.0~8.0當量，碳酸二乙酯的用量為1.0~3.0當量，溶劑為甲苯，反應(yīng) 溫度為回流溫度，反應(yīng)時間為1小時;然后中間體4-羥基-6-溴香豆素通過"方法A"生成化合 物4，相對于中間體4-羥基-6-溴香豆素的量，鄰苯二酚的量為1.5~3.0當量，醋酸鈉的量為 10.0~20.0當量，鐵氰化鉀的量為5.0~10.0當量；
[0057](三）制備化合物5,6,7
[0058]
[0059] (1)制備化合物5 (8，9-二羥基-1，3-二甲氧基苯并[4，5 ]呋喃并[3，2-c ]色烯-6-色 酮）；
[0060] 2,4,6_三羥基苯乙酮溶于丙酮中，加入碳酸鉀后，與硫酸二甲酯進行甲基醚化反 應(yīng)，生成中間體5a(2-羥基_4,6_二甲氧基苯乙酮）；相對于2,4,6_三羥基苯乙酮的量，碳酸 鉀的用量為5.0~10.0當量，硫酸二甲酯的用量為3.0~6.0當量，溫度為回流溫度，反應(yīng)時 間為5~8小時；然后中間體5a通過"方法B"與碳酸二乙酯發(fā)生環(huán)合反應(yīng)，生成中間體5b(4-羥基-5,7-二甲氧基香豆素）；相對于中間體5a的量，氫化鈉的用量為3.0~8.0當量，碳酸二 乙酯的用量為1.0~3.0當量，溶劑為甲苯，反應(yīng)溫度為回流溫度，反應(yīng)時間為1小時;最后中 間體5b通過"方法Α"生成化合物5，相對于中間體5b的量，鄰苯二酚的量為1.5~3.0當量，醋 酸鈉的量為10.0~20.0當量，鐵氰化鉀的量為5.0~10.0當量，反應(yīng)溫度為室溫，反應(yīng)時間 為2~3小時；
[00611 (2)制備化合物6 (8，9-二羥基-1，3-二乙氧基苯并[4，5 ]呋喃并[3，2-c ]色烯-6-色 酮）；
[0062] 具體為2,4,6_三羥基苯乙酮溶于丙酮中，加入碳酸鉀后與硫酸二乙酯進行乙基醚 化反應(yīng)，生成中間體6a(2-羥基_4,6_二乙氧基苯乙酮）；相對于2,4,6_三羥基苯乙酮的量， 碳酸鉀的用量為5.0~10.0當量，硫酸二乙酯的用量為3.0~6.0當量，溶劑為丙酮，溫度為 回流溫度，反應(yīng)時間為5~8小時;然后中間體6a通過"方法B"與碳酸二乙酯發(fā)生環(huán)合反應(yīng)生 成中間體6b(4-羥基_5,7_二乙氧基香豆素）；相對于中間體6a的量，氫化鈉的用量為3.0~ 8.0當量，碳酸二乙酯的用量為1.0~3.0當量，溶劑為甲苯，反應(yīng)溫度為回流溫度，反應(yīng)時間 為1小時；最后中間體6b通過"方法A"生成化合物6，相對于中間體6b的量，鄰苯二酚的量為 1.5~3.0當量，醋酸鈉的量為10.0~20.0當量，鐵氰化鉀的量為5.0~10.0當量，反應(yīng)溫度 為室溫，反應(yīng)時間為2~3小時；
[0063] (3)制備化合物7 (8，9-二羥基-1，3-二乙氧基-2-硝基苯并[4，5 ]呋喃并[3，2-c ]色 稀-6-色酮）；
[0064]中間體6b在濃硫酸中與硝酸鈉發(fā)生硝化反應(yīng)生成中間體6c(4_羥基-5，7_二乙氧 基-6-硝基香豆素）；相對于中間體6b的量，硝酸鈉的用量為1.0~2.0當量，反應(yīng)溫度為0°C， 反應(yīng)時間為1小時；隨后中間體6c通過"方法A"生成化合物7，相對于中間體6c的量，鄰苯二 酚的量為1.5~3.0當量，醋酸鈉的量為10.0~20.0當量，鐵氰化鉀的量為5.0~10.0當量， 反應(yīng)溫度為室溫，反應(yīng)時間為2~3小時；
