一鍵式核酸擴(kuò)增儀及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種檢測儀器，尤其涉及一種檢測核酸的儀器。本發(fā)明還涉及使用該儀器的檢測方法。
【背景技術(shù)】
[0002]目前市場中的核酸擴(kuò)增儀由于對控溫參數(shù)的精確性和均一性要求高，造成了核酸擴(kuò)增儀的價(jià)格極其昂貴，以至于在實(shí)際使用中卻存在很多高價(jià)位購買，單功能或部分功能使用的浪費(fèi)現(xiàn)象。
[0003]在一些有核酸擴(kuò)增儀的單位機(jī)構(gòu)，核酸擴(kuò)增儀的使用頻率非常低，或者操作過于復(fù)雜，使得專業(yè)人員很少使用或者沒有能力合理使用;而無核酸擴(kuò)增儀的單位機(jī)構(gòu)，沒有購買力，或者考慮到使用頻率低而不去購買，或者沒有專業(yè)人員進(jìn)行操作。
[0004]因此，本領(lǐng)域亟需一種操作更加簡便、成本低、適于用于檢測特定靶標(biāo)核酸的核酸擴(kuò)增儀。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0005]為了解決上述現(xiàn)有技術(shù)中存在的問題，本發(fā)明提供了一種單程序、一鍵式的核酸擴(kuò)增儀。
[0006]本發(fā)明的一個(gè)目的在于，提供一種用于檢測特定靶標(biāo)核酸的一鍵式核酸擴(kuò)增儀，所述核酸擴(kuò)增儀包括恒溫部件、控制模塊、啟動(dòng)開關(guān)、通知部件和移位部件，
[0007]所述啟動(dòng)開關(guān)接收到啟動(dòng)信號之后將啟動(dòng)信號傳遞到控制模塊，
[0008]所述恒溫部件用于在收到來自控制模塊的控制信號之后在預(yù)設(shè)的溫度下保持恒溫一段預(yù)設(shè)的時(shí)間，
[0009]所述控制模塊根據(jù)預(yù)設(shè)的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)程序輸出控制信號，以實(shí)施以下步驟:
[0010]i)控制移位部件將樣品置于恒溫部件中溫育一段時(shí)間，和/或
[0011]ii)控制移位部件將樣品與一個(gè)恒溫部件分離并置于另一恒溫部件中溫育一段時(shí)間，并且
[0012]iii)將上述步驟i)和/或ii)按照預(yù)設(shè)的順序循環(huán)預(yù)設(shè)的次數(shù)，
[0013]在控制模塊執(zhí)行完預(yù)設(shè)的程序之后，控制模塊向所述通知部件發(fā)出結(jié)束信號，使得通知部件發(fā)出結(jié)束通知。
[0014]本發(fā)明的一鍵式核酸擴(kuò)增儀可以為專用于檢測特定靶標(biāo)核酸的一鍵式核酸擴(kuò)增儀。
[0015]在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，本發(fā)明提供一種專用于檢測特定靶標(biāo)核酸的一鍵式核酸擴(kuò)增儀，所述核酸擴(kuò)增儀包括恒溫部件、控制模塊、啟動(dòng)開關(guān)、通知部件和移位部件，
[0016]所述啟動(dòng)開關(guān)接收到啟動(dòng)信號之后將啟動(dòng)信號傳遞到控制模塊，
[0017]所述恒溫部件用于在收到來自控制模塊的控制信號之后在預(yù)設(shè)的溫度下保持恒溫一段預(yù)設(shè)的時(shí)間，
[0018]所述控制模塊根據(jù)預(yù)設(shè)的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)程序輸出控制信號，以實(shí)施以下步驟:
[0019]i)控制移位部件將樣品置于恒溫部件中溫育一段時(shí)間，和/或
[0020]ii)控制移位部件將樣品與一個(gè)恒溫部件分離并置于另一恒溫部件中溫育一段時(shí)間，并且
[0021]iii)將上述步驟i)和/或ii)按照預(yù)設(shè)的順序循環(huán)預(yù)設(shè)的次數(shù)，
[0022]在控制模塊執(zhí)行完預(yù)設(shè)的程序之后，控制模塊向所述通知部件發(fā)出結(jié)束信號，使得通知部件發(fā)出結(jié)束通知。
[0023]在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述恒溫部件的個(gè)數(shù)為一個(gè)、兩個(gè)、三個(gè)、四個(gè)或四個(gè)以上，優(yōu)選為三個(gè)或四個(gè)。
[0024]在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述啟動(dòng)開關(guān)為單一的啟動(dòng)開關(guān)，優(yōu)選為單一的啟動(dòng)按鈕。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述恒溫部件優(yōu)選為水浴和/或金屬浴，或其他任意合適的控溫部件。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述位移部件優(yōu)選為機(jī)械手。
[0025]在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述樣品可以裝在容納樣品的容器中，然后通過移位部件被移動(dòng)到合適的位置。所述容納樣品的容器可以為PCR管，可以是EP管，可以是離心管，也可以是其它管類。
[0026]在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述通知部件發(fā)出的結(jié)束通知為以聲音、閃光、顯示屏上的文字和/或圖形的形式來通知。
[0027]在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述核酸擴(kuò)增儀為用于檢測HPV病毒或尖銳濕疣的核酸擴(kuò)增儀，所述恒溫部件包括第一恒溫部件、第二恒溫部件、第三恒溫部件和第四恒溫部件，所述預(yù)設(shè)的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)程序?yàn)?
