一種基于紫外指紋圖譜的公英青藍(lán)合劑質(zhì)量控制方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種質(zhì)量控制方法，具體涉及一種基于紫外指紋圖譜的公英青藍(lán)合劑 質(zhì)量控制方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 公英青藍(lán)合劑由蒲公英、大青葉、板藍(lán)根、金銀花等9味藥材組成，具有清熱解毒的 功效，臨床上用于傳染性法氏囊病的輔助治療。現(xiàn)收載于由農(nóng)業(yè)部獸藥評(píng)審中心編寫的《獸 藥國家標(biāo)準(zhǔn)匯編一獸藥地方標(biāo)準(zhǔn)上升國家標(biāo)準(zhǔn)》第三冊(cè)，目前其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)有黃芩苷、鹽酸小 檗堿及黃柏的薄層鑒別，綠原酸的定量測(cè)定。
[0003] 由于公英青藍(lán)合劑由9味中藥材組成，化學(xué)成分眾多，但現(xiàn)有技術(shù)中該公英青藍(lán)合 劑僅有兩項(xiàng)薄層鑒別與一種化學(xué)成分定量測(cè)定，不能預(yù)防生產(chǎn)中缺味投料的情況，難以控 制產(chǎn)品質(zhì)量。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是現(xiàn)有公英青藍(lán)合劑僅有兩項(xiàng)薄層鑒別與一種化學(xué) 成分定量測(cè)定，難以控制產(chǎn)品質(zhì)量，目的在于提供一種基于紫外指紋圖譜的公英青藍(lán)合劑 質(zhì)量控制方法，解決產(chǎn)品質(zhì)量難以控制的問題。
[0005] 為了能解決產(chǎn)品質(zhì)量難以控制的問題，本發(fā)明通過采用中藥指紋圖譜這種整體質(zhì) 量控制的方法實(shí)現(xiàn)。實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的的具體技術(shù)方案如下：
[0006] -種基于紫外指紋圖譜的公英青藍(lán)合劑質(zhì)量控制方法，包括以下步驟：
[0007] (1)對(duì)照紫外指紋圖譜的建立:將3批以上合格的公英青藍(lán)合劑分別用純化水稀釋 100倍以上，搖勻制得供試品，再以純化水為空白校零，利用紫外可見分光光度計(jì)進(jìn)行掃描 獲得紫外疊加圖譜，計(jì)算紫外疊加圖譜中的吸光度平均值，該吸光度平均值組成的指紋圖 譜即為對(duì)照紫外指紋圖譜；
[0008] (2)確定相似度的下限值，以及波峰和波谷位置處的吸光度范圍值:采用3批以上 合格公英青藍(lán)合劑，采用步驟（1)中相同的稀釋方法和掃描方法獲得合格品紫外圖譜，分別 用每批公英青藍(lán)合劑的合格品紫外圖譜與對(duì)照紫外指紋圖譜進(jìn)行對(duì)比計(jì)算出每批公英青 藍(lán)合劑的相似度，進(jìn)而得到相似度的下限值；同時(shí)通過統(tǒng)計(jì)合格品紫外圖譜的波峰和波谷 位置處的吸光度得到吸光度的對(duì)照范圍值；
[0009] (3)將待測(cè)公英青藍(lán)合劑按照步驟（1)中的稀釋方法和掃描方法獲得樣品紫外圖 譜；
[0010] (4)將樣品紫外圖譜與對(duì)照紫外指紋圖譜相同的分析方法進(jìn)行相似度分析，當(dāng)相 似度不低于下限值，且波峰和波谷位置處的吸光度在對(duì)照范圍值內(nèi)時(shí)判定為合格品。
