一種含魚明膠的生物制品穩(wěn)定劑的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種含魚明膠的生物制品穩(wěn)定劑，其包括魚明膠、三羥甲基氨基甲烷、乙二胺四乙酸鈉、海藻糖、Tween?80、生物防腐劑Proclin 300。該含魚明膠的生物制品穩(wěn)定劑配方簡單，價格低廉，適用范圍廣泛，不存在安全性隱患、具有良好的穩(wěn)定效果。該穩(wěn)定劑可有效增強(qiáng)蛋白、抗體、以及樣本中檢測物等的穩(wěn)定性，同時還可以作為ELISA專用穩(wěn)定劑。在用于ELISA技術(shù)時，不僅能確保各核心試劑組分的穩(wěn)定性，又能確保結(jié)果準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性。
【專利說明】
一種含魚明膠的生物制品穩(wěn)定劑
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及生物材料保存技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種含魚明膠的常規(guī)蛋白、抗原、抗 體、生物檢測診斷試劑盒等生物制品穩(wěn)定劑。
【背景技術(shù)】
[0002] 隨著生物技術(shù)的不斷發(fā)展，生物制品在疾病的診斷、治療，以及人類對生命本質(zhì)的 追尋等領(lǐng)域發(fā)揮了主要作用。但是一些常規(guī)蛋白、抗原、抗體、生物檢測診斷試劑盒等生物 制品容易受外界因素的影響，失去活性，這就需要一種優(yōu)良的保護(hù)劑降低外界環(huán)境變化對 這類生物制品的影響。
[0003] 蛋白質(zhì)作為"中心法則"的最后一環(huán)，是生物體最為重要的結(jié)構(gòu)物質(zhì)也是各種生命 活動的基礎(chǔ)。目前對于生命活動微觀領(lǐng)域的研究，主要還是以研究蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能為 主。但是有些蛋白在體外環(huán)境分子結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，容易被破壞而喪失生物活性，這就需要一種 穩(wěn)定劑來保持蛋白結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性，維持其原有活性。
[0004] 抗體作為醫(yī)學(xué)診斷、治療、檢測領(lǐng)域應(yīng)用最為廣泛的蛋白產(chǎn)品，也是最具有市場價 值前景的蛋白產(chǎn)品之一。ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗)技術(shù)是抗體在診斷和檢測領(lǐng)域應(yīng)用最 為成功的技術(shù)，目前廣泛用于臨床疾病的診斷以及生物學(xué)基礎(chǔ)研究。ELISA技術(shù)從出現(xiàn)到今 天，為人類疾病的診斷以及相關(guān)基礎(chǔ)學(xué)科的發(fā)展做出了不可磨滅的貢獻(xiàn)。
[0005] 目前市場上一般的ELISA試劑盒，在排除人為操作以及原材料造成的影響外，普遍 存在穩(wěn)定性差、檢測結(jié)果不準(zhǔn)確等問題。而造成這些問題的絕大多數(shù)原因是試劑盒中包含 的抗體、抗原等物質(zhì)由于受外界金屬離子、pH變動、溫度變化等的影響而導(dǎo)致的活性或者結(jié) 合能力下降。穩(wěn)定劑的使用可以明顯提高蛋白的穩(wěn)定性，從而增加 ELISA試劑盒的檢測穩(wěn)定 性。