甲卡西酮的檢測(cè)試劑和方法
【專利摘要】本發(fā)明提供檢測(cè)甲卡西酮及其結(jié)構(gòu)類似物的免疫層析檢測(cè)卡，所述檢測(cè)卡包括背襯以及位于背襯上的加樣墊、金反應(yīng)墊、反應(yīng)膜和吸水紙；其中，所述加樣墊用處理液處理。本發(fā)明還提供裝有所述檢測(cè)卡的檢測(cè)試劑盒。本發(fā)明的檢測(cè)卡或檢測(cè)試劑盒操作簡(jiǎn)便、價(jià)格低廉、適合現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)、能快速檢測(cè)待測(cè)樣品，例如人尿液中的甲卡西酮及其結(jié)構(gòu)類似物，非常適合監(jiān)督執(zhí)法部門日常監(jiān)督中使用并滿足基層的監(jiān)督檢驗(yàn)需求。
【專利說(shuō)明】
甲卡西酬的檢測(cè)試劑和方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明設(shè)及藥物的檢測(cè)。具體地說(shuō)，本發(fā)明設(shè)及甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物的檢測(cè) 試劑、該檢測(cè)試劑的制備方法W及利用該檢測(cè)試劑檢測(cè)甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 甲卡西酬(Methcathinone)屬于卡西酬（化化inone)類策劃藥（"Designer Drug，'）[i]。運(yùn)類策劃藥物包括亞甲二氧化咯戊酬(MDPV)、甲卡西酬(MC)、3,4-亞甲二氧基甲卡西酬 (101〇等[2、3]。1975年，在名為化*113 6山1113化'334的植物中確定有卡西酬成分[4]，下文為 卡西酬類策劃藥物的母體化合物卡西酬結(jié)構(gòu)式W，其衍生物甲卡西酬在1928年合成，4-甲 基甲卡西酬在1929年合成[2、33。2009年，合成卡西酬及卡西酬類策劃藥使用明顯增多W。 2012年5月26日，美國(guó)邁阿密發(fā)生"食臉"事件，新型毒品"浴鹽"疑為元兇，"浴鹽"中最常見(jiàn) 的成分為4-甲基甲卡西酬和/或者亞甲基二氧郵咯化咯戊酬。2010年10月歐盟議會(huì)要求成 員國(guó)將4-甲基甲卡西酬列為管制藥物W。至2014年，共有77種卡西酬類策劃藥列入了歐洲 藥品與毒品成癒監(jiān)測(cè)中屯、化MCDDA)的監(jiān)管W。中國(guó)臺(tái)灣、加拿大、美國(guó)等國(guó)家和地區(qū)均將4- 甲基甲卡西酬列為管制^。2005年卡西酬、甲卡西酬列入第一類精神藥品管理。2010年8月2 日中國(guó)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局、公安部、衛(wèi)生部聯(lián)合發(fā)表公告，決定自2010年9月1日起將 4-甲基甲卡西酬列入第一類精神藥品管理，包括4-甲基甲卡西酬及其可能存在的鹽、化學(xué) 異構(gòu)體、醋和酸W。
[0003
123 近年來(lái)，設(shè)及甲卡西酬的案件不斷出現(xiàn)。除了上述的"食臉案"W外。在法國(guó)、美國(guó) 和澳大利亞均發(fā)現(xiàn)將甲卡西酬當(dāng)做"搖頭丸"出售。據(jù)調(diào)查，英國(guó)也出現(xiàn)了比較嚴(yán)重的甲卡 西酬濫用問(wèn)題，濫用者包括不同社會(huì)階層和人群。在中國(guó)，也已經(jīng)破獲了設(shè)及甲卡西酬的案 件。 2 現(xiàn)有技術(shù)對(duì)甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物的檢測(cè)主要是通過(guò)高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜 法、高效液相色譜法、生物忍片技術(shù)等檢測(cè)方法進(jìn)行W-W。但運(yùn)些技術(shù)具有明顯的缺陷，例 如，操作復(fù)雜、設(shè)備昂貴、耗時(shí)、不適合現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)等等。此外，現(xiàn)有技術(shù)中對(duì)甲卡西酬及其結(jié) 構(gòu)類似物進(jìn)行檢測(cè)的方法對(duì)儀器設(shè)備W及操作人員的要求較高、所需時(shí)間較長(zhǎng)，從而造成 較高的檢測(cè)成本。 3 有文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)，在采用W上實(shí)驗(yàn)室儀器方法進(jìn)行樣本檢測(cè)時(shí)，通常需要使用緩沖液， 如PBS對(duì)樣本進(jìn)行稀釋，運(yùn)樣可W降低原樣本的基質(zhì)效應(yīng)，降低干擾，提高產(chǎn)品的特異 性。然而，在現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)時(shí)往往無(wú)法對(duì)樣本做稀釋處理，樣本都是直接加到層析試紙的加 樣區(qū)，從而造成基質(zhì)效應(yīng)十分明顯。基于W上原因，在實(shí)驗(yàn)室常規(guī)方法，如酶聯(lián)免疫法中所 使用的抗原抗體組合應(yīng)用在現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)的層析試紙方法中經(jīng)常不適用。因此，如果不能顯著 降低待測(cè)樣品的基質(zhì)效應(yīng)，進(jìn)而得到準(zhǔn)確和可靠的檢測(cè)結(jié)果會(huì)給檢測(cè)人員，特別是對(duì)監(jiān)督 執(zhí)法部口的日常監(jiān)督工作帶來(lái)諸多不便。
[0007] 綜上所述，本領(lǐng)域急需一種操作簡(jiǎn)便、成本低廉、快速、準(zhǔn)確、與試驗(yàn)室儀器方法所 得結(jié)果相吻合的、適合現(xiàn)場(chǎng)使用的檢測(cè)試劑。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0008] 本發(fā)明的目的是提供一種操作簡(jiǎn)便、成本低廉、快速的、適合現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)的甲卡西酬 及其結(jié)構(gòu)類似物的檢測(cè)試劑。
[0009] 本發(fā)明的另一目的是提供該檢測(cè)試劑的制備方法W及利用該檢測(cè)試劑檢測(cè)甲卡 西酬及其結(jié)構(gòu)類似物的方法。
[0010] 在第一方面，本發(fā)明提供一種檢測(cè)甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物的免疫層析檢測(cè)卡， 所述檢測(cè)卡包括背襯W及位于背襯上的加樣墊、金反應(yīng)墊、反應(yīng)膜和吸液墊；
