一種tas-102中鹽酸替比拉西的純度檢測(cè)方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種TAS-102中鹽酸替比拉西的純度檢測(cè)方法，采用十八烷基硅烷鍵和硅膠為填充劑的色譜柱（250mmX4.6mm，5um），以等比例的改性緩沖溶液、有機(jī)相為流動(dòng)相，以等度洗脫的方式在常溫條件下檢測(cè)替比拉西的純度，實(shí)現(xiàn)對(duì)鹽酸替比拉西質(zhì)量的準(zhǔn)確控制。
【專利說明】
一種TAS-102中鹽酸替比拉西的純度檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及一種高效液相色譜法，特別是采用一種TAS-102中鹽酸替比拉西的高 效液相色譜純度檢測(cè)方法。
【背景技術(shù)】
[0002] TAS-102為新型組合抗代謝藥物，由三氟胸苷與鹽酸替比拉西組成。鹽酸替比拉西 可以抑制和三氟胸苷分解相關(guān)的胸腺嘧啶磷酸化酶，從而維持三氟胸苷的血液濃度，減少 三氟胸苷的降解。鹽酸替比拉西的分子式:C 5H5C1N202,化學(xué)名為，其結(jié)構(gòu)式如下：
[0003] 為了有效延長(zhǎng)鹽酸替比拉西的出峰時(shí)間并與溶劑峰及雜質(zhì)峰完全分離，改善出峰 峰型，進(jìn)而準(zhǔn)確控制鹽酸替比拉西的質(zhì)量，目前很難查詢到鹽酸替比拉西的純度檢測(cè)相關(guān) 高效液相色譜方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于克服鹽酸替比拉西極性大，從而導(dǎo)致在高效液相色譜中出峰 早，不能很好地和溶劑峰及雜質(zhì)峰分離，且峰型也不佳的困難，提供一種采用等度洗脫實(shí)現(xiàn) 鹽酸替比拉西出峰時(shí)間較晚與溶劑峰及雜質(zhì)峰能完全分離，且峰型佳的方法，實(shí)現(xiàn)對(duì)鹽酸 替比拉西質(zhì)量的準(zhǔn)確控制。
[0005] 本發(fā)明涉及的一種TAS-102中鹽酸替比拉西高效液色譜純度檢測(cè)方法，包括以下 步驟： (1) 取鹽酸替比拉西樣品適量，用有機(jī)溶劑溶解鹽酸替比拉西樣品，配制成每lml含鹽 酸替比拉西〇.8mg~1.2mg的樣品溶液； (2) 設(shè)置液相色譜儀的流動(dòng)相，即A栗為有機(jī)相，B栗為改性緩沖鹽，設(shè)置液相色譜儀的 等度洗脫程序?yàn)锳: B = 75:25，洗脫時(shí)間：15min。 (3) 設(shè)置液相色譜儀的流動(dòng)相流速0 · 8~1 · 2ml/min、檢測(cè)波長(zhǎng)220nm± 3nm，以及設(shè)置液 相色譜儀色譜柱的柱溫箱25~35°C ; (4) 取步驟(1)的樣品溶液10ul注入經(jīng)步驟(2)(3)設(shè)置的液相色譜儀，完成替比拉西的 純度檢測(cè)；
[0006] 進(jìn)一步的所述步驟(1)的有機(jī)溶劑為甲醇或乙醇。
[0007] 所述的液相色譜儀所采用十八烷基鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，色譜柱的規(guī)格為 長(zhǎng)度250mm、內(nèi)徑4.6mm、粒度5um。
[0008] 所述步驟(2)的有機(jī)相為乙腈或甲醇。
[0009 ]所述步驟(2)的改性緩沖溶液為20mmo 1的磷酸水或磷酸鹽。
[0010]所述步驟⑵的有機(jī)相和緩沖溶液的比例為75:25，洗脫時(shí)間為15min。
[0011] 本發(fā)明采用十八烷基鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，能有效檢測(cè)鹽酸替比拉西的純 度;選擇甲醇為溶劑，確保樣品能完全溶解;選擇進(jìn)樣體積l〇ul，柱溫為30°C，提高了色譜峰 的對(duì)稱性;選擇流速1. 〇ml/min，能延遲出峰時(shí)間；選擇A栗為甲醇，B栗為緩沖溶液20mmol磷 酸氫二銨+l〇mmol庚烷磺酸鈉+0.1 %三氟乙酸，調(diào)節(jié)PH值至3.5，采用等度洗脫實(shí)現(xiàn)了鹽酸 替比拉西和溶劑峰及雜質(zhì)峰的完全分離，實(shí)現(xiàn)了鹽酸替比拉西的純度檢測(cè)，對(duì)實(shí)現(xiàn)鹽酸替 比拉西在TAS-102合成和制劑生產(chǎn)過程中的質(zhì)量控制方面具有現(xiàn)實(shí)意義。
