一種從四方藤中提取純化巖白菜素的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種從四方藤中提取、純化巖白菜素的方法，屬于天然藥物開發(fā)利用
技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 四方藤（屬于葡萄科（KZteceaeO白粉藤屬（ ZiiM.)植物，因其莖、枝、葉柄呈銳四方形而得名，又名方藤、寬筋藤、螞蝗藤等。四方藤主要 分布于我國的廣西、廣東、云南等南方地帶，資源豐富，其性酸、澀、甘、平，具有活血散瘀、祛 風(fēng)濕、舒筋絡(luò)、消炎等功效，在我國民間廣泛用于風(fēng)濕痹痛、腰肌勞損、外傷、出血等病痛的 治療，具有良好療效。例如百色地區(qū)農(nóng)民直接用四方藤鮮葉搗爛外敷止血；百色醫(yī)院將四方 藤制成粉劑和注射劑，用于治療內(nèi)外傷出血，十二指腸出血，胃炎等疾病。四方藤收載于《廣 西中草藥》、《廣西藥用植物名錄》、《中國藥典》（1977年版一部)、《中藥大辭典》等典籍中， 因其來源豐富、價格低廉、療效廣泛而顯著，是一種極具有開發(fā)利用價值的特色民族藥用植 物。盡管四方藤在我國少數(shù)民族民間具有悠久的藥用歷史與經(jīng)驗，但由于四方藤化學(xué)成分 與藥理研究的缺乏，在四方藤有效成分的開發(fā)利用上，尚未有深度產(chǎn)品的出現(xiàn)，其在市場上 仍以原藥材的形式出售，價格低廉。巖白菜素的結(jié)構(gòu)：
巖白菜素又名虎兒草素、巖白菜內(nèi)酯，分子式為C14H16O9，是一種具有異香豆素結(jié)構(gòu)的天 然化合物。巖白菜素及其衍生物具有抗炎、止咳、鎮(zhèn)痛、抑菌、抗氧化等多種藥理活性。巖白 菜素已作為鎮(zhèn)咳祛痰藥收載于《中華人民共和國藥典》各版本中，在臨床上用于支氣管炎、 肺氣腫、胃炎等疾病的治療，具有良好療效，是一種藥理活性廣泛、療效顯著、毒副作用低的 天然藥物。
[0003] 由于化學(xué)合成的困難，巖白菜素主要用從天然藥用植物中提取、純化法制備。目 前，巖白菜素提取方法的報道較多，而對于其純化方法的報道較少。巖白菜素的提取方法主 要有索式提取法、超聲波提取法、超臨界提取法、有機溶劑回流提取法、堿提取法等。然而， 目前用于純化巖白菜素提取物的方法難于規(guī)模化制備。如硅膠柱層析法是實驗室常用的分 離手段，但硅膠不能回收，洗脫劑為石油醚、乙酸乙酯、氯仿等有毒有機溶劑，成本高，操作 難度大，不能用于產(chǎn)業(yè)化制備；重結(jié)晶法，必須是待結(jié)晶溶液中巖白菜素的含量高達一定程 度時才能使用，普通的巖白菜素提取物，在沒有經(jīng)過其它方法富集之前，比較難于結(jié)晶而無 法直接用重結(jié)晶法純化。鑒于此，目前有機溶劑提取法尚停留在獲得含有巖白菜素粗提物 的階段，而要利用該提取法大批量制備巖白菜素純品，必須開發(fā)出可產(chǎn)業(yè)化放大、成本低的 純化方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種適合產(chǎn)業(yè)化放大，成本低的從四方藤中制備原料藥巖 白菜素的方法。
[0005] 本發(fā)明通過如下技術(shù)方案實現(xiàn)的。
