血管性血友病因子抑制多肽及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】：
[0001] 本發(fā)明涉及藥物領(lǐng)域，具體涉及用于預(yù)防和治療或預(yù)防動脈粥樣硬化的多肽化合 物。
【背景技術(shù)】：
[0002] 動脈粥樣硬化（Atherosclerosis)是由于脂肪、血栓、結(jié)締組織和碳酸鈣在血管 (主要是動脈，但也包括靜脈）沉積所造成的一種對人體有害的狀態(tài)。其特點是動脈管壁增 厚變硬、失去彈性和管腔縮小。動脈粥樣硬化的癥狀主要決定于血管病變及受累器官的缺 血程度，主動脈粥樣硬化常無癥狀，冠狀動脈粥樣硬化者，若管徑狹窄達75 %以上，則可發(fā) 生心絞痛、心肌梗塞、心律失常，甚至猝死。腦動脈硬化可引起腦缺血、腦萎縮，或造成腦血 管破裂出血，腎動脈粥樣硬化常引起夜尿、頑固性高血壓、嚴(yán)重者可有腎功能不全。腸系膜 動脈粥樣硬化可表現(xiàn)為飽餐后腹痛便血等癥狀。下肢動脈粥樣硬化引起血管腔嚴(yán)重狹窄者 可出現(xiàn)間歇性跛行、足背動脈搏動消失，嚴(yán)重者甚至可發(fā)生壞疽。動脈粥樣硬化是一組稱為 動脈硬化的血管病中最常見、最重要的一種。
[0003]目前預(yù)防和治療動脈粥樣硬化的藥物，主要為針對控制易患因素。如患有糖尿病、 應(yīng)及時控制血糖，包括飲食控制。2型糖尿病的降糖藥物應(yīng)以不引起高胰島素血癥為宜如達 美康等；如有高血壓則應(yīng)給降壓藥，使血壓降至適當(dāng)水平，如有血膽固醇增高，則應(yīng)控制高 膽固醇適當(dāng)給予降脂藥物。
[0004] 血管性血友病因子（vWF)是一種重要的血漿成分。vWF在止血過程中主要由兩種 作用：①與血小板膜GP I b-IX復(fù)合物及內(nèi)皮下膠原結(jié)合，介導(dǎo)血小板在血管損傷部位的黏 附；②與因子W結(jié)合，作為載體具有穩(wěn)定因子W的作用。此外，vWF也能結(jié)合GP II b-III a， 參與血小板的聚集過程。在內(nèi)皮細胞受刺激或損傷以及集體處于應(yīng)激狀態(tài)時，血漿vWF水 平升高。相反，當(dāng)vWF基因發(fā)生缺失、插入點突變、剪切點替換或提前形成轉(zhuǎn)錄終止信號時， 導(dǎo)致血漿vWF量有顯著減低或有質(zhì)的缺陷，不能完成其正常的止血功能時，即為vWD。vWF 及某些止血與纖溶成分都是血栓性疾病的獨立危險因素。它與一系列心血管疾病如動脈粥 樣硬化、急性冠狀動脈綜合征、心房顫動等均關(guān)系密切。抑制vWF，可以減少血管壁血栓的形 成，抑制動脈管壁增厚變硬、失去彈性和管腔縮小，從而預(yù)防或治療動脈粥樣硬化?，F(xiàn)階段， 沒有成熟開發(fā)的血管性血友病因子抑制劑問世，用于治療動脈粥樣硬化。

【發(fā)明內(nèi)容】
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[0005] 本發(fā)明目的是針對現(xiàn)有治療動脈粥樣硬化藥物的特點，設(shè)計一種多肽化合物，能 有效治療或預(yù)防動脈粥樣硬化。
[0006] 技術(shù)方案
[0007] 血管性血友病因子抑制多肽，其特征在于：其序列為QGSLQDMLWQLDLSPGC。采用 Fmoc保護的固相合成技術(shù)制備?？晒矁r連接一個佐劑，佐劑是牛血清白蛋白，人血清白蛋 白，或聚乙二醇。血管性血友病因子抑制多肽在治療動脈粥樣硬化相關(guān)疾病中的應(yīng)用。所述 的動脈粥樣硬化相關(guān)疾病是心絞痛、心肌梗塞、心律失常、腦卒中、腦萎縮、頑固性高血壓、 腎功能不全等病變。
[0008] 有益結(jié)果：
[0009] 本發(fā)明中的血管性血友病因子抑制多肽可以靶向抑制血管性血友病因子，抑制凝 血，抑制血栓形成，達到預(yù)防或治療動脈粥樣硬化的作用。更優(yōu)選是治療動脈粥樣硬化相關(guān) 疾病藥物中的用途。所述的脈粥樣硬化相關(guān)疾病包括心絞痛、心肌梗塞、心律失常、腦卒中、 腦萎縮、頑固性高血壓、腎功能不全等病變。
【具體實施方式】
[0010] 實施例1
[0011] 多肽的化學(xué)合成方法
[0012] 多肽用Fmoc保護的固相合成技術(shù)制備。合成反應(yīng)按照多肽序列從C端向N端進 行，Rink介質(zhì)（可在Advanced Chem Tech公司購得）上有自由氨基。每一步連接過程中，氨 基酸殘基都要活化，活化混合物中有4倍于介質(zhì)上自由氨基的HBTU，HOBt，DIEA和Fmoc-氨 基酸。每次氨基酸的連接反應(yīng)之后，都用一個吡啶/醋酸/N-甲基咪唑（4:1:0.5)的混合 物來封閉未連接的自由氨基，封閉反應(yīng)10分鐘。每次氨基酸的連接反應(yīng)之后，下一個氨基 酸連接之前，都要把介質(zhì)上的Fmoc-基團去掉，去Fmoc-基團使用含20%哌啶的二甲基甲酰 胺，需15分鐘。最后，當(dāng)所有氨基酸殘基順序連接之后，多肽用98%三氟乙酸從介質(zhì)上切割 下來，切割在室溫下進行2小時。