傳統(tǒng)的ELISA試劑盒穩(wěn)定劑通常包含海藻糖、BSA等物質(zhì)，這些穩(wěn)定劑存在價格昂貴，配 制過程繁瑣，并且適用范圍有限等缺陷。例如:對于含有BSA(小牛血清蛋白）成分的ELISA試 劑盒，一方面不能用于牛以及與其親緣關(guān)系較近物種的ELISA檢測，另一方面可能存在瘋牛 病病原體，具有潛在的生物危險性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是現(xiàn)有的一些常規(guī)蛋白、抗原、抗體、生物檢測診斷試劑 盒等生物制品穩(wěn)定劑價格昂貴、配制過程繁瑣，適用范圍受限等，提供一種新的含魚明膠的 生物制品穩(wěn)定劑。
[0007] 本發(fā)明提供的含魚明膠的生物制品穩(wěn)定劑，包括魚明膠、三羥甲基氨基甲烷、乙二 胺四乙酸鈉、海藻糖、Tween-80、生物防腐劑Proc 1 in 300。
[0008] 本發(fā)明所述的生物制品，是指包括抗原、抗體、2個以上氨基酸殘基構(gòu)成的多肽等 蛋白以及氣基酸在內(nèi)的生物制品。
[0009] 魚明膠是一種常見的生物高聚物，以魚皮和魚骨為原料提取，然后加工成的高分 子多肽聚合物。組成魚明膠的氨基酸一般有20多種，以甘氨酸、脯氨酸、羥脯氨酸和丙氨酸 為主。魚明膠一方面抗原性差，另一方面與哺乳動物的物種親緣性遠(yuǎn)，這決定了魚明膠取代 ELISA試劑盒中BSA的優(yōu)越性。魚明膠具有良好的乳化性，以及通過增加溶液的相黏度來降 低氣液相的表面張力而表現(xiàn)出來的發(fā)泡性和成膜性，能夠保護(hù)蛋白的結(jié)構(gòu)不被破壞，增強(qiáng) 蛋白的穩(wěn)定性。
[0010] 生物防腐劑Proclin 300(英文名Proclin300)是美國SUPELC0公司推出的新一代 高效生物防腐劑，可以有效控制體外診斷試劑中微生物的生長。
[0011] 優(yōu)選地，各成分含量為:魚明膠15~25g/L、三羥甲基氨基甲烷4.526~5.045g/L、 乙二胺四乙酸鈉14~22g/L、海藻糖25~30g/L、Tween_80 3~6g/L、生物防腐劑Proclin 300 0.5~2.Og/L，余量為水。優(yōu)選使用雙蒸水。
[0012]更優(yōu)選地，上述含魚明膠的生物制品穩(wěn)定劑，其各成分含量為:魚明膠25g/L、三羥 甲基氨基甲烷5.045g/L、乙二胺四乙酸鈉 20g/L、海藻糖25g/L、TWeen-80 3~6g/L、生物防 腐劑Proclin 300 0.5~2.Og/L，余量為水。
[0013] 本發(fā)明還提供了以上任一所述的含魚明膠的生物制品穩(wěn)定劑的制備方法，是將魚 明膠、三羥甲基氨基甲烷、乙二胺四乙酸鈉、海藻糖、Tween-80和生物防腐劑Proclin 300溶 于水，配制成溶液，過濾滅菌。
[0014] 本發(fā)明還提供了一種蛋白保存液，其含有以上任一所述的含魚明膠的生物制品穩(wěn) 定劑。蛋白的保存通常保存在蛋白保存液中，本發(fā)明的含魚明膠的生物制品穩(wěn)定劑可以添 加在蛋白保存液中延長蛋白保存期限。
[0015] 優(yōu)選地，上述蛋白保存液，所述含魚明膠的生物制品穩(wěn)定劑的添加量占蛋白保存 液總體積的5%。
[0016] 本發(fā)明還提供了一種ELISA專用穩(wěn)定劑，其含有以上任一所述的含魚明膠的生物 制品穩(wěn)定劑。
[0017] 本發(fā)明還提供了一種ELISA試劑盒，包括樣品稀釋液、抗體稀釋液、標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液、 洗液和終止液，其中，所述樣品稀釋液、抗體稀釋液和標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液中，均含有體積濃度5% 的以上任一所述的含魚明膠的生物制品穩(wěn)定劑。