【附圖說明】
[0012] 下面結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明技術(shù)方案作進(jìn)一步說明： 圖1為本發(fā)明實(shí)施例1的高效液相色譜圖； 圖2為本發(fā)明實(shí)施例2的高效液相色譜圖； 圖3為本發(fā)明實(shí)施例3的高效液相色譜圖。
【具體實(shí)施方式】
[0013] 下面結(jié)合附圖來說明本發(fā)明。 實(shí)施例1
[0014] 采用安捷倫1260型號(hào)高效液相色譜儀、Ecosil品牌十八烷基鍵合硅膠為填充劑的 色譜柱，色譜柱的規(guī)格為長(zhǎng)度250mm、內(nèi)徑4.6mm、粒度5um。
[0015] 一種TAS-102中鹽酸替比拉西的高效液相色譜純度檢測(cè)方法，包括以下步驟： (1) 取鹽酸替比拉西8mg，溶于10ml容量瓶中，加入甲醇溶解并定容至刻度，搖勻，即為 供試液； (2) 設(shè)置液相色譜儀的流動(dòng)相，即A栗為有機(jī)相，B栗為緩沖溶液，以及設(shè)置液相色譜儀 的比例為:A: B = 25:75，洗脫時(shí)間為15min; (3) 設(shè)置液相色譜儀的流速為0.8ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)217nm，以及設(shè)置液相色譜儀色譜柱 的柱溫箱25°C; (4) 取步驟(1)的供試品溶液10ul注入經(jīng)(2)(3)設(shè)置的液相色譜儀中，完成鹽酸替比拉 西的純度檢測(cè)，記錄色譜圖，結(jié)果見附圖1。
[0016] 圖1中鹽酸替比拉西的保留時(shí)間為8.83111^11，3.8371^11分離度為10.95,4.744分離 度為6.50，6.447分離度為7.98，8.831分離度為8.30，完全符合《2015版中國藥典》分離度不 小于1.5的規(guī)定，峰純度為0.99，對(duì)稱因子為0.62，均符合規(guī)定。 實(shí)施例2
[0017] 采用安捷倫1260型號(hào)高效液相色譜儀、Ecosil品牌十八烷基鍵合硅膠為填充劑的 色譜柱，色譜柱的規(guī)格為長(zhǎng)度250mm、內(nèi)徑4.6mm、粒度5um。
[0018] 一種TAS-102中鹽酸替比拉西的高效液相色譜純度檢測(cè)方法，包括以下步驟： (1) 取鹽酸替比拉西l〇mg，溶于10ml容量瓶中，加入甲醇溶解并定容至刻度，搖勻，即為 供試液； (2) 設(shè)置液相色譜儀的流動(dòng)相，即A栗為有機(jī)相，B栗為緩沖溶液，以及設(shè)置液相色譜儀 的比例為:A: B = 25:75，洗脫時(shí)間為15min; (3) 設(shè)置液相色譜儀的流速為lml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)220nm，以及設(shè)置液相色譜儀色譜柱的 柱溫箱30°C; (4) 取步驟(1)的供試品溶液10ul注入經(jīng)(2)(3)設(shè)置的液相色譜儀中，完成鹽酸替比拉 西的純度檢測(cè)，記錄色譜圖，結(jié)果見附圖2。
[0019] 附圖2中鹽酸替比拉西的保留時(shí)間為7.06511^11，3.2071^11分離度為9.21，4.0071^11 分離度為6.66，5.277min分離度為7.28，7.065min分離度為7.82，完全符合《2015版中國藥 典》分離度不小于1.5的規(guī)定，峰純度為0.99，對(duì)稱因子為0.63，均符合相關(guān)規(guī)定。 實(shí)施例3
[0020] 采用安捷倫1260型號(hào)高效液相色譜儀、Ecosil品牌十八烷基鍵合硅膠為填充劑的 色譜柱，色譜柱的規(guī)格為長(zhǎng)度250mm、內(nèi)徑4.6mm、粒度5um。
