大孔吸附樹脂中貝類毒素的解吸裝置及其方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于水體中貝類毒素監(jiān)測技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及大孔吸附樹脂中貝類毒素的解吸裝置以及利用該裝置解吸貝類毒素的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]近年來，由于生活污水、工業(yè)廢水的大量排放，農(nóng)業(yè)、水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)及人類活動的影響，沿海水體富營養(yǎng)化日益嚴重，再加之全球氣候變化的影響，河口、海洋甚至淡水湖泊中有害赤潮的爆發(fā)日益頻繁，貝類毒素污染事件已經(jīng)成為世界范圍內(nèi)亟待解決的難題。所述貝類毒素主要為赤潮藻分泌的有毒有害藻毒素，由于通常在貝類體內(nèi)檢出，因而將這類生物毒素統(tǒng)稱為貝類毒素，人們食用被污染的貝類等水產(chǎn)品后引發(fā)貝類毒素中毒事件。脂溶性貝類毒素，包括大田軟海綿酸(Okada i c a c i d，OA )及其衍生物鰭藻毒素(Dinophysistoxins，DTXs)、扇貝毒素(Pectenotoxins，PTXs)、4下夷扇貝毒素(Yessotoxins , YTXs)、原多甲藻酸毒素(Azaspiracids，AZAs)、環(huán)亞胺毒素(Gymnodimine, GYM)和螺環(huán)內(nèi)酯毒素(Spirolides, SPXs)等，水溶性貝類毒素主要有麻痹性貝類毒素(Paralytic Shellfish Toxins , PSTs)和軟骨藻酸毒素(Domoic acid, DA)等。
[0003]大孔吸附樹脂因其吸附量高，顆粒均勻，機械強度好，不易破碎，殘留物少，預處理方便等，得到越來越廣泛的應用。近年來被越來越多地應用于水體中貝類毒素的監(jiān)測。如何有效解吸大孔吸附樹脂中吸附的有機化合物將直接影響著監(jiān)測的準確度。
[0004]大孔吸附樹脂的解吸目前主要有兩種方法，分別為靜態(tài)解吸法和動態(tài)解吸法。靜態(tài)解吸法雖然更利于大孔吸附樹脂解吸完全，但其耗時長、效率低的缺陷使得其應用受到很大限制，如申請公布號為CN 105055540 A的發(fā)明專利中靜態(tài)解吸試驗主要包括以下步驟:向已吸附飽和的2g樹脂中分別加入50mL95 %的乙醇溶液。在室溫下以120r/min的速度在搖床中振搖24h，使大孔吸附樹脂解吸完全，取上清液用0.22μπι濾膜過濾，濾液用分光光度計測定其中蘆丁和黃酮含量的含量，分別計算各大孔吸附樹脂的靜態(tài)解吸量。
[0005]動態(tài)解吸法主要借助層析柱等實驗工具，有效縮短了解吸時間。如申請公布號為CN 102928529 A的發(fā)明專利說明書中所描述的毒素萃取方法:將樹脂填料轉(zhuǎn)入沙芯濾柱中，用50?70mL去離子水洗去鹽分，把柱中水分正壓吹干，加入20mL甲醇，濾入蒸發(fā)瓶中，再加入20mL甲醇重復提取一次，提取液在40°C使甲醇揮發(fā)，殘余I?2mL水，用5mL 二氯甲烷萃取后離心，取出二氯甲烷層，再用5mL 二氯甲烷重復萃取一次，合并兩次二氯甲烷萃取層后用氮吹干，用1.0mL 80%的甲醇定容，以0.22μπι的濾膜過濾，進樣高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜分析。該法雖然解決了靜態(tài)解吸法耗時過長的問題，但該法步驟繁瑣，不便于同時進行多個樣品的處理，柱中水分采用正壓吹干的方法，該法并不能將水分完全吹干，導致后續(xù)還需二氯甲烷萃取、離心等步驟。此外，目前大孔吸附樹脂解吸方法中均需較大量的解吸液，使得其必須經(jīng)過氮吹或者真空吹干等步驟濃縮、重溶、過濾后，才可用于后續(xù)分析。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]針對上述現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷，本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種大孔吸附樹脂中貝類毒素的解吸裝置以及利用該裝置解吸貝類毒素的方法，可有效減少解吸步驟，操作簡單便捷、耗時短，且節(jié)約解吸液用量，可用于樣品的批量處理。
