一種用hplc分離測(cè)定奧培米芬原料藥有關(guān)物質(zhì)的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種用HPLC分離測(cè)定奧培米芬原料藥有關(guān)物質(zhì)的方法，包括如下步驟：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以磷酸調(diào)水pH至2.5～3.5為流動(dòng)相A、甲醇?乙腈為流動(dòng)相B進(jìn)行梯度洗脫，流速為0.8～1.2mL/min，柱溫為32～37℃，采用紫外檢測(cè)器對(duì)奧培米芬原料藥的有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)。本發(fā)明方法具有快速簡便、靈敏度高、準(zhǔn)確可靠的優(yōu)點(diǎn)，適用于分離測(cè)定奧培米芬原料藥的有關(guān)物質(zhì)。本發(fā)明方法通過綜合考慮分析柱、流動(dòng)相、梯度洗脫程序以及流速、柱溫對(duì)分離檢測(cè)的綜合影響，使得檢測(cè)結(jié)果達(dá)到了最優(yōu)化，具有快速簡便、靈敏度高、準(zhǔn)確可靠的優(yōu)點(diǎn)，適用于分離測(cè)定奧培米芬原料藥的有關(guān)物質(zhì)。
【專利說明】
-種用HPLC分離測(cè)定奧培米芬原料藥有關(guān)物質(zhì)的方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明設(shè)及一種奧培米芬原料藥的分析測(cè)定方法，具體設(shè)及一種用HPLC分離測(cè)定 奧培米芬原料藥有關(guān)物質(zhì)的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 奧培米芬是一種具有組織選擇性作用的雌激素激動(dòng)藥和括抗藥。該藥對(duì)雌激素受 體a化3〇)和0化祕(mì))的具有親和性。其生物學(xué)作用是通過與雌激素受體結(jié)合介導(dǎo)。此種結(jié)合 導(dǎo)致在某些組織中雌激素通路的激活(激動(dòng)作用)和阻斷其他雌激素通路(括抗作用），分子 式為C2邊23C102，分子量為378.9，結(jié)構(gòu)式如下：
[0003]
[0004] 為了控制奧培米芬原料藥的質(zhì)量，需要對(duì)主要成分和雜質(zhì)進(jìn)行控制，在現(xiàn)有的技 術(shù)中，沒有適合于快速、簡便、精確分析檢測(cè)奧培米芬原料藥有關(guān)物質(zhì)的分析方法。
[0005] 因此，對(duì)于奧培米芬原料藥有關(guān)物質(zhì)的測(cè)定方法存在進(jìn)一步的改進(jìn)和優(yōu)化需求， 運(yùn)正是本發(fā)明得W完成的動(dòng)力和出發(fā)點(diǎn)所在。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 為了克服現(xiàn)有技術(shù)存在的上述技術(shù)問題，本發(fā)明人在進(jìn)行了大量的深入研究之 后，從而提供了一種用HPLC分離測(cè)定奧培米芬原料藥有關(guān)物質(zhì)的方法，具有快速簡便、靈敏 度高、準(zhǔn)確可靠的優(yōu)點(diǎn)。
[0007] 本發(fā)明通過W下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)，具體而言，設(shè)及一種用HPLC分離測(cè)定奧培米芬原 料藥有關(guān)物質(zhì)的方法，包括如下步驟：W十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，W憐酸調(diào)水pH至 2.5~3.5為流動(dòng)相A、甲醇-乙臘為流動(dòng)相B進(jìn)行梯度洗脫，流速為0.8~1.2mL/min，柱溫為 32~37°C，采用紫外檢測(cè)器對(duì)奧培米芬原料藥的有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)。
[000引優(yōu)選的，所述十八烷基硅烷鍵合硅膠的粒徑為如m，柱內(nèi)徑為4.6mm，柱長為250mm。
[0009] 優(yōu)選的，W憐酸調(diào)水抑至3.0為流動(dòng)相A。
[0010] 優(yōu)選的，所述流動(dòng)相B中，甲醇和乙臘的體積比為30:70。
[0011] 優(yōu)選的，在梯度洗脫時(shí)，流速為1. OmL/min，柱溫為35°C。
[0012] 優(yōu)選的，所述梯度洗脫的具體過程為：
[0013]
[0014] 優(yōu)選的，所述紫外檢測(cè)器的檢測(cè)波長為230nm。
[0015] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果如下:本發(fā)明方法通過綜合考慮分析柱、流動(dòng) 相、梯度洗脫程序W及流速、柱溫對(duì)分離檢測(cè)的綜合影響，使得檢測(cè)結(jié)果達(dá)到了最優(yōu)化，具 有快速簡便、靈敏度高、準(zhǔn)確可靠的優(yōu)點(diǎn)，適用于分離測(cè)定奧培米芬原料藥的有關(guān)物質(zhì)。
【附圖說明】
[0016] 圖1是奧培米芬有關(guān)物質(zhì)的液相譜圖。
【具體實(shí)施方式】
[0017] 下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明。W下實(shí)施例將有助于本領(lǐng)域的技術(shù) 人員進(jìn)一步理解本發(fā)明，但不W任何形式限制本發(fā)明。應(yīng)當(dāng)指出的是，對(duì)本領(lǐng)域的普通技術(shù) 人員來說，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可W做出若干變形和改進(jìn)。運(yùn)些都屬于本發(fā)明 的保護(hù)范圍。
