由泰樂菌素發(fā)酵物濾液直接合成替米考星的方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及一種由泰樂菌素發(fā)酵物濾液直接合成替米考星的方法，屬于生物化學技術領域。
【背景技術】
[0002]替米考星(Tilmicosin)是一種較新的由泰樂菌素半合成的大環(huán)內酯類畜禽專用抗生素，八十年代由英國Elanco動物保健品公司開發(fā)成功。由于其特殊的抗菌活性和藥動學特征，該藥已被批準臨床用于牛、山羊、綿羊、奶牛、豬、雞等動物感染性疾病的防治，特別是畜禽呼吸道疾病，如家畜放線桿菌性胸膜肺炎、巴氏桿菌病和雞霉形體病等及泌乳動物乳房炎的治療。但傳統(tǒng)合成工藝是由磷酸泰樂菌素開始合成，生產成本較高。

【發(fā)明內容】

[0003]本發(fā)明所要解決的技術問題在于在于克服替米考星的現(xiàn)有工藝中的不足之處，設計一種提取收率高，環(huán)境污染少以及成本低廉的合成方法。
[0004]本發(fā)明提供了一種由泰樂菌素發(fā)酵物濾液直接合成替米考星的方法，該方法包括下列步驟:
(一)發(fā)酵液預處理
1.發(fā)酵液加入1%硅聚合氯化鋁處理后，板框過濾，待濾液較少流出時，向板框里頂水洗濾餅。
[0005]2.頂洗至濾液效價500，停止頂洗。
[0006]3.壓榨至基本沒有濾液流出。
[0007]( 二 )除雜
1.用截留分子量20000的陶瓷膜進行除雜操作。
[0008]2.待濾液剩余原濾液體積的10%時，向剩余濾液中加入原濾液10%的清水
3.繼續(xù)除雜操作
4.待濾液又剩余原濾液體積的10%時，再向剩余濾液中加入原濾液10%的清水
5.繼續(xù)除雜操作
6.待濾液又剩余原濾液體積的10%時，再向剩余濾液中加入原濾液10%的清水
7.繼續(xù)除雜操作至慮出液效價低于500。
[0009]8.放掉剩余殘留雜質 9.清洗陶瓷膜系統(tǒng)。
[0010](三)濃縮
1.用截留分子量300?500的納濾膜進行濃縮操作。
[0011]2，打開物料進料閥，待分離料液進入物料罐，使罐內料液能夠滿足連續(xù)分離時的流量值和緩沖體積。打開料分離管道上所有閥門，使液體能夠流經閥、泵、浮子流量計流到濃縮罐。低頻率啟動保安泵和輸料泵(若有)，并調節(jié)頻率控制電磁流量計滿足設定值，物料流過進料管至濃縮液罐(此時應為系統(tǒng)內的存水)。
[0012]3，當物料流動穩(wěn)定后，逐級打開進入組件的閥門，使物料進入膜組件，同時低頻率啟動組件循環(huán)泵。在滿足內外循環(huán)流量的前提下調節(jié)各泵頻率和調壓閥，使濾液從滲透液管中透出，流經浮子流量計和轉換閥，流到濾液罐。物料罐內液面下降時需及時補充保持液面高度，直至待分離物料全部加完。
[0013]4，溶液開始濃縮，繼續(xù)調節(jié)各泵頻率和調壓閥，使濾液流量滿足設定值(當壓力達到設計值而濾液流量未達到時，以壓力值為操作點)。
[0014]5，系統(tǒng)正在濃縮，排出滲透液及濃縮液，直至被分離物料過濾完成，關機停止運行。
[0015]6，當濃縮結束時，打開清洗進水閥并啟動清洗泵，停止保安泵和進料泵(若有) 并關閉進料閥，用CIP罐內的純水將系統(tǒng)中的濃縮液頂出系統(tǒng)至物料罐中