[0007]為解決所述技術(shù)問題，本發(fā)明大孔吸附樹脂中貝類毒素的解吸裝置包括大孔吸附樹脂中貝類毒素的解吸裝置，包括與真空栗相連接的固相萃取儀，所述真空栗和固相萃取儀之間連接設(shè)置過渡瓶，固相萃取儀的上蓋部設(shè)置一組小柱接頭，小柱接頭上連接設(shè)置導流針，該導流針上部連接設(shè)置微孔過濾器，玻璃針筒插接在該微孔過濾器上，所述玻璃針筒底部設(shè)置有隔濾材料層。
[0008]作為優(yōu)選，所述隔濾材料層選用脫脂棉。
[0009]所述微孔過濾器孔徑為0.10μηι~0.45μηι，優(yōu)選0.20μηι~0.30μηι。
[0010]相應的，為解決所述技術(shù)問題，本發(fā)明利用上述解吸裝置解吸貝類毒素的方法，其步驟包括:
1)將吸附有貝類毒素的大孔吸附樹脂置于超純水中浸泡2?3次，每次5?10min；
2)將浸泡后的待解吸大孔吸附樹脂轉(zhuǎn)移至玻璃針筒中，形成待解吸的大孔吸附樹脂層；
3)打開真空栗，調(diào)節(jié)真空控制閥，進行抽濾，直至即使再增大固相萃取儀內(nèi)部的真空度，待解吸的大孔吸附樹脂層也沒有水分流出為止；
4)關(guān)閉真空栗，將樣品瓶安置在固相萃取儀內(nèi)的支架上，調(diào)節(jié)支架高度使得導流針伸入樣品瓶內(nèi)部，且導流針伸入的長度為樣品瓶高度的I /I O?I /3;
5)向玻璃針筒中加入濃度為50?100%(體積比)的甲醇作為解吸液，攪拌I?3min，其中所加入甲醇的體積為待解吸大孔吸附樹脂體積的5?10倍；
6)打開真空栗，調(diào)節(jié)真空控制閥，控制流速為0.5?1.5mL/min，直至即使再增大固相萃取儀內(nèi)部的真空度，解吸液也不再流出為止，所得貝類毒素解吸液由樣品瓶收集；
7)關(guān)閉真空栗，取出樣品瓶(11)，置于-20°0-8(TC條件下保存。
[0011 ]作為優(yōu)選，當目標貝類毒素為脂溶性貝類毒素時，所述解吸液為100%甲醇；當目標貝類毒素為水溶性貝類毒素時，所述解吸液為50?80%的甲醇。
[0012]作為優(yōu)選，所述步驟5)中所加入解吸液的體積為待解吸大孔吸附樹脂體積的6?7倍。
[0013]作為優(yōu)選，所述步驟6)中控制流速為0.8?1.2mL/min。
[0014]本發(fā)明的有益效果在于:采用上述結(jié)構(gòu)的設(shè)備及方法，真空栗和固相萃取儀配合用于濾干大孔吸附樹脂中的水分，可避免大孔樹脂中水分的殘留。由于在真空栗和固相萃取儀之間連接設(shè)置了過渡瓶，當水量超出儲液槽容積時可倒吸進過渡瓶，水量達到過渡瓶容積的2/3左右時才需要拆卸裝置將水倒出，因而過渡瓶的設(shè)置不僅可保護真空栗不會因倒吸進水分而受到損壞，而且還有效避免因固相萃取儀內(nèi)部儲液槽容積較小而每次抽干大孔吸附樹脂中水分時都需要拆卸裝置傾倒液體。玻璃針筒和固相萃取儀之間設(shè)置有微孔過濾器并采用確定的孔徑，既可以在對大孔吸附樹脂解吸的同時進行了過濾，還可以保證在解吸液與大孔吸附樹脂攪拌接觸的過程中，不需要挨個調(diào)節(jié)通道控制閥就可以保證沒有解吸液流出，保證充分解吸的同時，還可省略后續(xù)的過濾步驟。玻璃針筒底部設(shè)置有隔濾材料層，玻璃針筒乳頭處空隙較小，設(shè)置隔濾材料層可有效防止大孔吸附樹脂堵塞乳頭。通過調(diào)節(jié)真空控制閥可有效控制解吸液穩(wěn)定的流速，保證萃取效率的一致性。大孔吸附樹脂經(jīng)濾干步驟后殘留水分可忽略不計，且所需解吸液用量較少，因而可省略濃縮、重溶步驟，直接進行上樣分析。整體而言，該裝置各部件的配合可省略過濾、濃縮及重溶步驟而不影響其解吸效果，有效簡化操作步驟，節(jié)約時間及解吸液用量，可對樣品進行批量處理。
【附圖說明】
[0015]圖1為大孔吸附樹脂中貝類毒素的解吸裝置的結(jié)