[0011]中藥指紋圖譜是基于對(duì)中藥物質(zhì)群整體作用的認(rèn)識(shí)，可以較充分的反映出中藥復(fù) 雜混合體系中各種化學(xué)成分量分布的整體狀況，采用指紋圖譜對(duì)其進(jìn)行宏觀綜合分析是一 種有效的手段，已廣泛應(yīng)用于中藥的質(zhì)量評(píng)價(jià)中。目前建立中藥指紋圖譜的方法主要有紫 外光譜法、紅外光譜法、液相色譜法、氣相色譜法等。但在公英青藍(lán)合劑中并沒有有效的中 藥指紋圖譜，且不能有效保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確率、精密度、穩(wěn)定性和重復(fù)性均能滿足需求。
[0012] 通過本發(fā)明的公英青藍(lán)合劑質(zhì)量控制方法，并通過實(shí)施例的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)即可有效證 明：本發(fā)明的方法能有效保證檢測(cè)結(jié)果的高準(zhǔn)確率、精密度、穩(wěn)定性和重復(fù)性，效果十分顯 著。
[0013] 為了能達(dá)到最優(yōu)的效果，其中，紫外可見分光光度計(jì)的掃描的光譜條件為：
[0014] 光譜帶寬：2 . OOnm，掃描范圍：200.00~900 . OOnm，光度模式：Abs，掃描間隔： 1·OOnm;
[0015] 設(shè)相似度的下限值為V，該V的計(jì)算公式如下：
[0016] V = D*a_3% )，其中，D為合格品紫外圖譜的最低值。
[0017]優(yōu)選地，所述樣品紫外圖譜與對(duì)照紫外指紋圖譜經(jīng)過數(shù)據(jù)處理軟件"IBM SPSS statistics"中雙變量相關(guān)"Kendall ' s tau_b"分析計(jì)算相似度。
[0018] 通過實(shí)驗(yàn)證明，本發(fā)明中公英青藍(lán)合劑稀釋10及100倍時(shí)，部分吸光度值超過 lOAbs，圖譜顯示不完整，稀釋1000倍時(shí)，在900~200nm范圍內(nèi)，所有吸光度值在0~lAbs之 間，效果更加顯著。因而，本發(fā)明中所述公英青藍(lán)合劑用純化水稀釋的倍數(shù)為1000倍，具體 稀釋步驟為：
[0019] 精密移取公英青藍(lán)合劑lmL加純化水稀釋至10mL，搖勻制成稀釋液，再精密移取 lmL稀釋液加純化水稀釋至100mL，搖勻制得供試品溶液。
[0020] 通過上述檢測(cè)方法以及計(jì)算規(guī)則得出，所述相似度的下限值為0.910。所述波峰的 波長(zhǎng)為317 · 00nm、282 · OOnm，波谷的波長(zhǎng)為259 · OOnm; 317 · OOnm處的吸光度范圍值為0 · 165 ~0 · 265，282 · OOnm處的吸光度范圍值為0 · 162~0 · 285，259 · OOnm處的吸光度范圍值為 0.137~0.240〇
[0021] 本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有如下的優(yōu)點(diǎn)和有益效果：
[0022] 1、本發(fā)明提供了一種從整體上對(duì)公英青藍(lán)合劑的質(zhì)量進(jìn)行控制的方法，解決現(xiàn)有 公英青藍(lán)合劑僅有兩項(xiàng)薄層鑒別與一種化學(xué)成分定量測(cè)定，難以控制產(chǎn)品質(zhì)量的問題；
[0023] 2、本發(fā)明的質(zhì)量控制方法操作簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確率高，且檢測(cè)結(jié)果的精密度、穩(wěn)定性和重 復(fù)性均十分優(yōu)秀，效果十分顯著。
【附圖說明】
[0024] 此處所說明的附圖用來提供對(duì)本發(fā)明實(shí)施例的進(jìn)一步理解，構(gòu)成本申請(qǐng)的一部 分，并不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明實(shí)施例的限定。在附圖中：
