一種新型篩查用老年癡呆速測試劑盒的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實(shí)用新型屬于免疫檢測技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種新型篩查用老年癡呆速測試劑盒。
【背景技術(shù)】
[0002]據(jù)估計(jì)，全球有2600萬人患老年癡呆癥(英譯名:為阿爾茨海默氏癥，簡稱:AD)患者。老年癡呆癥是危害極大的老年精神疾病，目前醫(yī)學(xué)界還沒有找到治愈這種病的辦法。根據(jù)阿爾茨海默氏癥協(xié)會和美國的研宄認(rèn)為早期診斷是至關(guān)重要。因?yàn)檫@時大部分病變進(jìn)展緩慢。早期診斷，早期治療，可以相當(dāng)大地延緩病變發(fā)生，維護(hù)病人的正常生活水平。早期準(zhǔn)確診斷還有助區(qū)分真老年癡呆癥病人與其它擬似老年癡呆癥(如抑郁癥，藥物的副作用，濫用藥物，維生素缺乏，脫水，膀胱感染或甲狀腺問題)的病人，避免誤診造成的不必要的，可能有害的治療。
[0003]目前診斷阿爾茨海默氏癥，涉及大量的測試包括:醫(yī)療史，精神狀態(tài)評估，物理檢查，神經(jīng)學(xué)檢查，神經(jīng)心理學(xué)評估，腦核磁共振，實(shí)驗(yàn)室測試(抽腦脊髓檢查)；因此，目前老年癡呆癥的診斷不但斷費(fèi)用高，而且不適合于早期篩查；有必要開發(fā)一種適合于在體外對早期AD患者和正常人進(jìn)行早期篩查的方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本實(shí)用新型為解決上述公知技術(shù)中存在的問題本實(shí)用新型的目的是提供一種操作簡單，快速，篩查用老年癡呆速測試劑盒。
[0005]一種新型篩查用老年癡呆快速檢測試劑盒，包括:1個測試條，2個示蹤液滴瓶其中I個T蹤液滴瓶，I個A蹤液滴瓶；2個陽性對照液滴瓶其中I個t陽性對照液滴瓶，I個a陽性對照液滴瓶；1個陰性對照液滴瓶，I個顯色液滴瓶；測試條有矩陣反應(yīng)槽，反應(yīng)槽是經(jīng)老年癡呆標(biāo)志物抗體包被過的。
[0006]所述的測試條含有2X5矩陣反應(yīng)槽，其中含有2個陽性槽、2個陰性槽和6個樣品槽，所有反應(yīng)槽都是經(jīng)Tau蛋白抗體和Αβ -淀粉樣蛋抗體混合包被過的。
[0007]所述測試條上的2X5矩陣反應(yīng)槽分為T行和A行；Τ行包括一個t陽性槽、一個Y陰性槽及3個試樣槽，A行包括一個a陽性槽、一個Y陰性槽及3個試樣槽。
[0008]所述測試條中2X5矩陣反應(yīng)槽可以是方形反應(yīng)槽，反應(yīng)槽邊長2-10mm，優(yōu)選的，5_8mm0
[0009]也可以是圓形反應(yīng)槽，反應(yīng)槽直徑2-10mm，優(yōu)選的，5_8mm。
[0010]所述測試條中2X5矩陣反應(yīng)槽可以是混合型反應(yīng)槽，其中T行反應(yīng)槽為方形反應(yīng)槽，A行反應(yīng)槽為圓形反應(yīng)槽，或T行反應(yīng)槽為圓形反應(yīng)槽，A行反應(yīng)槽為方形反應(yīng)槽。
[0011 ] 所述的T蹤液滴瓶裝有過氧化氫酶標(biāo)記的Tau蛋白液，所述的A蹤液滴瓶裝有過氧化氫酶標(biāo)記的A β -淀粉樣蛋液液。
[0012]所述的篩查用老年癡呆速測試劑盒中顯色液滴瓶是裝有TMB顯色液的液滴瓶。