[0011] 所述金反應(yīng)墊上包被有甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物抗體的膠體金標(biāo)記物和IgG的膠 體金標(biāo)記物，所述反應(yīng)膜上設(shè)置有檢測(cè)線和質(zhì)控線，所述檢測(cè)線上包被有甲卡西酬及其結(jié) 構(gòu)類似物抗原，所述質(zhì)控線上包被有所述IgG的抗體；
[0012] 其中，所述加樣墊用處理液處理，所述處理液包含0.19-0.76%的十水合四棚酸 鋼、0.12-1.11%棚酸、0.2-0.4%1'訊661120、0.2-0.4%化^〇11乂-100、0.05-0.2%酪蛋白鋼 和水，pH 為 8.0-9.0;
[0013] 所述甲卡西剛及其結(jié)構(gòu)類似物如下式所示：
[0014]
[0015] 式中，
[0016] Ri選自：H、C廣C3烷基(優(yōu)選甲基）、面素（優(yōu)選F);
[0017] R2 選自：H;
[001引 R3選自：H、&-C3烷基（優(yōu)選甲基或乙基）；
[0019] R4選自：H。
[0020] #且化的生施節(jié)古由.祈巧甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物如下所示：
[0021]
[0022]其中，
[0024] 在具體的實(shí)施方式中，所述處理液包含0.57-0.76%的十水合四棚酸鋼、0.12- 0.87%棚酸、0.2-0.3%Tween20、0.2-0.3%化itonX-100、0.05-0.1%酪蛋白鋼和水，pH為 9 ? 0 O
[0025] 在優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述IgG包括但不限于:兔IgG、馬IgG,等等。
[0026] 在優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述IgG抗體包括但不限于:羊抗兔IgG、羊抗馬IgG,等等。
[0027] 在優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述加樣墊的處理方式包括但不限于：用所述處理液涂布 所述加樣墊、用所述處理液浸潰所述加樣墊，等等。
[0028] 在優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述加樣墊是纖維膜。
[0029] 在優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述反應(yīng)膜是硝酸纖維素膜。
[0030] 在具體的實(shí)施方式中，所述甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物抗體是下表所示的 Fitzgerald Industries International的甲卡西酬抗體、艾博抗（上海）貿(mào)易有限公司的 甲卡西酬抗體、Biorb^ Explore.Bioreagents.的甲卡西酬抗體。
[0031]
123456789 在具體的實(shí)施方式中，所述甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物抗體是艾博抗(上海)貿(mào)易有 限公司的甲卡西酬抗體。 2 在優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述免疫層析檢測(cè)卡對(duì)甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物的最低檢 出量是 lOOOng/ml。 3 在優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述免疫層析檢測(cè)卡還包括卡盒，所述卡盒由下蓋和上蓋 組成，上蓋設(shè)有加樣窗口和讀卡窗口，所述甲卡西酬或其結(jié)構(gòu)類似物的免疫層析檢測(cè)卡置 于下蓋中，所述加樣窗口和讀卡窗口分別對(duì)應(yīng)于所述甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物的免疫層析 檢測(cè)卡上的加樣墊和質(zhì)控線及檢測(cè)線。 4 在優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述免疫層析檢測(cè)卡用于檢測(cè)待測(cè)樣品，例如人尿液中的 甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物。 5 在第二方面，本發(fā)明提供一種檢測(cè)甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物的檢測(cè)試劑盒，所述 檢測(cè)試劑盒裝有： 6 (a)本發(fā)明的第一方面所述的免疫層析檢測(cè)卡;和 7 (b)利用所述檢測(cè)試劑盒檢測(cè)甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物的使用說(shuō)明書(shū)。 8 在優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述檢測(cè)試劑盒中還可裝有用于加樣或輔助檢測(cè)的其它器 件等等。 9 在優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述用于加樣的器件包括但不限于:一次性滴管。
[0041] 在第=方面，本發(fā)明提供一種用于處理檢測(cè)甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物的免疫層析 檢測(cè)卡的加樣墊的處理液，所述處理液包含0.19-0.76%的十水合四棚酸鋼、0.12-1.11 % 棚酸、0.2-0.4%1'訊661120、0.2-0.4%時(shí)11〇11乂-100、0.05-0.2%酪蛋白鋼和水，口出％8.0- 9 ? 0 O
[0042] 在具體的實(shí)施方式中，所述處理液包含0.57-0.76%的十水合四棚酸鋼、0.12- 0.87%棚酸、0.2-0.3%Tween20、0.2-0.3%化itonX-100、0.05-0.1%酪蛋白鋼和水，pH為 9 ? 0 O
[0043] 在第四方面，本發(fā)明提供本發(fā)明第=方面所述的處理液在制備檢測(cè)甲卡西酬及其 結(jié)構(gòu)類似物的免疫層析檢測(cè)卡中的用途。
[0044] 在第五方面，本發(fā)明提供一種甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物的檢測(cè)方法，所述方法包 括利用本發(fā)明第一方面所述的免疫層析檢測(cè)卡或本發(fā)明第二方面所述的檢測(cè)試劑盒檢測(cè) 待測(cè)樣品中的甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物。
[0045] 在優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述檢測(cè)方法是非治療性或非診斷性的。
[0046] 在第六方面，本發(fā)明提供本發(fā)明第一方面所述的免疫層析檢測(cè)卡或本發(fā)明第二方 面所述的檢測(cè)試劑盒在檢測(cè)甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物中的應(yīng)用。