[0065](四）制備化合物8，9:
[0066]
[0067] (1)制備化合物8(8，9_二羥基-3-甲氧基苯并[4,5]呋喃并[3,2-c]色烯-6-色酮）；
[0068] 2,4_二羥基苯乙酮溶于丙酮中，加入碳酸鉀，與硫酸二甲酯發(fā)生甲基醚化反應(yīng)，生 成中間體8a(2-羥基-4-甲氧基苯乙酮），相對于2,4，_二羥基苯乙酮的量，碳酸鉀的用量為 5.0~10.0當量，硫酸二甲酯的用量為3.0~6.0當量，溫度為回流溫度，反應(yīng)時間為5~8小 時;然后中間體8a通過"方法B"與碳酸二乙酯發(fā)生環(huán)合反應(yīng)，生成中間體8b(4-羥基-7-甲氧 基香豆素），相對于中間體8a的量，氫化鈉的用量為3.0~8.0當量，碳酸二乙酯的用量為1.0 ~3.0當量，溶劑為甲苯，反應(yīng)溫度為回流溫度，反應(yīng)時間為1小時；最后中間體8b通過"方法 A"生成化合物8，相對于中間體8b的量，鄰苯二酚的量為1.5~3.0當量，醋酸鈉的量為10.0 ~20.0當量，鐵氰化鉀的量為5.0~10.0當量，反應(yīng)溫度為室溫，反應(yīng)時間為2~3小時；
[0069] (2)制備化合物9(8，9-二羥基-3-乙氧基苯并[4，5]呋喃并[3，2-c]色烯-6-色酮）；
[0070] 2,4_二羥基苯乙酮溶于丙酮中，加入碳酸鉀后，與硫酸二乙酯發(fā)生乙基醚化反應(yīng) 生成中間體9a(2-羥基-4-乙氧基苯乙酮），相對于2,4，_二羥基苯乙酮的量，碳酸鉀的用量 為5.0~10.0當量，硫酸二乙酯的用量為3.0~6.0當量，溫度為回流溫度，反應(yīng)時間為5~8 小時;然后中間體9a通過"方法B"與碳酸二乙酯發(fā)生環(huán)合反應(yīng)，生成中間體9b(4-羥基-7-乙 氧基香豆素）；相對于中間體9a的量，氫化鈉的用量為3.0~8.0當量，碳酸二乙酯的用量為 1.0~3.0當量，溶劑為甲苯，反應(yīng)溫度為回流溫度，反應(yīng)時間為1小時；最后中間體9b通過 "方法A"生成化合物9，相對于中間體9b的量，鄰苯二酚的量為1.5~3.0當量，醋酸鈉的量為 10.0~20.0當量，鐵氰化鉀的量為5.0~10.0當量，反應(yīng)溫度為室溫，反應(yīng)時間為2~3小時；
[0071] (四）制備化合物10:
[0072]
[0073] (1)制備化合物10 (8，9-二羥基-2，2-二甲基-2H-苯并[4，5 ]呋喃[3，2-c ]吡喃并 [2,3-11]色烯-6-色酮）；
[0074] 2,4_二羥基苯乙酮溶解于丙酮中，在碳酸鉀和碘化鉀存在下，經(jīng)碘化亞銅催化與 3_氯-3-甲基-1-丁炔發(fā)生酚醚化反應(yīng)，生成中間體10a(2-羥基-4-(1，1_二甲基-2-丙炔氧 基)苯乙酮）；相對于2,4-二羥基苯乙酮，碳酸鉀用量為2.0~5.0,碘化鉀用量為2.0~4.5， 催化劑用量為0.02~0.1當量(優(yōu)選為0.05當量），3_氯-3-甲基-1-丁炔用量為1.0~1.5當 量(優(yōu)選1.05當量），溫度為40~70 °C，反應(yīng)時間為1.0~5.0小時;然后中間體10a在強堿條 件和高沸點溶劑中發(fā)生選擇性的Clainsen (克萊森）熱重排環(huán)合反應(yīng)，生成中間體10b(l-( 5-羥基-2 ， 2-二甲基-2H-色烯-6-基) -乙酮 ） ； 強堿為 NaH 、 Na 、 NaOH 或K0H ， 溶劑為甲苯 、二甲 苯、硝基苯或N，N'_二甲基甲酰胺，溫度為100~160°C，強堿用量為1.0~10.0當量，優(yōu)選為 4.0~6.0當量，反應(yīng)時間為8.0~24.0小時；中間體1 Ob經(jīng)"方法B"生成中間體10c (4-羥基-8，8_二甲基-8H-吡喃并[2，3-f]色烯-2-色酮），相對于10b的量，氫化鈉的用量為3.0~8.0 當量，碳酸二乙酯的用量為1.0~3.0當量，溶劑為甲苯，反應(yīng)溫度為回流溫度，反應(yīng)時間為1 小時;最后中間體l〇c通過"方法A"生成化合物10，相對于中間體10c的量，鄰苯二酚的量為 1.5~3.0當量，醋酸鈉的量為10.0~20.0當量，鐵氰化鉀的量為5.0~10.0當量，反應(yīng)溫度 為室溫，反應(yīng)時間為2~3小時；
[0075] (五)制備化合物11:
[0076]
[0077] (1)制備化合物11(8,9-二羥基_2!1-苯并[4,5]呋喃并[3,2-(3]吡喃[2,3-11]色烯-6-色酮）；
[0078] 2，4_二羥基苯乙酮在碳酸鉀存在下與炔丙基溴發(fā)生選擇性單醚化反應(yīng)得到中間 體lla(2-羥基-4-(1-丙炔氧基)苯乙酮），相對于2,4_二羥基苯乙酮的量，炔丙基溴的用量 為1.0~2.0當量，碳酸鉀用量為2.0~5.0當量，溶劑為丙酮，溫度為回流溫度，反應(yīng)時間為3 ~5小時；中間體11a在四氯化鉬催化作用下發(fā)生選擇性的Clainsen(克萊森)熱重排和環(huán)合 反應(yīng)，生成中間體llba_(5-羥基-2H-色烯-6-基)-乙酮），相對于中間體11a的量，四氯化鉑 的用量為0.005~0.02當量，溶劑為二氧六環(huán)，反應(yīng)溫度為50°C，反應(yīng)時間為1小時；中間體 lib經(jīng)"方法B"生成中間體llc(4-羥基-8H-吡喃并[2,3-f]色烯-2-色酮）；相對于lib的量， 氫化鈉的用量為3.0~8.0當量，碳酸二乙酯的用量為1.0~3.0當量，溶劑為甲苯，反應(yīng)溫度 為回流溫度，反應(yīng)時間為1小時；最后中間體11c通過"方法A"生成化合物11;相對于中間體 11c的量，鄰苯二酚的量為1.5~3.0當量，醋酸鈉的量為10.0~20.0當量，鐵氰化鉀的量為 5.0~10.0當量，反應(yīng)溫度為室溫，反應(yīng)時間為2~3小時；
[0079](六)制備化合物12:
[0080]
[0081 ] (1)制備化合物12(8，9-二羥基-5-甲基-5H-11-氧雜-5-氮雜苯并[a]芴-6-色酮）；