[0013]所述2個陽性對照液滴瓶，一個t陽性對照液滴瓶是裝有已知濃度Tau蛋白溶液的液滴瓶，另一個a陽性對照液滴瓶是裝有已知濃度A β -淀粉樣蛋溶液的液滴瓶。
[0014]所述陰性對照液滴瓶中裝的是緩沖液。
[0015]本實(shí)用新型具有的優(yōu)點(diǎn)和積極效果是:
[0016]篩查用老年癡呆速測試劑盒由于采用了本實(shí)用新型的技術(shù)方案，與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有結(jié)構(gòu)簡單，使用方便，不需要儀器就能檢測，檢測靈敏度比免疫層析試紙條高出十倍以上等優(yōu)點(diǎn)。
[0017]本實(shí)用新型實(shí)現(xiàn)了在一次篩查用免疫檢測實(shí)驗(yàn)中，能同時測定樣品，陽性對照和陰性對照，避免了使用免疫層析試紙條時可能隱藏的假陰性和假失效的結(jié)果(現(xiàn)行的免疫層析試紙條是“單份”測定試紙條，無法實(shí)現(xiàn)同時測定一組陽性和陰性的對照物)，因此，能正確地界定檢測結(jié)果及有效性。
【附圖說明】
[0018]圖1是一種篩查用老年癡呆癥速測試劑盒結(jié)構(gòu)示意圖。
[0019]圖中，1、測試條，2、T示蹤液，3、A示蹤液，4、陽顯色液，5、t陽性對照液，6、a陽性對照液，7、陰性對照液。
【具體實(shí)施方式】
[0020]為能進(jìn)一步了解本實(shí)用新型的內(nèi)容、特點(diǎn)及功效，茲例舉以下實(shí)施例，并配合附圖詳細(xì)說明如下:
[0021]參閱附圖1。
[0022]實(shí)施例1:
[0023]一種新型篩查用老年癡呆速測試劑盒制備方法:如圖1所示，一種新型篩查用老年癡呆速測試劑盒包括:測試條(I)，裝在液滴瓶里的T示蹤液(2)、A示蹤液(3)、陽顯色液
(4)、t陽性對照液(5)、a陽性對照液(6)、陰性對照液(7)，其制備方法分述如下:
[0024]測試條:根據(jù)如圖1所示測試條圖形造模，選用聚苯乙烯(Polystyrene)塑料按公知的方法注模成形。每個測試條含有2X5矩陣反應(yīng)槽，其中T行反應(yīng)槽為方形結(jié)構(gòu)，反應(yīng)槽邊長8mm，包括一個t陽性槽、一個Y陰性槽及3個試樣槽，A行反應(yīng)槽為圓形結(jié)構(gòu)，反應(yīng)槽直徑7mm，包括一個a陽性槽、一個Y陰性槽及3個試樣槽；
[0025]所有反應(yīng)槽先用老年癡呆標(biāo)志物抗體的PBS緩沖液:Tau蛋白抗體和A β -淀粉樣蛋白抗體混合液(各2ug/ml)室溫靜置包被4小時后，洗槽后用2% BSA封閉液室溫靜置封閉2小時，然后甩干，40°C烘干后用鋁箔袋真空密封，置于冰箱備用。所述的老年癡呆標(biāo)志物特異性抗體可以是從市場購得也可以按公知的抗體制備方法來獲得。
[0026]T示蹤液:將過氧化氫酶標(biāo)記的老年癡呆標(biāo)志物Tau蛋白用I %牛血清蛋白-PBS緩沖液釋至10ng/ml，無菌過濾后裝在液滴瓶里，置于冰箱備用。
[0027]A示蹤液:將過氧化氫酶標(biāo)記的老年癡呆標(biāo)志物A β -淀粉樣蛋白用I %牛血清蛋白-PBS緩沖液釋至10ng/ml，無菌過濾后裝在液滴瓶里，置于冰箱備用。
[0028]t陽性對照液:將老年癡呆標(biāo)志物Tau蛋白用I %牛血清蛋白-PBS緩沖液釋0.5ng/ml，無菌過濾后裝在液滴瓶里，置于冰箱備用。