[0047] 在優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述應(yīng)用是非治療性或非診斷性的。
[0048] 在第屯方面，本發(fā)明提供本發(fā)明第一方面所述的免疫層析檢測(cè)卡的制備方法，所 述方法包括W下步驟：
[0049] 1)采用制備膠體金顆粒；
[0050] 2)用1)中制備的膠體金顆粒分別標(biāo)記甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物抗體、IgG;
[0051] 3)將標(biāo)記好的免疫膠體金噴在纖維膜上，制備成金反應(yīng)墊；
[0052] 4)在硝酸纖維素膜上包被甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物抗原作為檢測(cè)線，包被步驟2) 中所述的IgG的抗體作為質(zhì)控線;和
[0053] 5)依次將加樣墊、金反應(yīng)墊、硝酸纖維素膜和吸水紙黏貼在背襯上，切割成試紙并 裝入卡盒。
[0054] 在優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述膠體金顆粒采用巧樣酸=鋼還原法制備。
[0055] 在優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述IgG是兔IgG或者馬IgG;所述IgG的抗體是羊抗兔IgG或 者羊抗馬IgG。
[0056] 應(yīng)理解，在本發(fā)明范圍內(nèi)中，本發(fā)明的上述各技術(shù)特征和在下文(如實(shí)施例）中具 體描述的各技術(shù)特征之間都可W互相組合，從而構(gòu)成新的或優(yōu)選的技術(shù)方案。限于篇幅，在 此不再一一累述。
【附圖說(shuō)明】
[0057] 圖1顯示了本發(fā)明的甲卡西酬檢測(cè)試劑的結(jié)構(gòu)示意圖。
【具體實(shí)施方式】
[0058] 本發(fā)明首次提供了一種可應(yīng)用于現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物的檢測(cè)試劑。 本發(fā)明的技術(shù)創(chuàng)新點(diǎn)在于設(shè)計(jì)了一種加樣墊處理方法，該方法顯著提高了現(xiàn)有甲卡西酬及 其結(jié)構(gòu)類似物抗體的特異性和靈敏度，克服了現(xiàn)有甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物抗體的特異性 和靈敏度不高W及無(wú)法應(yīng)用于實(shí)際的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)的缺陷，從而能夠在不對(duì)樣本進(jìn)行稀釋的情 況下，保證檢測(cè)的靈敏度和特異性。本發(fā)明的檢測(cè)試劑所得的檢測(cè)結(jié)果與實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法 所得的檢測(cè)結(jié)果完全一致，從而提供了一種能夠應(yīng)用于現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物 的檢測(cè)試劑，并且檢測(cè)過(guò)程迅速、檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確。在此基礎(chǔ)上完成了本發(fā)明。
[0059] 具體地說(shuō)，本發(fā)明提供了一種操作簡(jiǎn)便、成本低廉、快速、更適合現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)的甲卡 西酬及其結(jié)構(gòu)類似物的檢測(cè)卡和檢測(cè)試劑盒及其制備方法。本發(fā)明的檢測(cè)試劑盒克服了現(xiàn) 有技術(shù)中操作復(fù)雜、設(shè)備昂貴、耗時(shí)、不適合現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)等缺陷。
[0060] 甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物
[0061 ]甲卡西酬是苯丙胺的一種類似物，一般為粉末狀態(tài)或與水混合液體，吸食或飲用 后有提神作用，與苯丙胺類效果類似。研究表明，該物質(zhì)能導(dǎo)致急性健康問(wèn)題和毒品依賴， 過(guò)量易造成不可逆的永久腦部損傷甚至死亡。
[0062] 本領(lǐng)域技術(shù)人員基于專業(yè)知識(shí)可W知曉，在甲卡西酬的基礎(chǔ)上可W進(jìn)行各種取代 或衍生，從而獲得各種具備新結(jié)構(gòu)的類似物，而運(yùn)些結(jié)構(gòu)類似物也具有與甲卡西酬相似的 活性。因此，本領(lǐng)域還需要甲卡西酬的檢測(cè)試劑能夠檢測(cè)甲卡西酬的結(jié)構(gòu)類似物。
[0063] 巧化.立:ir祈冰的田去而剛及其結(jié)構(gòu)類似物并不限于結(jié)構(gòu)如下式所示的化合物：
[0064]
[00化]式中，
[0066] 化選自：H、&-C3烷基(優(yōu)選甲基）、面素；
[0067] R2選自：H;
[006引 R3選自：H、Ci-C3烷基(優(yōu)選甲基或乙基）；
[00例 R4選自：H。
[0070]在具體的實(shí)施方式中，本發(fā)明所述的甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物如下式所示：
[0071;
[0072]其中，
[0074] 在優(yōu)選的實(shí)施方式中，本發(fā)明所述的甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物是甲卡西酬。
[0075] 目前，在現(xiàn)有技術(shù)中缺乏對(duì)甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)的檢測(cè)試劑。 就甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)而言，最低檢出量應(yīng)該1000-2000ng/ml，優(yōu)選地 lOOOng/mlo
[0076] 加樣墊處理液
[0077] 如上所述，本發(fā)明人出乎意料地發(fā)現(xiàn)，利用特定的處理液處理加樣墊后，能夠顯著 提高原本不適用于甲卡西酬或其結(jié)構(gòu)類似物的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)的現(xiàn)有甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物 抗體的特異性和靈敏度，從而獲得能夠應(yīng)用于現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)并且檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確、可靠的甲卡西 酬及其結(jié)構(gòu)類似物的檢測(cè)試劑。