[0028]a)在第一恒溫部件中46-50 °C的溫度下將樣品溫育1_5分鐘；
[0029]b)在第二恒溫部件中92_97°C的溫度下將樣品溫育2-6分鐘；
[0030]c)在第二恒溫部件中92-97°C的溫度下將樣品溫育28-32秒；
[0031 ] d)在第二恒溫部件中46-50°C的溫度下將樣品溫育43-47秒；
[0032 ] e)在第三恒溫部件中70-74 °C的溫度下將樣品溫育18-22秒；
[0033]f)將步驟c)至步驟e)重復(fù)28-32次；
[0034]g)在第二恒溫部件中92_97°C的溫度下將樣品溫育28-32秒；
[0035]h)在第四恒溫部件中63-67 V的溫度下將樣品溫育43_47秒；
[0036]i)在第三恒溫部件中70_74°C的溫度下將樣品溫育18-22秒；以及
[0037]j)將步驟c)至步驟e)重復(fù)18-22次。
[0038]上述核酸擴(kuò)增儀可以為專用于檢測HPV病毒的核酸擴(kuò)增儀，或者可以為專用于檢測尖銳濕疣的核酸擴(kuò)增儀。
[0039]在本發(fā)明中，除非另有說明，所有重復(fù)均為按本發(fā)明的核酸擴(kuò)增儀中預(yù)設(shè)的次序重復(fù)。
[0040]在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述核酸擴(kuò)增儀為用于檢測HPV病毒或尖銳濕疣的核酸擴(kuò)增儀，所述恒溫部件包括第一恒溫部件、第二恒溫部件、第三恒溫部件和第四恒溫部件，所述預(yù)設(shè)的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)程序?yàn)?
[0041]a)在第一恒溫部件中48°C的溫度下將樣品溫育2分鐘；
[0042]b)在第二恒溫部件中94°C的溫度下將樣品溫育4分鐘；
[0043]c)在第二恒溫部件中94°C的溫度下將樣品溫育30秒；
[0044]d)在第二恒溫部件中48 0C的溫度下將樣品溫育45秒；
[0045]e)在第三恒溫部件中72°C的溫度下將樣品溫育20秒；
[0046]f)將步驟c)至步驟e)重復(fù)30次；
[0047]g)在第二恒溫部件中94°C的溫度下將樣品溫育30秒；
[0048]h)在第四恒溫部件中65 °C的溫度下將樣品溫育45秒；
[0049]i)在第三恒溫部件中72°C的溫度下將樣品溫育20秒；以及
[0050]j)將步驟c)至步驟e)重復(fù)20次。
[0051]上述核酸擴(kuò)增儀可以為專用于檢測HPV病毒的核酸擴(kuò)增儀，或者可以為專用于檢測尖銳濕疣的核酸擴(kuò)增儀。
[0052]在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述核酸擴(kuò)增儀為用于檢測K-ras基因的核酸擴(kuò)增儀，所述恒溫部件包括第一恒溫部件、第二恒溫部件和第三恒溫部件，所述預(yù)設(shè)的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)程序?yàn)?
[0053]a)在第一恒溫部件中92_97°C的溫度下將樣品溫育3-8分鐘；
[0054]b)在第一恒溫部件中92_97°C的溫度下將樣品溫育28-32秒；
[0055]c)在第二恒溫部件中53_57°C的溫度下將樣品溫育43-47秒；
[0056]d)在第三恒溫部件中70_74°C的溫度下將樣品溫育58-62秒；
[0057]e)將步驟b)至步驟d)重復(fù)29-31次；以及
[0058]f)在第三恒溫部件中保持70_74°C的溫度下將樣品溫育2-8分鐘。
[0059]上述核酸擴(kuò)增儀可以為專用于檢測K-ras基因的核酸擴(kuò)增儀。
[0060]在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述核酸擴(kuò)增儀為用于檢測K-ras基因的核酸擴(kuò)增儀，所述恒溫部件包括第一恒溫部件、第二恒溫部件和第三恒溫部件，所述預(yù)設(shè)的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)程序?yàn)?
[0061]a)在第一恒溫部件中94°C的溫度下將樣品溫育5分鐘；
[0062]b)在第一恒溫部件中94°C的溫度下將樣品溫育30秒；
[0063]c)在第二恒溫部件中55 °C的溫度下將樣品溫育45秒；
[0064]d)在第