[0018] -種用HPLC分離測(cè)定奧培米芬原料藥有關(guān)物質(zhì)的方法，包括如下步驟：W十八燒 基硅烷鍵合硅膠為填充劑，十八烷基硅烷鍵合硅膠的粒徑為化m，柱內(nèi)徑為4.6mm，柱長為 250mm，W憐酸調(diào)水抑至3.0為流動(dòng)相A、體積比為30:70的甲醇-乙臘為流動(dòng)相，進(jìn)行梯度洗 脫，梯度洗脫程序見表1，流速為l.OmL/min，柱溫為35°C，采用紫外檢測(cè)器對(duì)奧培米芬原料 藥的有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)波長為230nm，奧培米芬原料藥樣品的液相譜圖如圖1所示，奧 培米芬原料藥樣品的峰值如表2所示。
[0019] 表1梯度洗脫程序
[0021]表2奧培米芬原料藥的峰值表 「00勺勺1
[0023] 系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：分別取奧培米芬及雜質(zhì)A、B、C、D、E、F、G、H對(duì)照品適量，精密稱 定，置同一容量瓶中，加甲醇適量，超聲使溶解并稀釋制成每ImL中約含奧培米芬0.5mg、含 各雜質(zhì)約為化g的混合溶液，各峰分離度應(yīng)不小于1.5。
[0024] 具體試驗(yàn)操作：取本品適量，加甲醇溶解并定量稀釋制成每ImL中約含0.5mg的溶 液作為供試品溶液，精密量取ImL,置IOOmL量瓶中，用溶劑稀釋至刻度，作為對(duì)照溶液。取對(duì) 照溶液20化注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度，使主成分色譜峰的峰高為滿量程的10%~ 20%。再精密量取供試品溶液和對(duì)照溶液各20化，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。供試 品溶液的色譜圖中如有雜質(zhì)峰，單個(gè)雜質(zhì)峰面積不得大于對(duì)照溶液主峰面積的0.10倍 (0.10%)，各雜質(zhì)峰面積的和，不得大于對(duì)照溶液的主峰面積的1.0倍（1.0%)。（雜質(zhì)C、雜 質(zhì)D、雜質(zhì)E校正因子分別為0.74、0.80、0.80;其余已知雜質(zhì)及未知雜質(zhì)校正因子按1.0計(jì) 算)。
[00巧]計(jì)算公式：
[0026]
[0027]總雜含量=X已知雜質(zhì)含量+X其他雜質(zhì)含量 [002引 A^:雜質(zhì)峰面積心服:1%對(duì)照主峰面積F:校正因子 r00991
[0030] W上對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施例進(jìn)行了描述。需要理解的是，本發(fā)明并不局限于上述 特定實(shí)施方式，本領(lǐng)域技術(shù)人員可W在權(quán)利要求的范圍內(nèi)做出各種變形或修改，運(yùn)并不影
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種用HPLC分離測(cè)定奧培米芬原料藥有關(guān)物質(zhì)的方法，其特征在于，包括如下步驟： 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以磷酸調(diào)水pH至2.5~3.5為流動(dòng)相A、甲醇-乙腈為流 動(dòng)相B進(jìn)行梯度洗脫，流速為0.8~1.2mL/min，柱溫為32~37°C，采用紫外檢測(cè)器對(duì)奧培米 芬原料藥的有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)。2. 如權(quán)利要求1所述的用HPLC分離測(cè)定奧培米芬原料藥有關(guān)物質(zhì)的方法，其特征在于， 所述十八烷基硅烷鍵合硅膠的粒徑為5μηι，柱內(nèi)徑為4.6mm，柱長為250_。3. 如權(quán)利要求1所述的用HPLC分離測(cè)定奧培米芬原料藥有關(guān)物質(zhì)的方法，其特征在于， 以磷酸調(diào)水pH至3.0為流動(dòng)相A。4. 如權(quán)利要求1所述的用HPLC分離測(cè)定奧培米芬原料藥有關(guān)物質(zhì)的方法，其特征在于， 所述流動(dòng)相B中，甲醇和乙腈的體積比為30:70。5. 如權(quán)利要求1所述的用HPLC分離測(cè)定奧培米芬原料藥有關(guān)物質(zhì)的方法，其特征在于， 在梯度洗脫時(shí)，流速為1. OmL/min，柱溫為35 °C。6. 如權(quán)利要求1所述的用HPLC分離測(cè)定奧培米芬原料藥有關(guān)物質(zhì)的方法，其特征在于， 所述梯度洗脫的具體過程為： 時(shí)間，分鐘 流動(dòng)相A，體積％ 流動(dòng)相B，體積％ 0 50 50 8 50 50 12 35 65 35 25 75 60 10 90 60 1 50 50 70 50 SO 〇7. 如權(quán)利要求1所述的用HPLC分離測(cè)定奧培米芬原料藥有關(guān)物質(zhì)的方法，其特征在于， 所述紫外檢測(cè)器的檢測(cè)波長為230nm〇
【文檔編號(hào)】G01N30/02GK105954431SQ201610544063
【公開日】2016年9月21日
【申請(qǐng)日】2016年7月11日
【發(fā)明人】葛德培, 吳其華, 劉濤
【申請(qǐng)人】安徽聯(lián)創(chuàng)生物醫(yī)藥股份有限公司