[0078] 在具體的實(shí)施方式中，本發(fā)明的甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物的免疫層析檢測(cè)卡的加 樣墊處理液包含0.19-0.76 %的十水合四棚酸鋼、0.12-1.11 %棚酸、0.2-0.4%Tween20、 0.2-0.4 % Tr i tonX-100、0.05-0.2 %酪蛋白鋼和水，pH為8.0-9.0。優(yōu)選地，所述處理液包含 0.57-0.76 % 的十水合四棚酸鋼、0.12-0.87 % 棚酸、0.2-0.3 % Tween20、0.2-0.3 % Tr i tonX-100、0.05-0.1 % 酪蛋白鋼和水，pH為9.0。
[0079] 不想受具體理論的束縛，但發(fā)明人相信，用本發(fā)明的處理液處理加樣墊能夠顯著 降低待測(cè)樣品的基質(zhì)效應(yīng)，從而獲得良好的靈敏度和特異性，進(jìn)而使得本發(fā)明的檢測(cè)試劑 能夠適用于甲卡西酬的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)并獲得準(zhǔn)確、可靠的檢測(cè)結(jié)果。
[0080] 甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物的抗體
[0081] 如上所述，在用本發(fā)明的處理液處理加樣墊后，利用甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物的 抗體進(jìn)行檢測(cè)的特異性和靈敏度得到顯著提高。因此，在了解了本發(fā)明技術(shù)內(nèi)容的基礎(chǔ)上， 本領(lǐng)域技術(shù)人員不難測(cè)試各種甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物的抗體，從而找到適用于本發(fā)明檢 測(cè)體系的抗體。
[0082] 本文實(shí)施例所列舉的抗體僅僅代表了實(shí)施本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)例，并不代表本發(fā)明僅 限于運(yùn)些具體的抗體。例如，可用于本發(fā)明的甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物抗體包括但不限于 下表所示的甲卡西酬抗體： r00831
[0084] 在優(yōu)選的實(shí)施方式中，可用于本發(fā)明的甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物抗體是艾博抗 (上海)貿(mào)易有限公司的甲卡西酬抗體(貨號(hào)為Abl23953)。
[0085] 甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物的免疫層析檢測(cè)卡
[0086] 在W上出乎意料的發(fā)現(xiàn)的基礎(chǔ)上，本發(fā)明提供一種檢測(cè)甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物 的免疫層析檢測(cè)卡，所述檢測(cè)卡包括背襯W及位于背襯上的加樣墊、金反應(yīng)墊、反應(yīng)膜和吸 水紙；
[0087] 所述金反應(yīng)墊上包被有甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物抗體的膠體金標(biāo)記物和IgG,所 述反應(yīng)膜上設(shè)置有檢測(cè)線和質(zhì)控線，所述檢測(cè)線上包被有甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物抗原， 所述質(zhì)控線上包被有所述IgG的抗體；
[0088] 所述加樣墊用上述處理液處理。
[0089] 在本發(fā)明的免疫層析檢測(cè)卡中，所述IgG和所述IgG的抗體起到質(zhì)控的作用，表示 某次檢測(cè)過(guò)程(層析過(guò)程)是否正常；即，如果所述IgG能夠經(jīng)層析正常到達(dá)質(zhì)控線，質(zhì)控線 上IgG的抗體與該IgG結(jié)合，從而顯色；而如果該檢測(cè)卡已經(jīng)失效或受損，該IgG無(wú)法正常到 達(dá)質(zhì)控線，則無(wú)法顯色。
[0090] 因此，本領(lǐng)域技術(shù)人員可W自行選擇用于本發(fā)明的IgG。在具體的實(shí)施方式中，所 述IgG包括但不限于:兔IgG、馬IgG,等等。相應(yīng)地，本領(lǐng)域技術(shù)人員可W自行選擇用于本發(fā) 明的IgG抗體，只要該IgG抗體是所述IgG的抗體即可。在具體的實(shí)施方式中，所述IgG抗體包 括但不限于:羊抗兔IgG、羊抗馬IgG,等等。
[0091] 本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該知曉，可W采用各種方式利用本發(fā)明的處理液處理加樣墊， 包括但不限于：用所述處理液涂布所述加樣墊、用所述處理液浸潰所述加樣墊，等等。
[0092] 在本發(fā)明中，加樣墊和反應(yīng)膜的材質(zhì)可由技術(shù)人員自主選擇，例如，加樣墊可W是 纖維膜;反應(yīng)膜可W是硝酸纖維素膜。
[0093] 為保護(hù)本發(fā)明的免疫層析檢測(cè)卡W及便于使用和觀察檢測(cè)結(jié)果，本發(fā)明的所述免 疫層析檢測(cè)卡還可包括卡盒，所述卡盒由下蓋和上蓋組成，上蓋設(shè)有加樣窗口和讀卡窗口， 所述甲卡西酬或其結(jié)構(gòu)類似物的免疫層析檢測(cè)卡置于下蓋中，所述加樣窗口和讀卡窗口分 別對(duì)應(yīng)于所述甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物的免疫層析檢測(cè)卡上的加樣墊和質(zhì)控線及檢測(cè)線。
[0094] 在本發(fā)明的甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物的免疫層析檢測(cè)卡的基礎(chǔ)上，本發(fā)明還提供 一種檢測(cè)甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物的檢測(cè)試劑盒，所述檢測(cè)試劑盒裝有：
[00M] (a)本發(fā)明的免疫層析檢測(cè)卡;和
[0096] (b)利用所述檢測(cè)試劑盒檢測(cè)甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物的使用說(shuō)明書(shū)。
[0097] 基于本發(fā)明的內(nèi)容W及本領(lǐng)域的公知常識(shí)，本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該了解，本發(fā)明的 檢測(cè)試劑盒中還可W裝有用于加樣或檢測(cè)的其它輔助器件。例如，本發(fā)明的檢測(cè)試劑盒中 還可裝有加樣器件等等。在具體的實(shí)施方式中，所述加樣器件包括但不限于:一次性滴管。