[0029]a陽性對照液:將老年癡呆標(biāo)志物A β -淀粉樣蛋白用I %牛血清蛋白-PBS緩沖液釋0.5ng/ml，無菌過濾后裝在液滴瓶里，置于冰箱備用。
[0030]顯色液:將TMB溶解于用50mM檸檬酸緩沖液(pH4.5)，調(diào)濃度至0.2mg/ml，再加過氧化氫至0.03% (此TMB-過氧化氫混合液即為過氧化氫酶顯色液)，無菌過濾后裝在避光液滴瓶里，置于冰箱備用。
[0031]實(shí)施例2:
[0032]本實(shí)施例新型篩查用老年癡呆速測試劑盒的檢測過程，包含下述幾個步驟:
[0033]I)加樣反應(yīng):取一測試條，給每個試樣槽作記號:1_3 ;在各反應(yīng)槽中加入I滴不蹤液，再分別在陽性槽加入I滴t陽性對照液、a陽性槽加入I滴a陽性對照液、每個Y陰性槽加入I滴陰性對照液，用不同的塑料吸管分別吸取不同待測樣品，在每個試樣槽(1-3)中分別滴加I滴待測樣品(1-3)注意:對號入座。輕晃混勻后室溫下靜置5-30分鐘。
[0034]2)洗滌:倒掉反應(yīng)槽中液體并用過濾水(或自來水)沖洗反應(yīng)槽5次或以上?’每次沖洗后，將反應(yīng)槽倒干再摔向吸水紙(如衛(wèi)生紙)上以除去反應(yīng)槽內(nèi)水珠。
[0035]3)顯色:在每個反應(yīng)槽內(nèi)加入2滴顯色液，輕晃測試條并觀察反應(yīng)槽中顏色變化，直至陰性反應(yīng)槽內(nèi)有清晰的顏色出現(xiàn)，
[0036]4)結(jié)果分析:比較各反應(yīng)槽(陽性對照，陰性對照和各樣品)的顏色深淺程度以確定該被檢樣品是陽性還是陰性。
[0037]由于陽性對照及陽性樣品中含有老年癡呆標(biāo)志物，能與示蹤液中預(yù)標(biāo)記的老年癡呆標(biāo)志物相互競爭地與反應(yīng)槽上對應(yīng)的抗體結(jié)合，而陰性對照不能；因此，正常情況下陽性樣品不顯色，陰性顯色。如果被檢樣品的顏色明顯比陰性對照淺，說明該被檢樣品為陽性；如果被檢樣品的顏色與陰性對照相同或更深說明該被檢樣品為陰性；如果被檢樣品的顏色比陰性對照稍淺，比陽性對照深說明該被檢樣品為陽性，但其被檢標(biāo)志物濃度低于陽性對照；如果陽性對照的顏色與陰性對照相同或更深說明該實(shí)驗(yàn)失敗。
[0038]本實(shí)用新型具有結(jié)構(gòu)簡單，快捷方便，檢測靈敏度高等特點(diǎn)，實(shí)現(xiàn)在一次實(shí)驗(yàn)中同時測定3個樣品，陽性對照和陰性對照，從而能正確地界定檢測結(jié)果和有效性。
[0039]以上實(shí)施例所述內(nèi)容僅為本實(shí)用新型的較佳實(shí)施例，不能被認(rèn)為用于限定本實(shí)用新型的實(shí)施范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種新型篩查用老年癡呆快速檢測試劑盒，其特征是:檢測試劑盒包括I個測試條，I個T蹤液滴瓶，I個A蹤液滴瓶，I個t陽性對照液滴瓶，I個a陽性對照液滴瓶，I個陰性對照液滴瓶，I個顯色液滴瓶；測試條有矩陣反應(yīng)槽，反應(yīng)槽是經(jīng)老年癡呆標(biāo)志物抗體包被過的。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的篩查用老年癡呆快速測試劑盒呆快速測試劑盒，其特征是:所述的測試條含有2X5矩陣反應(yīng)槽，其中含有2個陽性槽、2個陰性槽和6個樣品槽，所有反應(yīng)槽都是經(jīng)混合雙抗體:Tau蛋白抗體和Αβ -淀粉樣蛋抗體包被過的。