[0006] -種從四方藤中提取純化巖白菜素的方法，包括如下步驟： (1) 將四方藤粉碎，過篩，按照質(zhì)量體積比為1 :8~20加入40~60%的乙醇溶液回流提 ??； (2) 固液分離得到濾液，將濾液濃縮至其原體積的1/2~1/3,同時回收溶劑； (3) 向濃縮液中加入大孔樹脂靜態(tài)吸附6~8小時，大孔樹脂選自AB-8、D3520、D101 ; (4) 將吸附后的大孔樹脂上柱，依次先用蒸餾水、10%的乙醇溶液除去雜質(zhì)； (5) 用20%的乙醇溶液洗脫，收集20%乙醇洗脫液； (6) 將20%乙醇洗脫液濃縮，得到巖白菜素粗品； (7) 將巖白菜素粗品用乙醇重結(jié)晶得到巖白菜素純品。
[0007] 上述步驟（2)中，固液分離的方法為過濾或離心分離，濾液濃縮至巖白菜素濃度2 mg/mL〇
[0008] 上述步驟（4)中，用2倍柱體積的蒸餾水和2倍柱體積的10%乙醇除去雜質(zhì)。
[0009] 上述步驟（5)中，用7倍柱體積的20%乙醇洗脫。
[0010] 上述步驟（6)中，所述的濃縮方法為真空濃縮或膜濃縮。
[0011] 上述步驟（7)中，用95%的乙醇進行重結(jié)晶。
[0012] 本發(fā)明的優(yōu)點在于：采用40~60%的酒精提取，具有綠色無毒、提取率高、成本低、 易回收利用等優(yōu)點；采用大孔樹脂純化和富集，具有吸附量大、可重復(fù)利用、易于產(chǎn)業(yè)化放 大、成本低等優(yōu)點，經(jīng)過大孔樹脂純化后，可獲得巖白菜純度在80%以上的粗品；將大孔樹 脂純化后是巖白菜素粗品，經(jīng)過乙醇溶液重結(jié)晶便可獲得滿足作為原料藥使用的巖白菜素 純品；本發(fā)明原料來源廣泛，價格便宜，生產(chǎn)成本低，生產(chǎn)條件溫和，對環(huán)境污染小。
【附圖說明】
[0013] 圖1為本發(fā)明提取純化工藝流程圖； 圖2不同大孔樹脂的靜態(tài)飽和吸附率； 圖3不同大孔樹脂的靜態(tài)解吸率。
【具體實施方式】
[0014] 以下通過實施例對本發(fā)明作進一步說明。
[0015]實施例1 將500 g的四方藤粉末，加入50%乙醇溶液，使四方藤粉末的質(zhì)量與乙醇的體積比為 1:20,回流提取1次，每次2 h，離心、過濾、棄去廢渣收集得到濾液，將濾液濃縮，同時回收 溶劑。將濃度為2. 0 mg/mL的濃縮液，按體積與大孔樹脂質(zhì)量為1:1的比例，加入AB-8大 孔樹脂中進行靜態(tài)吸附，吸附時間為8 h，然后上柱。先用2倍柱體積的蒸餾水和2倍柱體 積的10%乙醇除去雜質(zhì)，然后再用7倍柱體積20%乙醇溶液進行洗脫，收集20%乙醇洗脫部 分。將洗脫液濃縮，得到巖白菜素粗品10.3 g，95%乙醇重結(jié)晶后得到巖白菜素純品8. 9 g°
[0016] 實施例2 將IKg的四方藤粉末，加入50%乙醇溶液，使四方藤粉末與乙醇的質(zhì)量體積比為1:15， 回流提取2次，每次2 h，離心、過濾、棄去廢渣收集得到濾液，將濾液濃縮，同時回收有機溶 劑。將濃度為2. 0 mg/mL的濃縮液，按體積與大孔樹脂質(zhì)量為1:1的比例，加入D3520大孔 樹脂中進行靜態(tài)吸附，吸附時間為8 h，然后上柱。先用2倍柱體積的蒸餾水和2倍柱體積 的10%乙醇除去雜質(zhì)。然后再用7倍柱體積20%乙醇溶液進行洗脫，收集20%乙醇洗脫部 分。將洗脫液濃縮，得到巖白菜素粗品20.5 g，95%乙醇重結(jié)晶后得到巖白菜素純品17. 6 g°
[0017] 實施例3 將10 Kg的四方藤粉末，加入60%乙醇溶液，使四方藤粉末與乙醇的質(zhì)量體積比為 1:10,回流提取3次，每次2 h，離心、過濾、棄去廢渣收集得到濾液，將濾液濃縮，同時回收 有機溶劑。將濃度為2. 0 mg/mL的濃縮液，按