[0098] 本發(fā)明的甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物的免疫層析檢測(cè)卡或檢測(cè)試劑盒可W快速而 準(zhǔn)確地檢測(cè)待測(cè)樣品，包括但不限于人尿液中的甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物。
[0099] 在本發(fā)明的甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物的免疫層析檢測(cè)卡或檢測(cè)試劑盒的基礎(chǔ)上， 本發(fā)明進(jìn)一步提供了利用本發(fā)明的免疫層析檢測(cè)卡或檢測(cè)試劑盒檢測(cè)待測(cè)樣品中的甲卡 西酬及其結(jié)構(gòu)類似物的方法。
[0100] 在優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述檢測(cè)方法是非治療性或非診斷性的。
[0101] 本發(fā)明的免疫層析檢測(cè)卡可W通過(guò)如下所述的方法制備：
[0102] 1)采用制備膠體金顆粒；
[0103] 2)用1)中制備的膠體金顆粒分別標(biāo)記甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物抗體、和IgG;
[0104] 3)將標(biāo)記好的免疫膠體金噴在纖維膜上，制備成金反應(yīng)墊；
[0105] 4)在硝酸纖維素膜上包被甲卡西酬及其甲卡西酬結(jié)構(gòu)類似物抗原作為檢測(cè)線，包 被步驟2)中所述IgG的抗體作為質(zhì)控線;和
[0106] 5)依次將加樣墊、金反應(yīng)墊、硝酸纖維素膜和吸水紙黏貼在背襯上，切割成試紙并 裝入卡盒。
[0107]本發(fā)明的膠體金顆粒可W采用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何合適的方法制備。例 如，本發(fā)明的膠體金顆粒可W采用巧樣酸=鋼還原法制備。
[010引本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)：
[0109] 1.本發(fā)明首次提供了能適合現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)的、操作簡(jiǎn)便、成本低廉、快速、結(jié)果準(zhǔn)確的 甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物的免疫層析檢測(cè)卡和檢測(cè)試劑盒；
[0110] 2.本發(fā)明的甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物的免疫層析檢測(cè)試劑具備良好的特異性，可 W區(qū)分甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物與其它干擾物質(zhì)；
[0111] 3.本發(fā)明的甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物的免疫層析檢測(cè)試劑具備優(yōu)異的靈敏度，能 夠符合現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物的要求;和
[0112] 4.本發(fā)明的甲卡西酬及其結(jié)構(gòu)類似物的免疫層析檢測(cè)試劑對(duì)各種甲卡西酬結(jié)構(gòu) 類似物具有普遍適用性；
[0113] 5.本發(fā)明的檢測(cè)試劑降低了影響免疫層析方法結(jié)果的樣本基質(zhì)效應(yīng)，保證了現(xiàn)場(chǎng) 檢測(cè)結(jié)果的特異性和靈敏度；
[0114] 6.利用本發(fā)明的檢測(cè)試劑無(wú)需對(duì)樣品作額外的稀釋;和
[0115] 7.本發(fā)明的檢測(cè)試劑獲得的檢測(cè)結(jié)果與試驗(yàn)室儀器方法所得結(jié)果高度吻合。
[0116] 下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，運(yùn)些實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明 而不用于限制本發(fā)明的范圍。下列實(shí)施例中未注明具體條件的實(shí)驗(yàn)方法，通常按照常規(guī)條 件，或本領(lǐng)域已知的文獻(xiàn)，例如各種教科書(shū)中所述的條件，或市售可得儀器或試劑的使用說(shuō) 明書(shū)，或按照制造廠商所建議的條件。
[0117] 材料與方法：
[0118] 材料；
[0119] 本發(fā)明所用的各種試劑購(gòu)自國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，Sigma,Amresco,和光 純藥工業(yè)株式會(huì)社(WAKO);
[0120] 單克隆抗體和抗原購(gòu)自： Lm 22」萬(wàn)法；
[0123] 本發(fā)明方法具體可包括如下步驟：
[0124] (1)膠體金溶液制備
[01巧]量取純化水400-500ml，將1-2%氯化金4-5ml，倒入S角燒瓶（內(nèi)置磁力攬拌子）， 加熱拌器，待溶液完全沸騰;將1-2%巧樣酸S鋼5-6ml-次快速倒入沸騰的溶液中，溶液顏 色由黃色變?yōu)楹谏⒅饾u轉(zhuǎn)變?yōu)榧t色，關(guān)閉加熱電源，停止加熱，冷卻至室溫，即0.01%- 0.02 %膠體金，室溫保存。
[0126] (2)膠體金標(biāo)記物的制備
[0127]將步驟（I)中的膠體金50ml，用適量碳酸鐘溶液邊攬拌邊調(diào)至抑=7.5-9.0，加入 0.5-lmg甲卡西酬抗體或者甲卡西酬結(jié)構(gòu)類似物抗體，400-800;r/min攬拌，反應(yīng)30-40min; 再加入 2-3ml 膠體金體積的 10%-12%BSA 溶液，400-800r/min 攬拌，8500-10000r/min 離屯、， 棄上清，用金標(biāo)記物稀釋液收集沉淀，制備成甲卡西酬抗體或者甲卡西酬結(jié)構(gòu)類似物抗體 膠體金標(biāo)記物。
[01 %]將步驟（1)中的膠體金50ml，用適量碳酸鐘溶液邊攬拌邊調(diào)至抑=7.5-9.0，加入 0.5-lmg兔IgG或者馬IgG，400-800r/min攬拌，反應(yīng)30-40min;再加入2-3ml膠體金體積的 10 % -12 % BSA溶液，400-800r/min攬拌，8500-10000r/min離屯、，棄上清，用金標(biāo)記物稀釋液 收集沉淀，制備成兔IgG或者馬IgG膠體金標(biāo)記物。
[0129] (3)金反應(yīng)墊的制備
[0130] 將步驟(2)的甲卡西酬抗體或者甲卡西酬結(jié)構(gòu)類似物抗體膠體金標(biāo)記物和兔IgG 或者馬IgG膠體金標(biāo)記物按1:1的比例混合，用噴金儀W 2-lOiil/cm的濃度均勻噴在纖維膜 上，真空抽干，制成金反應(yīng)墊。
[0131] (4)反應(yīng)膜的制備
