一種維d鈣咀嚼片制劑中維生素d3含量的檢測方法
【專利摘要】一種維D鈣咀嚼片制劑中維生素D3含量的檢測方法。配制維D鈣咀嚼片樣品溶液；將步驟（1）所得樣品溶液注入高效液相色譜儀，采用流動(dòng)相進(jìn)行等度洗脫，并記錄色譜。本發(fā)明的檢測方法在同一液相條件下測定安立生坦原料或制劑中的有關(guān)物質(zhì)，所述檢測方法操作簡便、分離度高、測定方法專屬性強(qiáng)、檢測結(jié)果準(zhǔn)確可信。
【專利說明】
一種維D鈣咀嚼片制劑中維生素D3含量的檢測方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明屬于藥物分析領(lǐng)域。具體地說，本發(fā)明涉及一種采用高效液相色譜法測定維D鈣咀嚼片制劑中維生素D3含量的檢測方法?！颈尘凹夹g(shù)】
[0002]維D鈣咀嚼片是由美國安士制藥有限公司開發(fā)的一種成人鈣補(bǔ)充劑，英文化學(xué)名:Calcium Supplement with Vitamin D Chewable Tablets，化學(xué)結(jié)構(gòu)如下:其分子量為384,分子式為(C27H440)。維D鈣咀嚼片可補(bǔ)充人體所需的鈣，口服用于人體補(bǔ)鈣劑，目前上市的有普通片劑(規(guī)格每片含碳酸鈣〇.75克，相當(dāng)于鈣0.3克;維生素D3100國際單位(2.5 微克))。
【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提供一種維D鈣咀嚼片制劑中維生素D3含量的檢測方法。
[0004]為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了如下的技術(shù)方案:一種維D鈣咀嚼片制劑中維生素D3含量的檢測方法，該方法是采用高效液相色譜法進(jìn)行的，包括下述步驟:(1)配制維D鈣咀嚼片樣品溶液，所述維D鈣咀嚼片樣品溶液包括供試品溶液和對照品溶液；(2)將步驟(1)所得樣品溶液注入高效液相色譜儀，用流動(dòng)相進(jìn)行等度洗脫，并記錄色譜圖；其中，所述供試品溶液的制備包括下述步驟:取本品25片，精密稱定，計(jì)算平均片重， 研細(xì)，精密稱取細(xì)粉適量(約相當(dāng)于維生素D3 25yg)，置100ml棕色量瓶中，加溶液50ml，溶液用二甲基亞砜-水(1〇:2)混合溶液制成每11111中含2,6-二叔丁基對甲酚(8111')0.21^的溶液，冰水浴超聲處理15分鐘，并時(shí)時(shí)振搖，保持超聲水浴溫度不超過30°C，精密加入0.02% BHT的正己烷溶液25ml，振搖15分鐘后，30°C以下離心5分鐘(4000rpm)，分取上層溶液，避光靜置1小時(shí)后得澄清溶液作為供試品溶液;精密量取供試品溶液500yl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，其中高效液相色譜法的色譜柱固定相填充劑氨基硅烷鍵合硅膠，流動(dòng)相的配制為:正己烷-異丙醇99:1。
[0005]優(yōu)選的，所述高效液相色譜法的洗脫順序如為:0-15分鐘時(shí)流動(dòng)相100%體積。[〇〇〇6]優(yōu)選的，所述流動(dòng)相的流速為1.5ml/min。[〇〇〇7]優(yōu)選的，所述高效液相色譜法的色譜柱柱溫為25-35°C，檢測波長為265nm。
[0008]優(yōu)選的，所述高效液相色譜法的色譜柱柱溫為30°C。
[0009]優(yōu)選的，在高效液相色譜法檢測步驟(2)中，首先將對照溶液注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測器靈敏度，使主成分色譜峰的峰高為記錄儀滿量程的50% ;再將供試品溶液和雜質(zhì)加樣溶液分別注入液相色譜儀，采用流動(dòng)相進(jìn)行等度洗脫，并記錄色譜圖；優(yōu)選地，注入液相色譜儀中樣品溶液的量均為500yl。
[0010]本發(fā)明的檢測方法在同一液相條件下測定安立生坦原料或制劑中的有關(guān)物質(zhì)，所述檢測方法操作簡便、分離度高、測定方法專屬性強(qiáng)、檢測結(jié)果準(zhǔn)確可信。
【具體實(shí)施方式】
[0011]實(shí)施例1
【含量測定】維生素D3照高效液相色譜法(中國藥典2010年版二部附錄V D)測定。
[0012]色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn):用氨基娃燒鍵合娃膠為填充劑(SepaxHP-Amino已適用)；以正己烷-異丙醇(99:1)為流動(dòng)相;流速1.51111/1^11，檢測波長為26511111。取對照品溶液在60°C水浴中加熱I小時(shí)(使產(chǎn)生前維生素D3)，放冷，量取500μ1注入液相色譜儀，記錄色譜圖，維生素D3峰和前維生素D3的分離度應(yīng)不小于5，理論板數(shù)按維生素D3峰計(jì)算應(yīng)不低于5000，拖尾因子應(yīng)不大于2.0。