[0025] 圖1為本發(fā)明實(shí)施例中的紫外疊加圖譜，該圖1中集合有10批公英青藍(lán)合劑的曲線 圖，存在重合的部分，因而無法進(jìn)行更加清晰的顯示；
[0026] 圖2為本發(fā)明中的對(duì)照紫外指紋圖譜；
[0027] 圖3為實(shí)施例3中稀釋10倍時(shí)的紫外圖譜；
[0028] 圖4為實(shí)施例3中稀釋100倍時(shí)的紫外圖譜；
[0029] 圖5為實(shí)施例3中稀釋1000倍時(shí)的紫外圖譜。
【具體實(shí)施方式】
[0030] 為使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，下面結(jié)合實(shí)施例和附圖，對(duì)本 發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)說明，本發(fā)明的示意性實(shí)施方式及其說明僅用于解釋本發(fā)明，并不作 為對(duì)本發(fā)明的限定。
[0031] 實(shí)施例1
[0032] 如圖1所示，本發(fā)明一種基于紫外指紋圖譜的公英青藍(lán)合劑質(zhì)量控制方法，包括以 下步驟：
[0033] (1)對(duì)照紫外指紋圖譜的建立
[0034] 首先，將綠原酸含量合格的10批公英青藍(lán)合劑，分別用純化水稀釋1000倍，搖勻制 得供試品，再以純化水為空白校零，利用紫外可見分光光度計(jì)對(duì)供試品進(jìn)行掃描獲得紫外 疊加圖譜，如圖1所示。
[0035] 其中，所述公英青藍(lán)合劑的具體稀釋步驟為：
[0036] 精密移取公英青藍(lán)合劑lmL加純化水稀釋至10mL，搖勻制成稀釋液，再精密移取 lmL稀釋液加純化水稀釋至100mL，搖勻制得供試品溶液；
[0037] 所述紫外可見分光光度計(jì)掃描的光譜條件為：
[0038] 光譜帶寬：2 . OOnm，掃描范圍：200.00~900 . OOnm，光度模式：Abs，掃描間隔： 1.00nm;且本實(shí)施例中該紫外可見分光光度計(jì)采用TU-1810PC型紫外可見分光光度計(jì)。
[0039] 然后再計(jì)算紫外疊加圖譜中的吸光度平均值，該吸光度平均值組成的指紋圖譜即 為對(duì)照紫外指紋圖譜，該對(duì)照紫外指紋圖譜中波長(zhǎng)與吸光度的對(duì)應(yīng)值如表1所示。
[0040] 表 1
[0041]
[0042]
[0043]
[(JU44」 與該衣1甲數(shù)聒ffl對(duì)吆的對(duì)照絮外指漢圖堵卯圖;^/r不。
[0045] (2)確定相似度的下限值
[0046] 首先，采用另外10批合格公英青藍(lán)合劑，采用步驟(1)中相同的稀釋方法和掃描方 法獲得合格品紫外圖譜，分別用每批公英青藍(lán)合劑的合格品紫外圖譜與對(duì)照紫外指紋圖譜 進(jìn)行對(duì)比，經(jīng)過數(shù)據(jù)處理軟件"IBM SPSS statistics"中雙變量相關(guān)"Kendall's tau_b"分 析計(jì)算出每批公英青藍(lán)合劑的相似度。同時(shí)，檢測(cè)本步驟中10批合格公英青藍(lán)合劑的合格 品紫外圖譜在波長(zhǎng)為317.00nm、282.00nm、259. OOnm處的吸光度，相似度和吸光度的結(jié)果如 表2所示。
[0047] 表 2
[0048]
[0049]
[0050]通過上述表2中相似度結(jié)果，并結(jié)合V = D*( 1-3% )的計(jì)算公式計(jì)算出相似度的下 限值。其中V為相似度的下限值，D為合格品紫外圖譜的最低值。本實(shí)施例中該相似度的下限 值V為0.910。
[0051 ] 同時(shí)，通過上述表2中的結(jié)果可知，317. OOnm處的吸光度范圍值為0.165~0.265， 2