[0018] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益效果：
[0019] 本發(fā)明的含魚明膠的生物制品穩(wěn)定劑，配方簡單，價格低廉，適用范圍廣泛，不存 在安全性隱患、具有良好的穩(wěn)定效果。
[0020] 本發(fā)明的含魚明膠的生物制品穩(wěn)定劑用于ELISA技術(shù)時，不僅能確保測定結(jié)果準(zhǔn) 確度，而且穩(wěn)定性更好，可以有效增強(qiáng)ELISA中抗體、抗原以及樣本中檢測物的穩(wěn)定性。
【附圖說明】
[0021 ]圖1:不同的保存液對抗體保存效果的影響western-blot檢測圖。
【具體實(shí)施方式】
[0022]下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步說明，以使本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以更好地 理解本發(fā)明并能予以實(shí)施，但所舉實(shí)施例不作為對本發(fā)明的限定。
[0023] 實(shí)施例1
[0024] 取魚明膠15~25g/L、三羥甲基氨基甲烷4.526~5.0458/1、乙二胺四乙酸鈉14~ 22g/L、海藻糖25~30g/L、Tween-80 3~6g/L、生物防腐劑Proclin 300 0.5~2.0g/L，利用 雙蒸水按比例配制成溶液，過濾滅菌，得穩(wěn)定劑，4度保存。BCA蛋白濃度測定試劑盒(采購與 碧云天、產(chǎn)品編號:P0011)。酶標(biāo)儀(ELx808 Biotek)。
[0025] 蛋白凍存液A:常規(guī)蛋白凍存液(40%甘油水溶液，v/v);
[0026] 蛋白凍存液B:常規(guī)蛋白凍存液加入5 %穩(wěn)定劑(v/v)。
[0027]在蛋白庫中隨機(jī)取6個蛋白編號1、2、3、4、5、6號，每種蛋白按5(^8/1111將樣品分裝 成20管，各取一半，分別加入蛋白凍存液A和B，-20 °C保存一段時間后，根據(jù)BCA蛋白濃度測 定試劑盒中所規(guī)定的方法測定蛋白濃度。
[0028] 表1:蛋白凍存液A對蛋白凍存的影響結(jié)果
[0029]
[0030] 表2:蛋白凍存液B對蛋白凍存的影響結(jié)果
[0031]
[0032] 由表1和表2可知，常規(guī)蛋白凍存液在_20°C保存，保存0~3個月蛋白少量降解，保 存3~30個月蛋白出現(xiàn)嚴(yán)重降解。這說明常規(guī)蛋白凍存液只能短暫的保存蛋白。在常規(guī)蛋白 凍存液中加入穩(wěn)定劑后，蛋白的穩(wěn)定性顯著增強(qiáng)，0~9月內(nèi)基本上不出現(xiàn)降解，9~30個月 出現(xiàn)少量的降解，這說明在常規(guī)蛋白凍存液中加入穩(wěn)定劑后，明顯增強(qiáng)了蛋白的穩(wěn)定性，可 作為長期的蛋白保存液。
[0033] 實(shí)施例2
[0034] 取魚明膠25g/L、三羥甲基氨基甲烷5.045g/L、乙二胺四乙酸鈉20g/L、海藻糖25g/ L、Tween_80 3~6g/L、生物防腐劑Proclin 300 0.5~2.0g/L，利用雙蒸水按比例配制成溶 液，過濾滅菌，得穩(wěn)定劑。BCA蛋白濃度測定試劑盒(采購于碧云天、產(chǎn)品編號:P0011)。酶標(biāo) 儀(ELx808 Biotek)。
[0035] 蛋白凍存液A:常規(guī)蛋白凍存液加2%穩(wěn)定劑(v/v);
[0036] 蛋白凍存液B:常規(guī)蛋白凍存液加5%穩(wěn)定劑(v/v);