[0021] -種TAS-102中鹽酸替比拉西的高效液相色譜純度檢測(cè)方法，包括以下步驟： (1) 取鹽酸替比拉西12mg，溶于10ml容量瓶中，加入甲醇溶解并定容至刻度，搖勻，即 為供試液： (2) 設(shè)置液相色譜儀的流動(dòng)相，即A栗為有機(jī)相，B栗為緩沖溶液，以及設(shè)置液相色譜儀 的比例為:A:B = 25:75,洗脫時(shí)間為15min (3) 設(shè)置液相色譜儀的流速為lml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)223nm，以及設(shè)置液相色譜儀色譜柱的 柱溫箱35°C (4) 取步驟(1)的供試品溶液10ul注入經(jīng)(2)(3)設(shè)置的液相色譜儀中，完成鹽酸替比拉 西的純度檢測(cè)，記錄色譜圖，結(jié)果見附圖3
[0022] 圖3中鹽酸替比拉西的保留時(shí)間為5.85〇11^11，2.74〇1^11分離度為7.86,4.0231^11分 離度為9.45，4.446min分離度為2.25，5.850min分離度為6.92，完全符合《2015版中國藥典》 分離度不小于1.5的規(guī)定，峰純度為0.99，對(duì)稱因子為0.66，均符合相關(guān)規(guī)定。
[0023]上述實(shí)施例只為說明本發(fā)明的技術(shù)構(gòu)思及特點(diǎn)，其目的在于讓熟悉此項(xiàng)技術(shù)的人 士能夠了解本發(fā)明的內(nèi)容并加以實(shí)施，并不能以此限制本發(fā)明的保護(hù)范圍，凡根據(jù)本發(fā)明 精神實(shí)質(zhì)所作的等效變化或修飾，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種TAS-102中鹽酸替比拉西的高效液相色譜純度檢測(cè)方法，包括以下步驟： (1) 取鹽酸替比拉西樣品適量，用有機(jī)溶劑溶解鹽酸替比拉西樣品，配制成每lml含鹽 酸替比拉西〇.8mg~1.2mg的樣品溶液： (2) 設(shè)置液相色譜儀的流動(dòng)相，即A栗為有機(jī)相，B栗為改性緩沖鹽，設(shè)置液相色譜儀的 等度洗脫程序?yàn)锳: B = 75:25，洗脫時(shí)間：15min; (3) 設(shè)置液相色譜儀的流動(dòng)相流速0 · 8~1 · 2ml/min、檢測(cè)波長(zhǎng)220nm± 3nm，以及設(shè)置液 相色譜儀色譜柱的柱溫箱25-35°C ; (4) 取步驟（1)的樣品溶液10ul注入經(jīng)步驟(2)、（3)設(shè)置的液相色譜儀，完成鹽酸替比 拉西的純度檢測(cè)。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種TAS-102中鹽酸替比拉西高效液色譜純度檢測(cè)方法，其特 征是:所述步驟(1)的有機(jī)溶劑為甲醇或乙醇。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種TAS-102中鹽酸替比拉西高效液色譜純度檢測(cè)方法，其特 征是:所述的液相色譜儀所采用十八烷基鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，色譜柱的規(guī)格為長(zhǎng) 度250mm、內(nèi)徑4.6mm、粒度5um。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種TAS-102中鹽酸替比拉西高效液相色譜純度檢測(cè)方法，其 特征是:所述步驟(2)的有機(jī)改性劑為甲醇或乙腈。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種TAS-102中鹽酸替比拉西高效液相色譜純度檢測(cè)方法，其 特征是:所述步驟(2)的改性緩沖溶液為加離子對(duì)試劑的20mmol磷酸鹽或磷酸水溶液。
【文檔編號(hào)】G01N30/02GK106018573SQ201610150279
【公開日】2016年10月12日
【申請(qǐng)日】2016年3月16日
【發(fā)明人】陳潤(rùn), 翟富民, 胡玉乾
【申請(qǐng)人】江蘇悅興藥業(yè)有限公司