[0132] 將羊抗兔IgG或者羊抗馬IgG稀釋成0.5-1.Omg/ml，甲卡西酬抗原或者甲卡西酬 結(jié)構(gòu)類似物抗原稀釋成0.5-2mg/ml，用劃膜儀W1-化Vcm的濃度包被在硝酸纖維素膜上， 制備成反應(yīng)膜，真空抽干。
[0133] (5)加樣墊的制備
[0134] 稱量十水合四棚酸鋼5.721-7.628g、棚酸1.237-8.659g，加入到適量的純化水中， 攬拌至完全溶解;再分別稱取2-3旨、2-3旨、0.5-1旨的1^661120、化1*〇11乂-100、酪蛋白鋼，加 入到上述溶液中，使其終濃度分別為0.2%-0.3%、0.2%-0.3%、0.05%-0.1%，攬拌至完 全溶解，調(diào)節(jié)pH至8.0-9.0,用純化水定容至1000ml。將上述溶液按照比例(40ml/張)涂布在 纖維膜上，室溫自然驚干，然后真空抽干。
[0135] (6)試劑組裝：
[0136] 將加樣墊、金反應(yīng)墊、反應(yīng)膜、吸水紙，按照順序(如圖1所示)粘貼在背襯上，組裝 完成后，切割成一定寬度的試紙條，再將試紙條安裝在卡盒中。
[0137] 下文結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明說(shuō)明如下：
[013引實(shí)施例1
[0139] 取膠體金50ml，用適量碳酸鐘溶液邊攬拌邊調(diào)至抑=8.5，加入0.5mg甲卡西酬抗 體(艾博抗(上海）貿(mào)易有限公司，Abl23953)，800r/min攬拌，反應(yīng)30min;再加入2ml膠體金 體積的10 % BSA溶液，SOOr/min攬拌，850化/min離屯、，棄上清，用金標(biāo)記物稀釋液收集沉淀， 制備成甲卡西酬抗體膠體金標(biāo)記物。
[0140] 取膠體金50ml，用適量碳酸鐘溶液邊攬拌邊調(diào)至抑=8.5,加入0.5mg兔IgG，800r/ min攬拌，反應(yīng)30min;再加入2ml膠體金體積的10 % BSA溶液，SOOr/min攬拌，SSOOr/min離 屯、，棄上清，用金標(biāo)記物稀釋液收集沉淀，制備成兔IgG膠體金標(biāo)記物。
[0141] 按照比例（1:1)將甲卡西酬抗體金標(biāo)記物和兔IgG金標(biāo)記物混合，噴至纖維膜上， 真空抽干制成金反應(yīng)墊，備用。
[0142] 實(shí)施例2
[0143] 稱量十水合四棚酸鋼7.628g、棚酸1.237g，加入到適量的純化水中，攬拌至完全溶 解;再分別稱取2邑、2邑、0.5邑的1^661120、化^〇誠(chéng)-100、酪蛋白鋼，加入到上述溶液中，使其終 濃度為0.2%、0.2%、0.05%，攬拌至完全溶解，調(diào)節(jié)pH至9.0，用純化水定容至1000 ml，得到 加樣墊處理液。將上述緩沖液按照比例涂布在纖維膜上，室溫自然驚干，真空抽干，制備成 加樣墊。
[0144] 實(shí)施例3.最低檢出量的確定
[0145] 本實(shí)施例參照《藥物濫用檢測(cè)試劑技術(shù)審查指導(dǎo)原則》中關(guān)于檢測(cè)闊值(CUT-OFF， 或最低檢出量)的確定方法對(duì)本發(fā)明的檢測(cè)試劑的最低檢出量進(jìn)行驗(yàn)證和確定。
[0146] 將高于和低于最低檢出量(CUT-0FF=1000ng/ml)的25%和50%的樣品（500ng/ ml，750ng/ml，1250ng/ml，1500ng/ml濃度的甲卡西酬），每個(gè)濃度分裝成18份，編制盲碼，分 別由3個(gè)操作者進(jìn)行檢測(cè)，每個(gè)操作者共24份樣品。操作者將樣品滴加到試劑的加樣孔，液 體向前層析與固定在檢測(cè)線和質(zhì)控線上物質(zhì)發(fā)生結(jié)合而顯色。5min后，質(zhì)控線清晰可見(jiàn)，說(shuō) 明檢測(cè)過(guò)程正常;低于最低檢出量的濃度，檢測(cè)線出現(xiàn)紫紅色，結(jié)果為陰性;高于最低檢出 量的濃度，檢測(cè)線無(wú)紫紅色，結(jié)果為陽(yáng)性。
[0147] 本發(fā)明的檢測(cè)試劑的檢測(cè)結(jié)果如下所示：
[014 引
[0149] 根據(jù)W上結(jié)果，并結(jié)合藥物濫用檢測(cè)試劑技術(shù)審查指導(dǎo)原則對(duì)闊值的判斷方法， 本發(fā)明的檢測(cè)試劑的最低檢出量經(jīng)驗(yàn)證為1 OOOng/ml。
[0150] 因此，本發(fā)明的檢測(cè)試劑能夠適合甲卡西酬的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)。
[0151] 實(shí)施例4.臨床樣本檢測(cè)
[0152] 本發(fā)明人利用本發(fā)明的甲卡西酬檢測(cè)試劑檢測(cè)了54份臨床樣本（山西省長(zhǎng)治市）， 19份高于巧0 % CUT-OFF值，1份在CUT-OFF值至巧0 % CUT-OFF值，檢測(cè)結(jié)果均為陽(yáng)性；1份在- 50 % CUT-OFF值至CUT-OFF值，33份低于-50 % CUT-OFF值，檢測(cè)結(jié)果均為陰性。
[0153] 利用本發(fā)明的甲卡西酬檢測(cè)試劑得到的檢測(cè)結(jié)果與參考方法LC-MS/MS的符合率 為100%。檢測(cè)結(jié)果如表1所示。
[0154] 表1.甲卡西酬試劑與參考方法比對(duì)結(jié)果
[0155]
[0156] 討論；
[0157] 本發(fā)明人欣喜地發(fā)現(xiàn)，利用本發(fā)明的甲卡西酬檢測(cè)試劑得到的檢測(cè)結(jié)果與實(shí)驗(yàn)室 標(biāo)準(zhǔn)方法得到結(jié)果完全一致；
[0158] 此外，利用本發(fā)明的甲卡西酬檢測(cè)試劑將操作時(shí)間從實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)方法所需的數(shù)小 時(shí)縮短為約5分鐘，從而顯著降低了檢測(cè)所需時(shí)間。
[0159] 因此，本發(fā)明成功解決了甲卡西酬或其結(jié)構(gòu)類似物的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)無(wú)試劑可用的缺 陷，在本領(lǐng)域中首次提供了一種用于甲卡西酬或其結(jié)構(gòu)類似物的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)的可靠試劑，利 用本發(fā)明的甲卡西酬檢測(cè)試劑得到的檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確，與實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)方法得到結(jié)果高度吻 厶 1=1 O
[0160] 實(shí)施例5.特異性
[0161] 進(jìn)行特異性研究主要包括物質(zhì)的交叉干擾。制備樣品，分別滴加到試劑的加樣孔， 5min后，質(zhì)控線清晰可見(jiàn);表2中物質(zhì)在小于或等于表中所示濃度時(shí)，不引起交叉反應(yīng)。
[0162] 表2.特異性
[0163；
[0164]
[01化]實(shí)施例6.