[0037] 蛋白凍存液C:常規(guī)蛋白凍存液加10%穩(wěn)定劑(v/v)。
[0038]在蛋白庫中隨機(jī)取3個蛋白編號1、2、3號，每種蛋白按50μg/ml將樣品分裝成15管， 分成3組，加入蛋白凍存液A、B和C，-20°C保存一段時間后，根據(jù)BCA蛋白濃度測定試劑盒中 所規(guī)定的方法測定蛋白濃度。
[0039] 表3添加不同比例穩(wěn)定劑蛋白凍存的影響結(jié)果
[0040]
[0041 ]由表3可知在蛋白凍存液A、B、C中含有不同體積比的穩(wěn)定劑，對蛋白的保護(hù)作用存 在差異，最適濃度為占保存液體積比的5%。另外，在同是5%比例的用量下，本實(shí)施例各成 分用量配比所得穩(wěn)定劑的保存效果優(yōu)于實(shí)施例1中穩(wěn)定劑的各成分用量配比。
[0042] 實(shí)施例3
[0043] 取魚明膠15~25g/L、三羥甲基氨基甲烷4.526~5.0458/1、乙二胺四乙酸鈉14~ 22g/L、海藻糖25~30g/L、Tween-80 3~6g/L、生物防腐劑Proclin 300 0.5~2.0g/L，利用 雙蒸水按比例配制成溶液，過濾滅菌。BCA蛋白濃度測定試劑盒(采購于碧云天、產(chǎn)品編號： P0011)。酶標(biāo)儀(ELx808 Biotek)。
[0044]蛋白凍存液:常規(guī)蛋白凍存液加5 %穩(wěn)定劑(v/v)。
[0045] 在蛋白庫中隨機(jī)取3個蛋白編號1、2、3號，每種蛋白按50μg/ml將樣品分裝成15管， 分成3組，加入蛋白凍存液，4°C、25°C、37 °C保存一段時間后，根據(jù)BCA蛋白濃度測定試劑盒 中所規(guī)定的方法測定蛋白濃度。
[0046] 表4溫度對添加穩(wěn)定劑后蛋白凍存的影響結(jié)果
[0047]
[0048] 由表4可知，雖然高溫不利于蛋白的保存，但是在加入穩(wěn)定劑后，蛋白的穩(wěn)定性都 保持在比較好的狀態(tài)，只有少量蛋白的降解。
[0049] 實(shí)施例4
[0050] 取魚明膠15~25g/L、三羥甲基氨基甲烷4.526~5.0458/1、乙二胺四乙酸鈉14~ 22g/L、海藻糖25~30g/L、Tween-80 3~6g/L、生物防腐劑Proclin 300 0.5~2.0g/L，利用 雙蒸水按比例配制成溶液，過濾滅菌。
[0051] 蛋白保存液A:常規(guī)蛋白凍存液加入5%穩(wěn)定劑(v/v);
[0052] 蛋白保存液B:常規(guī)蛋白凍存液(40 %甘油水溶液，v/v)。
[0053]隨機(jī)選取3種抗體，編號為1、2、3,按濃度為lmg/ml分別分裝成8管，分成兩組，分別 加入蛋白保存液A和B，4°C保存0、1、3、6個月。western-blot實(shí)驗通過曝光膠片條帶的明暗， 可以半定量檢測抗原的含量，也可以半定量檢測抗體的含量。在保證抗原過量的情況下，抗 體和抗原的結(jié)合量，決定于抗體的多少，通過western-blot實(shí)驗中曝光膠片條帶的亮暗便 能反應(yīng)結(jié)合抗體的多少，進(jìn)而反應(yīng)出抗體濃度的高低。
[0054]通過圖1可知，在4°C情況下，利用蛋白保存液A和蛋白保存液B保存抗體1、2、3，抗 體保存在蛋白保存液A中的，抗體與抗原的結(jié)合量基本保持不變，具有很好的抗體保護(hù)作 用，可以作為抗體長期儲存的保護(hù)劑;而利用傳統(tǒng)的蛋白保存液B，發(fā)現(xiàn)抗體與抗原的結(jié)合 量變小，這種現(xiàn)象的發(fā)生與抗體的降解和失活是密不可分，不適和用于抗體的長期保存。
[0055] 實(shí)施例5