[0013] 應(yīng)用上述化學(xué)條件可合成并獲得多肽，序列為QGSLQDMLWQLDLSPGC，該序列為全新 序列。也可委托上海生工合成。
[0014] 實施例2
[0015] 血管性血友病因子抑制多肽對小鼠動脈粥樣硬化模型的影響
[0016] 建立小鼠動脈粥樣硬化模型。雄性8周齡的C57BL/6J小鼠40只，隨機分為4 組，分別為：A組為空白對照組：普通飼料喂養(yǎng)；B組為模型對照組：造模+高脂飼料喂養(yǎng)； C組為藥物干預(yù)組：造模+高脂飼料+血管性血友病因子抑制多肽（10mg/kg/d) ;D為陽性 藥干預(yù)組：造模+高脂飼料+奧利司他片（20mg/kg/d)。連續(xù)12周。A組小鼠飼料為普 通飼料，B、C、D組小鼠用高脂高膽固醇飼料（含15%豬油+0. 25%膽固醇）喂養(yǎng)，以加速 動脈粥樣硬化模型的形成。12周后，記錄小鼠體重，檢測多肽對血清膽固醇的影響：血清 總膽固醇（total cholesterol，TC)、甘油三酯（tryglyeride，TG)、高密度脂蛋白膽固醇 (high density lipoprotein cholesterol，HDL-C)和低密度脂蛋白膽固醇（low density lipoprotein cholesterol，HDL-C)的水平；，檢測小鼠主動脈粥樣硬化形成情況：對小鼠 主動脈大體和主動脈根部冰凍切片行油紅〇染色，對動脈粥樣斑塊面積進行定量。
[0017] 結(jié)果：各組實驗小鼠實驗期間體重都有增長趨勢。隨著喂養(yǎng)時間的變化，高脂飲食 喂養(yǎng)組的體重增長較正常飲食組快（P〈〇. 05,見表1)。多肽組小鼠體重增長與正常飲食組 相當(dāng)（P>0. 05)，與模型組相比體重較輕（P〈0. 05)。多肽組與高脂高膽固醇喂養(yǎng)的模型小鼠 組相比，TG、TC、HDL-C、LDL-C水平顯著降低（P〈0. 01，見表2)，動脈粥樣斑塊面積顯著性減 小（P〈0. 01，見表3)，與模型對照組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。
[0018] 表1血管性血友病因子抑制多肽對小鼠動脈粥樣硬化模型小鼠體重的影響
[0019]
[0021] *p〈0. 05, #p〈0. 01與模型組相比
[0022] 表2血管性血友病因子抑制多肽對小鼠動脈粥樣硬化模型小鼠膽固醇的影響
[0023]
[0024] *p〈0. 05, #p〈0. 01與模型組相比
[0025] 表3血管性血友病因子抑制多肽對小鼠動脈粥樣硬化模型小鼠動脈粥樣硬化面 積的影響
[0026]
[0028] *p〈0. 05, #p〈0. 01與模型組相比
[0029] 結(jié)論：血管性血友病因子抑制多肽對小鼠動脈粥樣硬化具有治療作用。
【主權(quán)項】
1. 一種血管性血友病因子抑制多肽，其特征在于：其序列為QGSLQDMLWQLDLSPGC。2. -種權(quán)利要求1所述多肽的制備方法，其特征在于：采用Fmoc保護的固相合成技 術(shù)制備。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的多肽的制備方法，其特征在于：可共價連接一個佐劑，佐劑是 牛血清白蛋白，人血清白蛋白，或聚乙二醇。4. 權(quán)利要求1-3任一項的多肽在治療動脈粥樣硬化相關(guān)疾病中的應(yīng)用。5. 根據(jù)權(quán)利要求4的用途，所述的動脈粥樣硬化相關(guān)疾病是心絞痛、心肌梗塞、心律失 常、腦卒中、腦萎縮、頑固性高血壓、腎功能不全等病變。
【專利摘要】本發(fā)明涉及藥物領(lǐng)域，具體涉及預(yù)防和治療或預(yù)防動脈粥樣硬化的多肽化合物。血管性血友病因子抑制多肽，其特征在于：其序列為QGSLQDMLWQLDLSPGC。采用Fmoc保護的固相合成技術(shù)制備。可共價連接一個佐劑，佐劑是牛血清白蛋白，人血清白蛋白，或聚乙二醇。血管性血友病因子抑制多肽在治療動脈粥樣硬化相關(guān)疾病中的應(yīng)用。所述的動脈粥樣硬化相關(guān)疾病是心絞痛、心肌梗塞、心律失常、腦卒中、腦萎縮、頑固性高血壓、腎功能不全等病變。本發(fā)明中的血管性血友病因子抑制多肽可以靶向抑制血管性血友病因子，抑制凝血，達到預(yù)防或治療動脈粥樣硬化的作用。
【IPC分類】A61P25/00, A61P9/10, C07K7/08, A61P9/06, A61P13/12, C07K1/04, C07K1/06, A61P9/12
【公開號】CN105175504
【申請?zhí)枴?br>【發(fā)明人】羅瑞雪
【申請人】蘇州普羅達生物科技有限公司
【公開日】2015年12月23日
【申請日】2015年9月8日