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的篩查用老年癡呆快速測試劑盒呆快速測試劑盒，其特征是:所述測試條含有2X5矩陣反應(yīng)槽，分T行和A行；Τ行包括一個t陽性槽、一個Y陰性槽及3個試樣槽，A行包括一個a陽性槽、一個Y陰性槽及3個試樣槽。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的篩查用老年癡呆快速測試劑盒呆快速測試劑盒，其特征是:所述測試條中2X5矩陣反應(yīng)槽是方形反應(yīng)槽，反應(yīng)槽邊長2-10mm。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的篩查用老年癡呆快速測試劑盒呆快速測試劑盒，其特征是:所述測試條中2X5矩陣反應(yīng)槽是圓形反應(yīng)槽，反應(yīng)槽直徑2-10mm。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的篩查用老年癡呆快速測試劑盒呆快速測試劑盒，其特征是:所述測試條中2X5矩陣反應(yīng)槽是混合型反應(yīng)槽，其中T行反應(yīng)槽為方形反應(yīng)槽，A行反應(yīng)槽為圓形反應(yīng)槽，或T行反應(yīng)槽為圓形反應(yīng)槽，A行反應(yīng)槽為方形反應(yīng)槽。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的篩查用老年癡呆快速測試劑盒呆快速測試劑盒，其特征是:所述的T蹤液滴瓶裝有過氧化氫酶標(biāo)記的Tau蛋白液，所述的A蹤液滴瓶裝有過氧化氫酶標(biāo)記的A β -淀粉樣蛋液液。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的篩查用老年癡呆快速測試劑盒呆快速測試劑盒，其特征是:顯色液滴瓶是裝有TMB顯色液的液滴瓶。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的篩查用老年癡呆快速測試劑盒呆快速測試劑盒，其特征是:所述的t陽性對照液滴瓶是裝有已知濃度Tau蛋白溶液的液滴瓶，所述的a陽性對照液滴瓶是裝有已知濃度A β -淀粉樣蛋白溶液的液滴瓶；所述陰性對照液滴瓶中裝的是緩沖液。
【專利摘要】本實(shí)用新型涉及一種新型篩查用老年癡呆速測試劑盒。本實(shí)用新型屬于免疫檢測技術(shù)領(lǐng)域。一種新型篩查用老年癡呆速測試劑盒，其特征是：檢測試劑盒包括測試條和液滴瓶；液滴瓶分別裝有2個示蹤液，2個陽性對照液，1個陰性對照液，1個顯色液；測試條有反應(yīng)槽，反應(yīng)槽是經(jīng)老年癡呆標(biāo)志物雙抗體包被過的；示蹤液含有預(yù)標(biāo)記的老年癡呆標(biāo)志物，能特異地與檢測槽中的抗體結(jié)合。本實(shí)用新型具有結(jié)構(gòu)簡單，快捷方便，適于現(xiàn)場操作，等優(yōu)點(diǎn)。
【IPC分類】G01N33-68
【公開號】CN204439640
【申請?zhí)枴緾N201420777303
【發(fā)明人】鄒潮, 關(guān)靖, 吳駟
【申請人】北京海略世紀(jì)生物技術(shù)有限責(zé)任公司
【公開日】2015年7月1日
【申請日】2014年12月12日