[0056] 取魚明膠15~25g/L、三羥甲基氨基甲烷4.526~5.0458/1、乙二胺四乙酸鈉14~ 22g/L、海藻糖25~30g/L、Tween-80 3~6g/L、生物防腐劑Proclin 300 0.5~2.0g/L，利用 雙蒸水按比例配制成溶液，過濾滅菌。酶標(biāo)儀(ELx808 Biotek)。
[0057] 10\了85配方：1^8(麗121.14):24.2 8;恥(：1:80.(^，用蒸餾水定容至100011^，室溫 調(diào) ρΗ=7·6〇
[0058] 試劑Α:標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液:質(zhì)量體積比2%的BSA+0.02%疊氮化鈉，溶于TBS工作液中。
[0059] 試劑B:抗體稀釋液:質(zhì)量體積比2 %的BSA+0.01 %疊氮化鈉，溶于TBS工作液中。
[0060]隨機(jī)購買5個ELISA試劑盒作為實(shí)驗對象，檢測在樣品稀釋液以及抗體和標(biāo)準(zhǔn)品稀 釋液加入或不加入體積比為5%的穩(wěn)定劑對ELISA試劑盒穩(wěn)定性的影響。ELISA試劑盒穩(wěn)定 性的好壞與檢測標(biāo)曲的R2(決定系數(shù))正相關(guān)，可以利用R2來反映試劑盒的穩(wěn)定性。
[0061 ] 表5添加穩(wěn)定劑對ELISA試劑盒穩(wěn)定性的影響結(jié)果
[0062]
[0063] 從表5的結(jié)果可以發(fā)現(xiàn)，無論是試劑A還是試劑B在實(shí)驗過程中添加了 5%的穩(wěn)定劑 后，試劑盒的穩(wěn)定性相比較于不添加穩(wěn)定劑的穩(wěn)定性有所提高，在試劑A和試劑B中都添加 5%的穩(wěn)定劑后，試劑盒的穩(wěn)定性在上述方案中達(dá)到最優(yōu)，但是與方案5中的結(jié)果相差不大， 這說明該穩(wěn)定劑無論作為ELISA試劑盒的穩(wěn)定性，還是作為標(biāo)準(zhǔn)品、抗體和樣品的稀釋液， 效果同樣顯著。
[0064] 實(shí)施例6
[0065] 取魚明膠15~25g/L、三羥甲基氨基甲烷4.526~5.0458/1、乙二胺四乙酸鈉14~ 22g/L、海藻糖25~30g/L、Tween-80 3~6g/L、生物防腐劑Proclin 300 0.5~2.0g/L，利用 雙蒸水按比例配制成溶液，過濾滅菌。酶標(biāo)儀(ELx808 Biotek)。配制不同的封閉液：
[0066] 1、常規(guī)封閉液:0 · 05mol/L碳酸鹽緩沖液(pH9 · 6)+2 · 0%BSA(w/v);
[0067] 2、常規(guī)封閉液+5%的穩(wěn)定劑(v/v);
[0068] 3、蒸餾水+5%的穩(wěn)定劑(v/v)。
[0069] 購買重組人生長激素標(biāo)準(zhǔn)品（中檢所，編號140635)，與重組人生長激素的單抗和 多抗組合成雙抗夾心ELISA檢測試劑盒1。購買維生素 D3標(biāo)準(zhǔn)品（中檢所，編號100061 )，與維 生素 D3的抗體組合競爭抑制ELISA檢測試劑盒2。隨機(jī)選取一個蛋白標(biāo)準(zhǔn)品，與該蛋白的單 抗和多抗組合成雙抗夾心ELISA檢測試劑盒3』LISA檢測過程中，封閉的好壞與ELISA試劑 盒的質(zhì)量密切相關(guān)。對于試劑盒1、2、3同時分別制作ELISA檢測板5塊，分別4°C，密封保存， 在規(guī)定時間內(nèi)完成對標(biāo)準(zhǔn)品（50μg/ml)的測定，選取多個孔同時測定，分析批內(nèi)差(CV%)， 來反映 ELISA測值的穩(wěn)定性。
[0070] 批內(nèi)差測定:選取高、中、低樣品濃度，在同一檢測板分別做20次重復(fù)檢測，CV(%) = SD/meanX100 進(jìn)行測算。