[0166] 本發(fā)明人利用其它單克隆抗體化itzgerald Industries InternationaLRandox Laboratories Ltd.、Biorb^ Ewlore.Bioreagents.的甲卡西酬抗體)重復(fù)了實(shí)施例 1-3。 結(jié)果如下表所示：
[0167]
[0168] 從上表可W看出，Randox Laboratories Ltd.的甲卡西酬抗體制備的檢測(cè)試劑在 進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，檢測(cè)線在全部濃度都無(wú)色帶，即，甲卡西酬抗體金標(biāo)記物與硝酸纖維素膜上包 被的甲卡西酬抗原不結(jié)合，因此該抗體不適合利用層析試紙的甲卡西酬現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)。
[0169] 而Fitzgerald Industries InternationaKBiorbyt Explore. Bioreagents.的 單克隆抗體制備的檢測(cè)試劑在CUTOFF附近的四個(gè)濃度均為陰性，證明運(yùn)些抗體在制成本 發(fā)明的檢測(cè)試劑后能夠與抗原正常結(jié)合，但它們的靈敏度相對(duì)于艾博抗的抗體略低。
[0170] 實(shí)施例7.
[0171] 本發(fā)明人進(jìn)一步檢測(cè)了在未采用處理液處理加樣墊W及用下述處理液1和處理液 2處理加樣墊的情況下，利用實(shí)施例1和6中的單克隆抗體制備的檢測(cè)試劑的檢測(cè)效果。
[0172] 處理液1:稱量化出P04.2H20 6.084g、化抽P04.12出0 21.838g加入到適量的純化水 中，攬拌至完全溶解;再分別稱取2邑、2邑、0.5邑的1^661120、化^〇誠(chéng)-100、酪蛋白鋼，加入到上 述溶液中，使其終濃度為0.2%、0.2%、0.05%，攬拌至完全溶解，調(diào)節(jié)pH至7.0。
[0173] 處理液2:稱量=徑甲基氨基甲燒(Tris)6.57g加入到適量純化水中，攬拌至完全 溶解;再分別稱取2gTween20、2g PVPlO、2g BSA，加入到上述溶液中，使其終濃度為0.2%、 0.2 %、0.2 %，攬拌至完全溶解，調(diào)節(jié)抑至8.0。
[0174] 曰 主 二
[0175]
[0176] 從上表結(jié)果可W看出，不用處理液處理加樣墊，或用處理液1和處理液2處理加樣 墊，F(xiàn)itzgerald Industries International、Biorbyt Explore .Bioreagents和艾博抗（上 海)貿(mào)易有限公司的單克隆抗體制備的檢測(cè)試劑在全部四個(gè)濃度都獲得陰性的結(jié)果，即，均 獲得假陰性結(jié)果。而Randox Laboratories Ltd.的單克隆抗體制備的檢測(cè)試劑在檢測(cè)時(shí)， 結(jié)果仍然是檢測(cè)線在全部濃度都無(wú)色帶，即，卡西酬抗體金標(biāo)記物與硝酸纖維素膜上包被 的甲卡西酬抗原不結(jié)合。
[0177] 討論；
[0178] 本實(shí)施例的結(jié)果證明，在不結(jié)合本發(fā)明處理液的檢測(cè)體系中，各種單克隆抗體均 無(wú)法應(yīng)用于甲卡西酬的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)，或者無(wú)法獲得可靠的檢測(cè)結(jié)果。不想受具體理論的束縛， 但本發(fā)明人相信，本發(fā)明的處理液能夠顯著降低待測(cè)樣品的基質(zhì)效應(yīng)，從而使得抗體能與 抗原正常結(jié)合并且具備良好的靈敏度和特異性，進(jìn)而使得本發(fā)明的檢測(cè)試劑能夠適用于甲 卡西酬的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)。
[0179] 實(shí)施例8.檢測(cè)不同的甲卡西酬類似物
[0180] 本發(fā)明進(jìn)一步測(cè)試了本發(fā)明的檢測(cè)試劑(抗體來(lái)自艾博抗(上海）貿(mào)易有限公司， AM23953)對(duì)不同甲卡西酬類似物的檢測(cè)效果。對(duì)結(jié)構(gòu)類似物從高濃度到低濃度進(jìn)行梯度 稀釋，直至檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)陰性為止，具體數(shù)據(jù)如下表所示：
LUIGZ」 >人王衣巧未p」有出，傘灰巧護(hù)」1 兀趣化1傘削街Wf盛測(cè)機(jī)^」Wiug/miUUUUng/mi； 的甲卡西酬結(jié)構(gòu)類似物均能檢出。
[0183] 在本發(fā)明提及的所有文獻(xiàn)都在本申請(qǐng)中引用作為參考，就如同每一篇文獻(xiàn)被單獨(dú) 引用作為參考那樣。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明的上述講授內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可 W對(duì)本發(fā)明作各種改動(dòng)或修改，這些等價(jià)形式同樣藩于本申請(qǐng)所附權(quán)利要求書(shū)所限定的范 圍。
[0184] 參考文獻(xiàn)