[0082] N-甲基鄰胺苯甲酸在醋酸酐和醋酸1:1的混合溶液中發(fā)生環(huán)合反應(yīng)，生成中間體 12a(4-乙?；?1-甲基-1H-喹啉-2-色酮），反應(yīng)溫度為回流溫度，反應(yīng)時間為3~5小時；中 間體12a在堿性條件下水解得到中間體12b(4-羥基-1-甲基-1H-喹啉-2-色酮）；相對于中間 體12a的量，堿為氫氧化鈉，用量為0.1~0.5當量，溶劑為乙醇，反應(yīng)溫度為室溫，反應(yīng)時間 為10分鐘；中間體12b通過"方法A"生成化合物12，相對于中間體12b的量，鄰苯二酚的量為 1.5~3.0當量，醋酸鈉的量為10.0~20.0當量，鐵氰化鉀的量為5.0~10.0當量，反應(yīng)溫度 為室溫，反應(yīng)時間為2~3小時；
[0083](七)制備化合物13:
[0084]
[0085] (1)制備化合物13(3-烯丙氧基-8，9-羥基-苯并[4，5]呋喃并[3，2-c]色烯-6-色 酮）；
[0086] 2,4_二羥基苯乙酮在堿性條件下與烯丙基溴進行選擇性單醚化得到中間體13a (2-羥基-4-(1-丙烯氧基)苯乙酮）；相對于2,4_二羥基苯乙酮的量，稀丙基溴的用量為1.0 ~3.0當量，堿為碳酸鉀，用量為2.0~6.0當量，溶劑為丙酮，溫度為回流溫度，反應(yīng)時間為 2.0~5.0小時；中間體13a經(jīng)"方法B"生成中間體13b(4-羥基-7-(1-丙烯氧基)香豆素），相 對于13a的量，氫化鈉的用量為3.0~8.0當量，碳酸二乙酯的用量為1.0~3.0當量，溶劑為 甲苯，反應(yīng)溫度為回流溫度，反應(yīng)時間為1小時；最后中間體13b通過"方法A"生成化合物13， 相對于中間體13b的量，鄰苯二酚的量為1.5~3.0當量，醋酸鈉的量為10.0~20.0當量，鐵 氰化鉀的量為5.0~10.0當量，反映溫度為室溫，反應(yīng)時間為2~3小時；
[0087](八）制備化合物14:
[0088]
[0089] (丨）制備化合物14(8，9-二羥基-丨，3-二甲氧基-5H4卜氧雜-5-氮雜苯并[A]芴- 6-色酮）；
[0090] 3,5_二甲氧基苯胺、丙二酸和氯化鋅溶于三氯氧磷中，發(fā)生環(huán)合反應(yīng)，生成中間體 14a(4-羥基-5，7-二甲氧基-1H-喹啉-2-色酮）；相對于3，5-二甲氧基苯胺的量，丙二酸的用 量為1.0~2.0當量，氯化鋅的用量為2.0~5.0當量，溶劑為三氯氧磷，反應(yīng)溫度為65°C，反 應(yīng)時間為24小時；中間體14a通過"方法A"生成化合物14;相對于中間體14a的量，鄰苯二酚 的量為1.5~3.0當量，醋酸鈉的量為10.0~20.0當量，鐵氰化鉀的量為5.0~10.0當量，反 應(yīng)溫度為室溫，反應(yīng)時間為2~3小時。
[0091]本發(fā)明的又一目的是提供天然產(chǎn)物Hirtellanine B在治療腫瘤藥物中的應(yīng)用。
[0092]醫(yī)學上已知，無節(jié)制的細胞增殖是癌癥的基本特征，天然產(chǎn)物Hirtellanine B能 夠抑制Jurkat細胞(人白血病淋巴細胞），Raji細胞(惡性B淋巴瘤細胞株）以及K562細胞(人 紅白血病細胞)增殖。本發(fā)明人對14個Hirtellanine B衍生物進行了生物活性篩選，結(jié)果顯 示這些衍生物對腫瘤細胞均具有一定的抑制活性。本發(fā)明人又通過流式細胞儀檢測細胞周 期的變化，研究了Hirtellanine B抑制細胞增殖的機制。實驗結(jié)果顯示2.5ug/ml濃度的 Hirtell