[0071] 表6不同的封閉試劑對ELISA實(shí)驗結(jié)果的影響(CV%)
[0072]
[0073] 如表6可知，采用常規(guī)封閉液作為封閉液，ELISA測試板的批內(nèi)差相比于常規(guī)封閉 液+5%穩(wěn)定劑和蒸餾水+5%穩(wěn)定劑作為封閉液的ELISA測試板的批內(nèi)差明顯高一些，而且 隨著時間的變化，批內(nèi)差值會不斷變大，而以常規(guī)封閉液+5%穩(wěn)定劑和蒸餾水+5%穩(wěn)定劑 作為封閉液的ELISA測試板的批內(nèi)差隨時間也會出現(xiàn)變大，但是變化不明顯，同時以蒸餾水 +5%穩(wěn)定劑作為封閉液也具有優(yōu)良的效果。這說明，該穩(wěn)定濟(jì)不僅可以維持包埋抗體的穩(wěn) 定性減小批內(nèi)差，而且可以單獨(dú)作為封閉液在ELISA試劑盒中使用。
[0074] 實(shí)施例7
[0075] 取魚明膠15~25g/L、三羥甲基氨基甲烷4.526~5.0458/1、乙二胺四乙酸鈉14~ 22g/L、海藻糖25~30g/L、Tween-80 3~6g/L、生物防腐劑Proclin 300 0.5~2.0g/L，利用 雙蒸水按比例配制成溶液，過濾滅菌。酶標(biāo)儀(ELx808 Biotek)。
[0076]處理1:封閉液、樣品稀釋液、標(biāo)準(zhǔn)品和抗體稀釋液都采用蒸餾水+5%穩(wěn)定劑（v/ v) 〇
[0077] 處理2:封閉液、樣品稀釋液、標(biāo)準(zhǔn)品和抗體稀釋液都采用傳統(tǒng)試劑：
[0078] 1、常規(guī)封閉液:0 · 05mol/L碳酸鹽緩沖液(pH9 · 6)+2 · 0%BSA(w/v)。
[0079] 2、樣品稀釋液:質(zhì)量體積比2%的BSA+0.02%疊氮化鈉，溶于TBS工作液中。
[0080] 3、抗體和標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液：質(zhì)量體積比2 %的BSA+0.01 %疊氮化鈉，溶于TBS工作液 中。
[0081 ] 10 X TBS配方：Tris (MW121 · 14): 24 · 2g; NaCl: 80 · 0g，用蒸餾水定容至 1000mL，室溫 調(diào) ρΗ=7·6〇
[0082]購買重組人生長激素標(biāo)準(zhǔn)品（中檢所，編號140635)，與重組人生長激素的單抗和 多抗組合成雙抗夾心ELISA檢測試劑盒1。購買維生素 D3標(biāo)準(zhǔn)品（中檢所，編號100061 )，與維 生素 D3的抗體組合成競爭抑制ELISA檢測試劑盒2。隨機(jī)選取一個蛋白標(biāo)準(zhǔn)品，與該蛋白的 單抗和多抗組合成雙抗夾心ELISA檢測試劑盒3。批間差和批內(nèi)差是反映一個ELISA試劑盒 是否合格的重要標(biāo)準(zhǔn)，一方面能夠反映 ELISA試劑盒測值的準(zhǔn)確性，另一方面也能反映出 ELISA試劑盒的穩(wěn)定性。
[0083]批內(nèi)差測定:選取高、中、低樣品濃度，在同一檢測板分別做20次重復(fù)檢測，CV(%) =SD/mean X 100進(jìn)行測算，目前批內(nèi)差< 10 %作為合格的標(biāo)準(zhǔn)。
[0084] 批間差測定:選取高、中、低樣品濃度，隨機(jī)3塊不同的檢測板，每板分別做8次重復(fù) 檢測，CV( % ) = SD/meanX 100進(jìn)行測算，目前批間差<12%作為合格的標(biāo)準(zhǔn)。
[0085] 表7不同的試劑對ELISA實(shí)驗結(jié)果的影響(批內(nèi)CV%)
[0088] 表8不同的試劑對ELISA實(shí)驗結(jié)果的影響(批間CV%)
[0086]