7，當系統(tǒng)內濃縮液已被頂出系統(tǒng)，閥門轉入水循環(huán)狀態(tài)。
[0016]8，當系統(tǒng)中的濃縮液尚未頂凈，而CIP罐內的純水不足時，要及時補充純水，防止空氣進入系統(tǒng)中。
[0017](四)轉相
將醋酸丁酯，液堿，濃縮液經混合器混合后，PH在10.5?11.0，直接進入碟片式分離機，收集丁酯相，水洗后干燥。
[0018](五)胺化反應
在醋酸丁酯相中，攪拌狀態(tài)下加入定量的3，5—二甲基哌啶和甲酸。然后保持該溫度攪拌反應2小時，取樣經HPLC分析。泰樂菌素含量< 1.5%視為反應完全，將反應液降溫到22?26如果泰樂菌素含量>1.5%，則繼續(xù)保溫反應，多次取樣分析，直到泰樂菌素含量〈1.5%為止。氨化結束，加入藥用活性炭，脫色40分鐘，經鈦棒過濾器過濾。
[0019](六)水解反應
攪拌狀態(tài)下，向濃縮液中緩慢滴加15%的鹽酸調PH值，溫度保持在20?25 '調好pH后緩慢升溫至60°C，保溫反應4小時，取樣經液相分析。如果泰樂菌素B組分氨化物含量^ 1.5% (峰面積計)，則繼續(xù)保持60°C反應，直到泰樂菌素B組分氨化物含量小于1.5%然后把反應液降到22?26
[0020](七)結晶離心
保持22?26 ，攪拌狀態(tài)下滴加氫氧化鈉溶液，調節(jié)pH值至有少量結晶物出現(xiàn)，保溫20分鐘，繼續(xù)滴加液堿至ρΗΙΟ.5?11.0，調好pH后保溫攪拌60分鐘，經轉鼓離心機離心分離，然后用純化水洗滌，甩干，晶體烘干后粉碎包裝。
[0021]本發(fā)明的有益好處是:合成效果好，產品純度高，收率高，可以大量減少有機溶劑的使用，降低了生產成本，減輕了環(huán)保壓力，適合于規(guī)?；I(yè)生產。
[0022]【具體實施方式】:
一，發(fā)酵液預處理
1.發(fā)酵液加入1%硅聚合氯化鋁處理后，板框過濾，待濾液較少流出時，向板框里頂水洗濾餅。
[0023]2.頂洗至濾液效價500，停止頂洗。
[0024]3.壓榨至基本沒有濾液流出。
[0025]二，除雜
1.用截留分子量20000的陶瓷膜進行除雜操作。
[0026]2.待濾液剩余原濾液體積的10%時，向剩余濾液中加入原濾液10%的清水
3.繼續(xù)除雜操作
4.待濾液又剩余原濾液體積的10%時，再向剩余濾液中加入原濾液10%的清水
5.繼續(xù)除雜操作
6.待濾液又剩余原濾液體積的10%時，再向剩余濾液中加入原濾液10%的清水
7.繼續(xù)除雜操作至慮出液效價低于500。
[0027]8.放掉剩余殘留雜質 9.清洗陶瓷膜系統(tǒng)。
[0028]三，濃縮
1.用截留分子量300?500的納濾膜進行濃縮操作。
[0029]2.打開物料進料閥，待分離料液進入物料罐，使罐內料液能夠滿足連續(xù)分離時的流量值和緩沖體積。打開料分離管道上所有閥門，使液體能夠流經閥、泵、浮子流量計流到濃縮罐。低頻率啟動保安泵和輸料泵(若有)，并調節(jié)頻率控制電磁流量計滿足設定值，物料流過進料管至濃縮液罐(此時應為系統(tǒng)內的存水)。
[0030]3.當物料流動穩(wěn)定后，逐級打開進入組件的閥門，使物料進入膜組件，同時低頻率啟動組件