[0013]測定法:(避光操作)取本品25片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取細(xì)粉適量(約相當(dāng)于維生素D3 25yg)，置10ml棕色量瓶中，加溶液[用二甲基亞砜-水(10: 2)混合溶液制成每Iml中含2,6-二叔丁基對甲酚(BHT)0.2mg的溶液]50ml，冰水浴超聲處理15分鐘，并時(shí)時(shí)振搖，保持超聲水浴溫度不超過30°C，精密加0.02%BHT的正己烷溶液25ml，振搖15分鐘后，離心5分鐘(4000rpm)，分取上層溶液，避光靜置I小時(shí)后得澄清溶液作為供試品溶液，精密量取供試品溶液500μ1，注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取維生素D3對照品適量，精密稱定，用0.02%ΒΗΤ的正己烷溶液溶解并定量稀釋制成每Iml中約含Iyg的溶液，同法測定，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算。將計(jì)算結(jié)果乘以1.09即得維生素D3含量。測定應(yīng)在暗室及避免氧化的情況下進(jìn)行。
[0014]碳酸鈣:取本品研細(xì)的粉末0.24g(約相當(dāng)于碳酸鈣150mg)，精密稱定，置坩禍中，緩緩熾灼至完全炭化，再移至700?800°C灼燒約2小時(shí)，放冷，殘?jiān)铀?ml，滴加3mol/L鹽酸溶液2ml，加熱使i甘禍中殘留物完全溶解，用水10ml轉(zhuǎn)移至錐形瓶中，加lmol/L氫氧化鈉溶液15ml，使pH大于12，加羥基萘酚藍(lán)指示液2滴，用乙二胺四醋酸二鈉滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液由紫紅色變?yōu)榧兯{(lán)色。每Iml乙二胺四醋酸二鈉滴定液(0.05mol/L)相當(dāng)于5.004mg的CaC03。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種維D鈣咀嚼片制劑中維生素D3含量的檢測方法，該方法是采用高效液相色譜法進(jìn)行的，其特征在于，包括下述步驟: (1)配制維D鈣咀嚼片樣品溶液，所述維D鈣咀嚼片樣品溶液包括供試品溶液和對照品溶液； (2)將步驟(I)所得樣品溶液注入高效液相色譜儀，用流動(dòng)相進(jìn)行等度洗脫，并記錄色譜圖；其中，所述供試品溶液的制備包括下述步驟:取本品25片，精密稱定，計(jì)算平均片重，研細(xì)，精密稱取細(xì)粉適量，置10ml棕色量瓶中，加溶液50ml，溶液用二甲基亞砜-水混合溶液制成每Iml中含2，6-二叔丁基對甲酚(BHT)0.2mg的溶液，冰水浴超聲處理15分鐘，并時(shí)時(shí)振搖，保持超聲水浴溫度不超過30°C，精密加入0.02%BHT的正己烷溶液25ml，振搖15分鐘后，30°C以下離心5分鐘(4000rpm)，分取上層溶液，避光靜置I小時(shí)后得澄清溶液作為供試品溶液;精密量取供試品溶液500μ1，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，其中高效液相色譜法的色譜柱固定相填充劑氨基硅烷鍵合硅膠，流動(dòng)相的配制為:正己烷-異丙醇99:1。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述高效液相色譜法的洗脫順序如為:0_15分鐘時(shí)流動(dòng)相100%體積。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述流動(dòng)相的流速為1.5ml/min。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述高效液相色譜法的色譜柱柱溫為25-35°C，檢測波長為265nm。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，在高效液相色譜法檢測步驟(2)中，首先將對照溶液注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測器靈敏度，使主成分色譜峰的峰高為記錄儀滿量程的50% ;再將供試品溶液和雜質(zhì)加樣溶液分別注入液相色譜儀，采用流動(dòng)相進(jìn)行等度洗脫，并記錄色譜圖；優(yōu)選地，注入液相色譜儀中樣品溶液的量均為500μ1。6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，所述高效液相色譜法的色譜柱柱溫為30Γ。
【文檔編號】G01N30/02GK105974035SQ201610612209
【公開日】2016年9月28日
【申請日】2016年7月31日
【發(fā)明人】王海紅, 丁青竹, 劉斐
【申請人】合肥遠(yuǎn)志醫(yī)藥科技開發(fā)有限公司