[0087]
[0089]
[0090] 表9不同的試劑對ELISA實(shí)驗結(jié)果的影響（線性R2)
[0091]
[0092] 如表7、8、9顯示的數(shù)據(jù)可知，采用蒸餾水+5%穩(wěn)定劑取代傳統(tǒng)封閉液、樣品稀釋 液、抗體和標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液后，組裝的檢測試劑盒測值更為穩(wěn)定和準(zhǔn)確，并且可以延長試劑盒 的質(zhì)保期限，方便試劑盒在長途運(yùn)輸。
[0093] 以上所述實(shí)施例僅是為充分說明本發(fā)明而所舉的較佳的實(shí)施例，本發(fā)明的保護(hù)范 圍不限于此。本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明基礎(chǔ)上所作的等同替代或變換，均在本發(fā)明 的保護(hù)范圍之內(nèi)。本發(fā)明的保護(hù)范圍以權(quán)利要求書為準(zhǔn)。
【主權(quán)項】
1. 一種含魚明膠的生物制品穩(wěn)定劑，其特征在于，包括魚明膠、三羥甲基氨基甲烷、乙 二胺四乙酸鈉、海藻糖、Tween-80、生物防腐劑Proc 1 in 300。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的含魚明膠的生物制品穩(wěn)定劑，其特征在于，各成分含量為:魚 明膠15~25g/L、三羥甲基氨基甲烷4.526~5.0458/1、乙二胺四乙酸鈉14~22 8/1、海藻糖 25~30g/L、Tween-80 3~6g/L、生物防腐劑Proclin 3000.5~2.(^/1，余量為水。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的含魚明膠的生物制品穩(wěn)定劑，其特征在于，各成分含量為:魚 明膠25g/L、三羥甲基氨基甲烷5 · 045g/L、乙二胺四乙酸鈉20g/L、海藻糖25g/L、Tween-80 3 ~6g/L、生物防腐劑Proclin 3000.5~2·Og/L，余量為水。4. 權(quán)利要求1~3任一所述的含魚明膠的生物制品穩(wěn)定劑的制備方法，其特征在于，是 將魚明膠、三羥甲基氨基甲烷、乙二胺四乙酸鈉、海藻糖、Twe en-80和生物防腐劑Pro c 1 i η 300溶于水，配制成溶液，過濾滅菌。5. -種蛋白保存液，其特征在于，含有權(quán)利要求1~3任一所述的含魚明膠的生物制品 穩(wěn)定劑。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的蛋白保存液，其特征在于，所述含魚明膠的生物制品穩(wěn)定劑的 添加量占蛋白保存液總體積的5%。7. -種ELISA專用穩(wěn)定劑，其特征在于，含有權(quán)利要求1~3任一所述的含魚明膠的生物 制品穩(wěn)定劑。8. -種ELISA試劑盒，包括樣品稀釋液、抗體稀釋液、標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液、洗液和終止液，其 特征在于，所述樣品稀釋液、抗體稀釋液和標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液中，均含有體積濃度5%的權(quán)利要 求求1~3任一所述的含魚明膠的生物制品穩(wěn)定劑。
【文檔編號】G01N33/68GK105974121SQ201610278247
【公開日】2016年9月28日
【申請日】2016年4月29日
【發(fā)明人】楊娟, 李慶, 項乾, 劉衛(wèi), 姚雯, 何峰容, 李華淵, 孫穎, 樂音譜
【申請人】武漢云克隆科技股份有限公司