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【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種檢測(cè)甲卡西酮及其結(jié)構(gòu)類似物的免疫層析檢測(cè)卡，所述檢測(cè)卡包括背襯以及位 于背襯上的加樣墊、金反應(yīng)墊、反應(yīng)膜和吸水紙； 所述金反應(yīng)墊上包被有甲卡西酮及其結(jié)構(gòu)類似物抗體的膠體金標(biāo)記物和IgG的膠體金 標(biāo)記物，所述反應(yīng)膜上設(shè)置有檢測(cè)線和質(zhì)控線，所述檢測(cè)線上包被有甲卡西酮及其結(jié)構(gòu)類 似物抗原，所述質(zhì)控線上包被有所述IgG的抗體； 其特征在于，所述加樣墊用處理液處理，所述處理液包含0.19-0.76%的十水合四硼酸 鈉、0.12-1.11%硼酸、0.2-0.4%丁界661120、0.2-0.4%1^切1^-100、0.05-0.2%酪蛋白鈉和 水，pH 為 8.0-9.0; 所述甲卡西酮及其結(jié)構(gòu)類似物如下式所示： 式中，R!選自：Η、&-C3烷基(優(yōu)選甲基）、鹵素(優(yōu)選F); R2選自：Η; R3選自：HA-C3烷基(優(yōu)選甲基或乙基）； R4選自：Η。2. 如權(quán)利要求1所述的免疫層析檢測(cè)卡，其特征在于，所述甲卡西酮及其結(jié)構(gòu)類似物如 下所示：^3.如權(quán)利要求1所述的免疫層析檢測(cè)卡，其特征在于，所述處理液包含0.57-0.76 %的 十水合四硼酸鈉、0 · 12-0 · 87 % 硼酸、0 · 2-0 · 3 % Tween20、0 · 2-0 · 3 % TritonX-100、0 · Οδ?. 1 % 酪蛋白鈉和水， pH為9.0 。4.如權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的免疫層析檢測(cè)卡，其特征在于，所述甲卡西酮及其結(jié) 構(gòu)類似物抗體是下表所示的甲卡西酮抗體。5. 如權(quán)利要求4所述的免疫層析檢測(cè)卡，其特征在于，所述甲卡西酮及其結(jié)構(gòu)類似物抗 體是艾博抗(上海)貿(mào)易有限公司的甲卡西酮抗體。6. -種檢測(cè)甲卡西酮及其結(jié)構(gòu)類似物的檢測(cè)試劑盒，所述檢測(cè)試劑盒裝有： (a) 權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的免疫層析檢測(cè)卡;和 (b) 利用所述檢測(cè)試劑盒檢測(cè)甲卡西酮及其結(jié)構(gòu)類似物的使用說(shuō)明書(shū)。7. -種用于處理檢測(cè)甲卡西酮及其結(jié)構(gòu)類似物的免疫層析檢測(cè)卡的加樣墊的處理液， 所述處理液包含0.19-0.76 %的十水合四硼酸鈉、0.12-1.11 %硼酸、0.2-0.4%Tween20、 0 · 2-0 · 4 % Tr i tonX-100、0 · 05-0 · 2 % 酪蛋白鈉和水，pH為 8 · 0-9 · 0 〇8. 如權(quán)利要求7所述的處理液，其特征在于，所述處理液包含0.57-0.76 %的十水合四 硼酸鈉、0.12-0 · 87%硼酸、0.2-0.3%Tween20、0.2-0.3%TritonX-100、0.05-0.1 %酪蛋白 鈉和水，pH為9.0。9. 權(quán)利要求7或8所述的處理液在制備檢測(cè)甲卡西酮及其結(jié)構(gòu)類似物的免疫層析檢測(cè) 卡中的用途。10. -種甲卡西酮及其結(jié)構(gòu)類似物的檢測(cè)方法，所述方法包括利用權(quán)利要求1-5中任一 項(xiàng)所述的免疫層析檢測(cè)卡或權(quán)利要求6所述的檢測(cè)試劑盒檢測(cè)待測(cè)樣品中的甲卡西酮及其 結(jié)構(gòu)類似物。11. 權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的免疫層析檢測(cè)卡或權(quán)利要求6所述的檢測(cè)試劑盒在檢 測(cè)甲卡西酮及其結(jié)構(gòu)類似物中的應(yīng)用。12. 如權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的免疫層析檢測(cè)卡的制備方法，所述方法包括以下步 驟： 1) 采用制備膠體金顆粒； 2) 用1)中制備的膠體金顆粒分別標(biāo)記甲卡西酮及其結(jié)構(gòu)類似物抗體、IgG; 3) 將標(biāo)記好的免疫膠體金噴在纖維膜上，制備成金反應(yīng)墊； 4) 在硝酸纖維素膜上包被甲卡西酮及其結(jié)構(gòu)類似物抗原作為檢測(cè)線，包被步驟2)中所 述的I gG的抗體作為質(zhì)控線;和 5) 依次將加樣墊、金反應(yīng)墊、硝酸纖維素膜和吸水紙黏貼在背襯上，切割成試紙并裝入 卡盒。
【文檔編號(hào)】G01N33/94GK105954511SQ201610265673
【公開(kāi)日】2016年9月21日
【申請(qǐng)日】2016年4月26日
【發(fā)明人】金巍, 李基 , 張新燕, 鄭強(qiáng)峰, 黃芳芳, 張衛(wèi)國(guó), 陳捷, 劉培培
【申請(qǐng)人】上海科華生物工程股份有限公司, 公安部禁毒情報(bào)技術(shù)中心