(tài)循環(huán)次數(shù)1次。 S15: S14結(jié)束后，對(duì)萃取池內(nèi)的混合物進(jìn)行提取;提取結(jié)束后得到萃取液； 提取條件為:萃取溶劑為甲醇；萃取溫度100 °C ;靜態(tài)萃取時(shí)間5min;沖洗體積60 % ;靜 態(tài)循環(huán)次數(shù)2次。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的密蒙花中蒙花苷的測(cè)定方法，其特征在于，所述的萃取池的體 積為l〇ml。4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的密蒙花中蒙花苷的測(cè)定方法，其特征在于，所述的S14和S15的 靜態(tài)萃取的壓力均為1500psi。5. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的密蒙花中蒙花苷的測(cè)定方法，其特征在于，所述的S14的吹掃 時(shí)間為200s，Sl 5的吹掃時(shí)間為60s。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的密蒙花中蒙花苷的測(cè)定方法，其特征在于，步驟2具體為:將萃 取液在15000r/min的條件下離心3min，取上清液。7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的密蒙花中蒙花苷的測(cè)定方法，其特征在于，所述的儀器為 Thermo U3000 UHPLC液相色譜儀。8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的密蒙花中蒙花苷的測(cè)定方法，其特征在于，所述的色譜柱為 Thermo Syncronis C18〇9. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的密蒙花中蒙花苷的測(cè)定方法，其特征在于，所述的ASE萃取法 所采用的儀器為ASE350快速溶劑萃取儀。
【文檔編號(hào)】G01N30/02GK105954380SQ201610254580
【公開(kāi)日】2016年9月21日
【申請(qǐng)日】2016年4月22日
【發(fā)明人】陳學(xué)松, 王麗麗, 韋濤, 梁美艷, 黃新惠
【申請(qǐng)人】廣西壯族自治區(qū)梧州食品藥品檢驗(yàn)所